男性不育患者血清和精漿中鉛、超氧化物歧化酶和丙二醛含量的研究

高亞萍，陳拽生，邵 嵐，李國正，杜麗榮，李榮秀*

1.河北省計劃生育科學技術研究院，河北石家莊 050071；2.石家莊市婦幼保健院，河北石家莊 050081

研究發現男性不育癥患者精漿中超氧化物歧化酶（SOD）活性降低[1]，丙二醛（MDA）含量升高。另有研究表明，汽車司機血液中SOD活性隨著血鉛水平的上升而降低，血液中MDA含量隨著血鉛水平的上升而升高[2]，提示男性不育患者精漿中SOD和MDA含量的變化可能與鉛污染有關。但是，男性不育者精漿中SOD和MDA的變化與血清和精漿中的鉛含量的研究數據，尚未見文獻報道。近年來，由于電子產業、汽車和交通業的迅猛發展，含鉛物質對環境的污染日益加劇，男性不育患者呈逐年上升趨勢。本研究對無明顯鉛污染接觸史的男性不育患者測定血清和精漿中鉛水平、SOD活力和MDA含量，與精液常規檢驗正常男性進行比較，旨揭示男性不育癥患者精漿中SOD活性降低，MDA含量升高的因素，為尋求更有效的診治方法提供依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2009年9月～2010年11月在河北省計劃生育科學技術研究院男科門診就診的患者，檢查前6個月內無服用對精子有影響的食物或激素類藥物，除去精液中白細胞異常增多和輸精管梗阻者。按照世界衛生組織（WHO）的精液分析標準，隨機選擇精子密度≥20×106/ml，A、B級精子≥50%的精液常規正常者100例為對照組，均為無明顯鉛接觸史，無生殖道疾病，無開車史和抽煙史，前來查體欲求優生者。精子常規檢查為少、弱、畸精子癥的不育患者95例為不育組，兩組受試對象年齡22～38歲，平均（32.0±3.6）歲。兩組患者一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 樣品的采集與處理

1.2.1 精液標本的收集 受試者禁欲3～5 d，手淫法收集精液，標本置于37℃水浴中，液化30 min后作精液分析，余下精液3000 r/min離心5 min，分離精漿，置-20℃保存備用。

1.2.2 血樣采集 取肘內側經脈血，采血區皮膚依次經過0.2%硝酸、去離子水、碘酒、酒精棉球消毒，用一次性真空管采血管取靜脈血約2 ml，室溫靜置20 min后，2000 r/min離心5 min，取血清于塑料具塞離心管中，-20℃保存備用。

1.3 方法

SOD活力采用黃嘌呤氧化酶比色法測定，MDA采用硫代巴比妥酸比色法測定，試劑盒均購自上海源葉生物科技有限公司，按說明書嚴格操作。鉛含量測定采用原子吸收光譜法。采用北京偉力精子輔助分析儀進行精液分析。

1.4 統計學方法

采用SPSS 10.0軟件對數據進行統計學分析，數據以均數±標準差（）表示，組間比較采用 t檢驗，以 P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清檢測結果

不育組血清中SOD活力與對照組相比無明顯變化，MDA含量與對照組相比，差異有高度統計學意義（P<0.01）。鉛含量與對照組相比，差異有統計學意義（P<0.05）。血清中各項指標的數據均為正態分布，見表1。

表1 兩組男性血清中SOD活力、MDA和鉛含量比較（）

表1 兩組男性血清中SOD活力、MDA和鉛含量比較（）

組別 例數 SOD（U/mL） MDA（nmol/ml）鉛含量（nmol/ml）不育組對照組t值P值951000.483±0.0630.491±0.0971.208＞0.050.140±0.0610.107±0.01510.041＜0.0129.833±4.86120.582±2.1131.781＜0.05

2.2 精漿檢測結果

不育組精漿中SOD活力與對照組相比顯著降低，差異有高度統計學意義（P<0.01）。MDA和鉛含量與對照組相比顯著升高（P<0.01）。不育組精漿中MDA含量和對照組鉛含量數據均為正態分布，見表2。

表2 兩組男性精漿中SOD活力、MDA和鉛含量比較（）

表2 兩組男性精漿中SOD活力、MDA和鉛含量比較（）

組別 例數 SOD（U/mL） MDA（nmol/ml） 鉛含量（nmol/ml）不育組對照組t值P值951000.206±0.0450.312±0.10083.845＜0.010.149±0.1190.098±0.01316.666＜0.019.413±1.7123.961±1.4939.320＜0.01

3 討論

精漿中少量的氧自由基對精子獲能和完成頂體反應是必需的，但過多的氧自由基可使精子線粒體膜精子質膜發生質脂過氧化，內膜嵴減少、ATP合成減少，從而影響精子活動力[3]。同時，脂質過氧化產生的降解產物，如MDA等，可抑制精子線粒體功能和包括腺苷酸環化酶在內的多種酶的活性，影響精子的運動功能[4]。目前認為精漿中SOD作為體內清除氧自由基的主要酶，是抑制脂質過氧化反應對精子損害的重要保護因子[5]。

導致體內自由基增多的因素主要有炎癥性疾病，空氣污染（包括煙霧、臭氧）、致癌性化學物質、油漆、石棉、某些藥物、農藥、射線、鉛中毒等[6]。精子細胞是人體細胞對毒性物質最敏感的細胞，微量毒性物質便可造成精子的損傷。

由細菌感染因素[7]以及由炎癥導致的抗精子抗體陽性患者[8]SOD活性降低和MDA含量升高已經有研究證實，因此，本研究排除了精液中白細胞增多患者。

通過檢測無明顯鉛污染接觸史的男性不育患者與對照組血清中SOD活力比較分析，男性不育癥患者血清中SOD活力無明顯變化，而鉛和MDA含量較對照組顯著升高。男性不育癥患者與對照組精漿中SOD活力，MDA和鉛含量比較分析顯示，男性不育癥患者精漿中SOD活力較對照組顯著降低，而MDA和鉛含量較對照組顯著升高（P<0.01）。血清中SOD活力變化不明顯，可能是血清中過氧化反應較輕，消耗SOD較少的原因。MDA含量在男性不育者血清和精漿中均有極顯著性差異，這一結果提示，在測定MDA含量時可根據患者情況決定收集血清樣本或精漿樣本，以達到同樣的診斷目的。

本文結果另一發現是無明顯鉛污染接觸史的男性不育患者，血清和精漿中鉛和MDA含量明顯升高，并伴有精漿中SOD活力降低和MDA含量升高，表明過氧化反應增強與體內鉛含量升高有關，精液中氧自由基和MDA的增多可能是造成男性不育和精子質量下降的重要原因。這種結果會對精子的活力有較顯著的影響[9]。它不但影響精子的功能，而且還可以影響精子的生成和精子的形態[10]。表明男性不育的主要因素是受到了環境中鉛的污染，因為鉛的用途廣泛，涉及到人們的衣食住行，鉛可污染空氣和土壤，通過呼吸道、消化道和皮膚黏膜進入人體，并且不易排出體外，可在體內儲存幾十年，對人體造成潛在的危害，精細胞較人體其他細胞對于毒性物質的損害敏感，容易受到傷害，這種傷害應引起人們的高度重視，它可造成男性不育，還可影響到下一代人的身體健康。

綜上所述，血清和精漿中鉛含量的升高，可能是導致精漿中SOD活性降低，MDA含量升高的主要因素，為男性不育患者提供排鉛和抗氧化診治方案提供了可靠依據。

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