植物小肽對(duì)斷奶至2月齡新西蘭兔生長(zhǎng)發(fā)育、免疫性能及血液生化指標(biāo)的影響

山東省菏澤學(xué)院動(dòng)物科學(xué)系 初漢平

長(zhǎng)期以來(lái)人們普遍認(rèn)為，蛋白質(zhì)必須被水解為游離氨基酸后才能被吸收。然而有研究發(fā)現(xiàn)，以理想氨基酸模式配制的純合日糧或低蛋白質(zhì)的組合氨基酸日糧飼喂動(dòng)物，并不能達(dá)到最佳的生產(chǎn)性能（Webb 等，1992；Pinchasov等，1990）。 研究表明，小肽比單一氨基酸更容易被吸收和利用（Boze等，2000），在提高蛋白質(zhì)合成，消除游離氨基酸的吸收競(jìng)爭(zhēng)，提高動(dòng)物生產(chǎn)性能，增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體的免疫力等方面也發(fā)揮著重要作用（李煥友和何葉如，2004；陳勇等，1999）。

植物小肽是含生物活性物質(zhì)的小肽蛋白源，是新一代綠色、高效的營(yíng)養(yǎng)性飼料添加劑（楊維仁等，2008）。本試驗(yàn)以植物小肽為研究對(duì)象，分析其對(duì)斷奶至2月齡新西蘭兔生產(chǎn)性能、免疫性能及血液生化指標(biāo)的影響，為植物小肽在肉兔生產(chǎn)中的應(yīng)用提供一定的試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理 于山東省農(nóng)科院畜牧所試驗(yàn)兔場(chǎng)，將150只體重相近 [（726.12±33.81）g]、健康狀況良好的斷奶新西蘭兔隨機(jī)分為5組，分別為對(duì)照組和4個(gè)試驗(yàn)組，每組30個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只。試驗(yàn)兔單籠飼養(yǎng)，人工喂料，自由飲水，自然采光，自然通風(fēng)，每3～5 d消毒兔舍一次。預(yù)試期7 d，正試期30 d，試驗(yàn)期間試兔自由采食配合顆粒飼料。

1.2 試驗(yàn)日糧 日糧配制參照NRC（1977）肉兔飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。對(duì)照組、試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組日糧的植物小肽添加水平（飼喂?fàn)顟B(tài)基礎(chǔ)）分別為 0、0.30%、0.60%、0.90%、1.20%。日糧加工成4～6 mm的顆粒飼料。

本試驗(yàn)所用的植物小肽由大豆蛋白質(zhì)經(jīng)生物酶解法生產(chǎn)而成，主要以二肽和三肽為主，由上海邦成生物科技有限公司提供。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 樣品采集與處理 試驗(yàn)開(kāi)始后的第30天早晨空腹心臟采血10 mL，37℃水浴靜置30 min，3000 r/min離心10 min，分離所得血清分裝于Eppendorf管中，置于液氮中保存待測(cè)。每組隨機(jī)抽取6只試兔屠宰，取脾臟、胸腺、下頜淋巴結(jié)、腹股溝淋巴結(jié)并稱重。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.4.1 生產(chǎn)性能 于試兔正試期開(kāi)始當(dāng)天晨飼前空腹稱重作為試兔始重，試驗(yàn)結(jié)束后空腹稱重作為試兔末重，正試期內(nèi)每天準(zhǔn)確記錄采食量，用于計(jì)算平均日采食量（ADI）、平均日增重（ADG）和料肉比（F/G）。

1.4.2 免疫性能

1.4.2.1 免疫器官指數(shù) 分別計(jì)算脾臟、胸腺、下頜淋巴結(jié)、腹股溝淋巴結(jié)指數(shù)。免疫器官指數(shù)（g/kg）=免疫器官重（g）/宰前活重（kg）。

