參萸清眩膏薄層色譜鑒別

左艷敏 吳振英 王筱婧

參萸清眩膏為本院制劑，是由黨參、熟地黃、枸杞子、山茱萸等100多味中藥加蜂蜜研制而成，主要治療美尼爾氏病、美尼爾氏綜合癥以及多種原因引起的眩暈癥。本實驗采用薄層色譜法，對參萸清眩膏中的主要組成藥物山茱萸、肉蓯蓉、枸杞子、黨參等進行了定性鑒別，為其質量控制提供依據。現將實驗結果報道如下。

儀器與試劑

JA2003N型電子天平(上海精密科學儀器有限公司天平儀器廠);HG71-A型電子烘干箱(北京試驗設備廠);W-105微量進樣器(上海醫用激光儀器廠);ZF-2型三用紫外線分析儀(上海安亭電子儀器廠);薄層硅膠 G 板(100 mm ×200 mm，厚度0．20～0．25 mm(青島海洋化工廠);參萸清眩膏(自制:批號20110409);對照藥材山茱萸、肉蓯蓉、枸杞子、黨參(中國藥品生物制品檢定所);所用化學試劑均為分析純。

方法與結果

1．山茱萸的鑒別取參萸清眩膏20 ml，加乙酸乙酯30 ml，振搖提取并超聲處理30分鐘，濾過或離心分離，取乙酸乙酯層，蒸干，殘渣加無水乙醇1 ml溶解，作為供試品溶液。另精密稱取山茱萸對照藥材2 g，剪碎，加乙酸乙酯20 ml，振搖提取并超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，加無水乙醇1 ml溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法［1］實驗，吸取上述兩種溶液各8μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20∶4∶0．5)為展開劑，展開，取出，晾干。噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的紫紅色斑點，置紫外光燈(365 nm)下檢視，顯橙黃色熒光斑點，如圖1所示。

2．肉蓯蓉的鑒別

取參萸清眩膏20 ml，加乙醇20～30 ml，加熱回流20分鐘，濾過，濾液加鹽酸2 ml，再加熱回流30分鐘，取該液濃縮至5 ml，加水10 ml稀釋，用石油醚20 ml，充分振搖提取，分取提取液(必要時離心分取)，蒸干，殘渣加乙醇1 ml溶解，作為供試品溶液。另取肉蓯蓉對照藥材2 g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法實驗［1］，取供試品溶液 15μl，對照藥材溶液10μl，分別點于同一硅膠G 板上，以氯仿-甲醇(40∶1)為展開劑，展開，取出，晾干。置紫外光燈下(365 nm)檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上(距離點樣點約25 mm)，顯相同顏色的熒光斑點(淡綠色);噴以磷鉬酸試液，在110℃加熱后，在與對照藥材色譜相應位置上(距離點樣點約120 mm和140 mm)，呈現黑綠色斑點，如圖2所示。

3．枸杞子的鑒別

取參萸清眩膏20 ml，加水20 ml，振搖稀釋，用乙醚20 ml充分振搖提取，離心分取乙醚層，揮干，殘渣用乙酸乙酯1 ml溶解，作為供試品溶液。另取枸杞子對照藥材2 g，剪碎，用乙醚20 ml充分振搖提取，濾過，濾液揮干，殘渣用乙酸乙酯1 ml溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法實驗［1］，取供試品溶液及對照藥材溶液各10 μl，分別點于同一硅膠G板上，以乙酸乙酯-氯仿-甲酸(3∶2∶1)為展開劑，展開，取出，晾干。置紫外光燈下(365 nm)檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上顯櫻桃紅色的熒光斑點，如圖3所示。

4．黨參的鑒別

取參萸清眩膏20 ml，溫熱后加水20 ml稀釋，加正己烷20 ml，充分振搖提取1小時，或超聲處理20分鐘，分取正己烷，揮干，加甲醇0．5 ml溶解，作為供試品溶液。另取黨參對照藥材2 g，剪碎，加正己烷15 ml，振搖提取1小時，或超聲處理20分鐘，濾過，濾液揮干，加甲醇0．5 ml溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法實驗［1］，取兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-氯仿-甲酸(3∶2∶1)為展開劑，展開，取出，晾干。置紫外光燈(365 nm)下檢視，供試品色譜中在與對照藥材色譜相應位置上顯淡黃色熒光斑點，如圖4所示。

討 論

參萸清眩膏為煎膏劑。在鑒別方法上，除各藥之間的相互干擾外，此劑型中含有大量蜂蜜干擾較大，故進行薄層實驗比較困難。關鍵問題是提取劑的選擇，要求即能提取有關成分，又便于分離出來。

中國藥典2000年版一部中關于枸杞子藥材的薄層鑒別法［2］為水煮后用乙酸乙酯提取，濃縮后作為供試品溶液，照此法，本制劑因系煎膏劑而致使提取過程中難以實現分離，僅可獲得少量供試品溶液，經點樣，展開后無明顯的色譜特征，無法與對照藥材色譜比較。以乙醇作為提取劑，結果供試品溶液和對照藥材溶液均未顯色，置紫外光燈下也無熒光。以氯仿為提取劑，檢品與氯仿提取后分離較困難，同樣醋酸乙酯溶解后展開，結果檢品溶液色譜無明顯特征。對照藥材溶液色譜中只顯不規則的黃色斑點，無法比較。改用乙醚為提取劑后，供試品溶液的色譜中，在與對照藥材溶液色譜的相應位置上顯相同顏色的斑點。其斑點特征為:在自然光下為兩個相同的乳白色斑點，在自然光透視時為兩個相同的深灰色斑點，在紫外燈光下檢視為兩個相同的櫻桃紅色斑點。兩者的色譜特征完全一致，Rf值相近分別為(1．00:0．996)，且陰性對照無干擾。

參萸清眩膏為復方制劑，成分較為復雜，用薄層色譜法對方中主要藥物進行定性鑒別，斑點清晰，準確可靠，結果重現性良好，可為參萸清眩膏制定質量標準提供依據。

圖1、山茱萸的薄層鑒別圖譜

圖2、肉蓯蓉的薄層鑒別圖譜

圖3、枸杞子的薄層鑒別圖

1 國家藥典委員會．中國藥典·一部［M］．北京:化學工業出版社，2005:附錄ⅥB．

2 國家藥典委員會．中國藥典·一部［M］．北京:化學工業出版社，2005．