1.4.2.2 血清中免疫球蛋白的測(cè)定 免疫比濁法。

1.4.3 血液生化指標(biāo) 采用Olympus AU 2700全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清總蛋白 （TP）、白蛋白（ALB）、膽固醇（CHO）、血清尿素氮（SUN），試劑盒購(gòu)自日本和光純藥工業(yè)株式會(huì)社，操作按照說(shuō)明書進(jìn)行。

1.5 數(shù)據(jù)處理 用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件的ANOVA法進(jìn)行方差分析，并用鄧肯氏法進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，各組數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 植物小肽對(duì)斷奶至2月齡新西蘭兔生產(chǎn)性能的影響 由表2可知，試驗(yàn)組兔平均日增重顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），Ⅱ組平均日增重最高，比對(duì)照組提高了29.85%；試驗(yàn)組料重比顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），Ⅱ組料重比最低，與對(duì)照組相比降低了24.59%。

表2 植物小肽對(duì)試兔生產(chǎn)性能的影響

2.2 植物小肽對(duì)斷奶至2月齡新西蘭兔免疫性能的影響

2.2.1 植物小肽對(duì)免疫器官指數(shù)的影響 由表3可以看出，Ⅱ組的胸腺指數(shù)顯著高于對(duì)照組、Ⅳ組（P＜0.05），與對(duì)照組比提高了35.47%；Ⅱ組下頜淋巴結(jié)指數(shù)顯著高于對(duì)照組、Ⅲ組和Ⅳ組（P＜0.05）；脾臟指數(shù)和腹股溝淋巴結(jié)指數(shù)各組間差異不顯著（P ＞ 0.05）。

2.2.2 植物小肽對(duì)血清免疫球蛋白的影響 由表4可知，植物小肽對(duì)血清中IgG有顯著影響（P＜0.05），隨著植物小肽添加量的增加，IgG呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì)；而IgA與IgM無(wú)明顯的變化規(guī)律。

表3 植物小肽對(duì)試兔免疫器官指數(shù)的影響g/kg

表4 植物小肽對(duì)試兔血清免疫球蛋白的影響nmol/L

2.3 植物小肽對(duì)斷奶至2月齡新西蘭兔血液生化指標(biāo)的影響 由表5可以看出，植物小肽對(duì)試兔血清總蛋白影響顯著（P＜0.05），Ⅱ組顯著高于Ⅰ組和對(duì)照組（P＜0.05）；植物小肽對(duì)試兔血清膽固醇影響顯著（P＜0.05），Ⅱ組顯著高于對(duì)照組、Ⅰ組和Ⅳ組（P＜0.05）；血清白蛋白和血清尿素氮未出現(xiàn)顯著性變化（P＞0.05）。

表5 植物小肽對(duì)試兔血清生化指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 植物小肽對(duì)斷奶至2月齡新西蘭兔生產(chǎn)性能的影響 王恬等（2003）認(rèn)為，小肽可以被仔豬完整而有效地吸收，減少大腸后段氨氣和有毒胺類的產(chǎn)生，同時(shí)能維持消化道正常的免疫功能，降低腹瀉率。完全以小肽形式供給動(dòng)物蛋白質(zhì)時(shí)，蛋白質(zhì)沉積效率高于相應(yīng)游離氨基酸日糧或完整蛋白質(zhì)日糧（王碧蓮等，2000），且賴氨酸的吸收速度不再受精氨酸的影響（施用輝，1996），由此可以充分發(fā)揮各種游離氨基酸的營(yíng)養(yǎng)吸收作用，提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能。另外，一部分作為營(yíng)養(yǎng)調(diào)控物的生理活性小肽，可作為神經(jīng)遞質(zhì)間接刺激腸道激素受體或促進(jìn)酶的分泌，進(jìn)而促進(jìn)小腸發(fā)育，增強(qiáng)了仔豬對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收（Kelly等，1992）。小肽對(duì)兔的促生長(zhǎng)作用機(jī)理可能與仔豬相同。

本試驗(yàn)條件下，日糧中添加植物小肽可以提高肉兔的日增重和飼料轉(zhuǎn)化率，與蔣培紅等（2007）的研究結(jié)論基本一致。

3.2 植物小肽對(duì)斷奶至2月齡新西蘭兔免疫性能的影響

3.2.1 植物小肽對(duì)斷奶至2月齡新西蘭兔免疫器官發(fā)育的影響 一般來(lái)說(shuō)，免疫器官和免疫指數(shù)在一定程度上反映了動(dòng)物的免疫功能，在動(dòng)物健康的情況下，免疫指數(shù)越高動(dòng)物的免疫功能越強(qiáng)（陶志勇和李福昌，2005）。李清和毛華明（2005）報(bào)道，小肽可以顯著促進(jìn)鯉魚的免疫性能。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，添加植物小肽組試兔的免疫器官發(fā)育明顯好于對(duì)照組。

3.2.2 植物小肽對(duì)斷奶至2月齡新西蘭兔血清中免疫球蛋白的影響 Berger等（1993）認(rèn)為，免疫球蛋白的含量以及機(jī)體對(duì)于某些特異性抗原的抗體產(chǎn)生情況都是衡量動(dòng)物免疫功能強(qiáng)弱的重要指標(biāo)，也是評(píng)價(jià)營(yíng)養(yǎng)對(duì)機(jī)體免疫功能作用情況的常用參數(shù)。免疫球蛋白的含量反映了動(dòng)物體液免疫的狀況，一般在正常范圍內(nèi)，其數(shù)值越大，動(dòng)物的免疫功能則越強(qiáng)（呂建敏等，2010）。

IgG是介導(dǎo)體液免疫的主要抗體，淋巴細(xì)胞在免疫應(yīng)答過(guò)程中起核心作用，是體液免疫中最為重要的物質(zhì)。祝平（2007）發(fā)現(xiàn)，哺乳仔豬日糧中使用植物小肽能夠顯著提高斷奶仔豬血清中IgG水平。本試驗(yàn)中，血清IgG含量隨植物小肽水平的增加呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì)。因此可以認(rèn)為，適宜的植物小肽水平有利于增強(qiáng)生長(zhǎng)肉兔的體液免疫功能。但本試驗(yàn)中，試兔血清IgA、IgM含量無(wú)明顯的變化規(guī)律，其原因有待進(jìn)一步探討。

3.3 植物小肽對(duì)斷奶至2月齡新西蘭兔血液生化指標(biāo)的影響 血清總蛋白和白蛋白在一定程度上反映了日糧蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)水平及動(dòng)物對(duì)蛋白質(zhì)的消化吸收程度。一般來(lái)說(shuō)，機(jī)體的營(yíng)養(yǎng)狀況好，蛋白質(zhì)合成增加，血清總蛋白水平升高（張永翠和李福昌，2008）。本試驗(yàn)中，當(dāng)植物小肽添加量為0.6%時(shí)，血清總蛋白的含量顯著升高，表明此時(shí)氨基酸基本平衡，試兔對(duì)氨基酸和小肽的吸收利用最佳，蛋白質(zhì)沉積達(dá)到最大。

秦應(yīng)和等（2010）指出，膽固醇是構(gòu)成細(xì)胞膜的重要成分，也是合成膽汁、維生素D和激素的原料，可在一定程度上反映體內(nèi)脂肪代謝狀況，血清膽固醇與生長(zhǎng)性能呈現(xiàn)正相關(guān)。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，植物小肽能顯著提高血清膽固醇含量，表明植物小肽對(duì)生長(zhǎng)肉兔體內(nèi)脂肪代謝可能產(chǎn)生一定影響，并提高肉兔的生產(chǎn)性能。

血清尿素氮濃度可以較準(zhǔn)確的反映動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和氨基酸代謝之間的平衡狀況。當(dāng)氨基酸平衡良好時(shí)，血清尿素氮的濃度顯著下降（Scott等，1982）。本試驗(yàn)中，添加植物小肽未對(duì)血清尿素氮的含量產(chǎn)生顯著影響，說(shuō)明添加植物小肽未造成體內(nèi)氨基酸的不平衡。

4 結(jié)論

植物小肽可以顯著提高斷奶至2月齡新西蘭兔的生長(zhǎng)發(fā)育和免疫性能；并顯著影響血清總蛋白和膽固醇含量；添加效果以0.60%最好。

[1]陳勇，曹光辛，王鋒.小肽吸收機(jī)制及營(yíng)養(yǎng)作用[J].中國(guó)飼料，1999，12：15～17.

[2]蔣培紅，初漢平，許騰.小肽對(duì)斷奶獺兔生長(zhǎng)性能和免疫性能的影響[J].中國(guó)飼料，2007，8：29 ～ 31.

[3]李煥友，何葉如.小肽制劑對(duì)肉豬生產(chǎn)性能與豬肉品質(zhì)的影響[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2004，7：8 ～ 10.

[4]李清，毛華明.小肽對(duì)鯉魚免疫力的影響[J].飼料研究，2005，5：1～3.

[5]呂建敏，程鑒冰，屠玨，等.日糧粗蛋白質(zhì)水平對(duì)生長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)兔生長(zhǎng)性能和免疫功能的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2010，22（1）：75 ～ 81.

[6]秦應(yīng)和，李福昌，麻明文.蛋氨酸對(duì)生長(zhǎng)獺兔生產(chǎn)性能及生化指標(biāo)的影響[J].飼料研究，2010，12：44 ～ 46.

[7]施用輝.不同比例寡肽與氨基酸對(duì)來(lái)航公雞氨基酸吸收的影響[J].四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1996，增刊：37～45.

[8]陶志勇，李福昌.日糧中性洗滌纖維水平對(duì)斷奶至2月齡肉兔生產(chǎn)性能、消化代謝和盲腸發(fā)酵的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2005，17（4）：56 ～ 61.

[9]王碧蓮，周圍，羅虹，等.喂大快對(duì)產(chǎn)蛋雞后期生產(chǎn)性能的影響[J].飼料研究，2000，2：32 ～ 33.

[10]王恬，傅永明，呂俊龍，等.小肽營(yíng)養(yǎng)素對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能及小腸發(fā)育的影響[J].畜牧與獸醫(yī)，2003，35（6）：4 ～ 8.

[11]楊維仁，祝平，楊在賓，等.哺乳期使用植物小肽對(duì)斷奶仔豬消化酶活性、免疫功能及消化道酸度的影響[J].中國(guó)糧油學(xué)報(bào)，2008，23（2）：133 ～141.

[12]張永翠，李福昌.日糧添加不同水平蛋氨酸對(duì)2～3月齡肉兔生長(zhǎng)發(fā)育、免疫性能及血液生化指標(biāo)的影響[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2008，21（2）：472 ～475.

[13]祝平.植物小肽對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能影響及其機(jī)理的研究：[碩士學(xué)位論文][D].泰安：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2007.

[14]Berger A，Bruce G J，Chiang B L，et al.Influence of feeding unsaturated fats on growth and immune status of mice[J].Journal of Nutrition，1993，123：225～233.

[15]Boze J J，Moennoz D，Vuichoud J，et al.Protein hydrolysate vs free amino acid 2 based diets on the nutritional recovery of the starved rat[J].European Journal of Nutrition，2000，39（6）：237 ～ 243.

[16]Kelly D R，Begbie，King T P.Postnatal intestinal development[A].Varley M A，Williams P E V，Lawrence T L J.Neonatal Survival and Growth[C].Occasioal Publication NO.15.British Society of Animal Production Edinburgh，1992.63 ～ 79.

[17]Pinchasov Y，Mendonca C X，Jensen L S.Broiler chick response to low protein dietssupplemented with synthetic amino acids[J].Poultry Science，1990，69（11）：1950 ～ 1955.

[18]Scott M L，Esheim M C N，Yong R J.Nutrition of the Chicken（3rd）[M].Ithaca，New York，1982.

[19]Webb K E J，Matthews J C，Dirienzo D B.Peptie absorption：A review of current concepts and future perspectives[J].Journal of Animal Science，1992，70：3248 ～ 3257.