牙周基礎治療對重度侵襲性牙周炎患者血清及齦溝液中TNF-α、IL-4 水平的影響

鞠 鐸 姚 華 (浙江大學醫學院附屬第一醫院口腔中心,浙江 杭州 310003)

牙周炎是侵犯牙齦以及牙周組織的慢性炎癥,其主要病理特征為牙周袋的形成、袋壁炎癥、牙槽骨吸收以及牙齒逐漸松動等,是導致成人牙齒缺失的主要原因之一〔1,2〕。牙周炎分為慢性牙周炎、侵襲性牙周炎等類型,侵襲性牙周炎的臨床表現以及實驗室檢查等方面均有別于慢性牙周炎〔3〕。侵襲性牙周炎多伴隨有咀嚼功能障礙,主要由放線桿菌感染引起,該細菌在侵襲性牙周炎患者牙齦下菌斑中的分離培養陽性率高達90%～100%〔4〕。牙周基礎治療是目前治療牙周炎的主要手段之一,如今已在臨床上推廣應用〔5〕。據報道,牙周基礎治療可導致侵襲性牙周炎患者血清及齦溝液中多種細胞因子的濃度發生變化〔6〕。本研究旨在探討牙周基礎治療對重度侵襲性牙周炎患者血清及齦溝液中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-4(IL-4)水平的影響。

1 資料與方法

1.1 研究對象 2009年1月至2011年4月,我科共收治重度侵襲性牙周炎患者53例,其中男性37例,女性16例;年齡22～35〔平均(26.3±1.4)〕歲。所有患者均無嚴重的慢性系統性疾病;近期未服用過任何抗生素;就診前6個月內未接受過牙周治療;女性患者未懷孕。

1.2 牙周基礎治療方法 牙周基礎治療包括如下內容:①菌斑控制:應使菌斑牙面數控制在20%以下;②齦上潔治術:使用潔治器械去除齦上牙石、色漬、菌斑,并磨光牙面,以延遲菌斑和牙石的沉積。③齦下刮治術(根面平整術):使用比較精細的齦下刮治器刮除位于牙周袋內根面上的牙石、菌斑。④咬合調整法(選磨法):通過磨改牙齒外形消除創傷性咬合和食物嵌塞。⑤松牙固定術。

1.3 TNF-α、IL-4測定方法 TNF-α測定采用BioELISA技術:①取出試劑盒,恢復至室溫。②將待測血清、不同濃度的TNF-α標準品分別加至相應微孔中,每孔100 μ l,箔紙封板,37℃孵育1 h。③甩盡微孔中的液體,每孔注入事先配好的洗液至少300 μ l,洗孔,重復此步驟4次,甩盡孔內液體后在吸水紙上拍干。④每孔加入工作濃度的生物素化抗TNF-α單克隆抗體100 μ l,37℃孵育1 h;洗板,方法同上。⑤每孔加入工作濃度的辣根過氧化物酶(HRP)標記的鏈霉親合素100 μ l,37℃孵育1 h;洗板,方法同上。⑥每孔加酶底物溶液100 μ l,37℃避光反應10～15 min,每孔加入終止液100 μ l,輕輕混勻,30 min內于酶標儀450 nm波長測吸光度。⑦以TNF-α標準品濃度為橫坐標,相應吸光度為縱坐標,繪制標準曲線。⑧根據待測血清的吸光度、標準曲線計算待測血清中的TNF-α濃度。IL-4的測定方法同TNF-α。

1.4 統計學分析 應用SPSS16.0統計軟件進行分析,計量資料采用±s表示,采用t檢驗。

2 結 果

2.1 重度侵襲性牙周炎患者牙周基礎治療前后牙周探診深度(PD)、附著水平(AL)、探診出血指數(BOP)的比較 重度侵襲性牙周炎患者經牙周基礎治療后,PD、AL、BOP顯著低于治療前,兩者相比差異具有統計學意義(均 P＜0.05)。見表1。

2.2 重度侵襲性牙周炎患者牙周基礎治療前后血清TNF-α、IL-4水平的比較 重度侵襲性牙周炎患者經牙周基礎治療后,血清中 TNF-α、IL-4與治療前相比差異無統計學意義(均 P＞0.05)。見表2。

2.3 重度侵襲性牙周炎患者牙周基礎治療前后齦溝液TNF-α、IL-4水平的比較 重度侵襲性牙周炎患者經牙周基礎治療后,齦溝液中TNF-α顯著低于治療前,差異具有統計學意義(P＜0.05);而IL-4顯著高于治療前,差異具有統計學意義(P＜0.05)。見表3。

表1 重度侵襲性牙周炎患者牙周基礎治療前后PD、AL、BOP 的比較( ±s)

表1 重度侵襲性牙周炎患者牙周基礎治療前后PD、AL、BOP 的比較( ±s)

時間 PD(mm) AL(mm) BOP治療前 4.34±0.69 2.59 ±1.17 3.06±0.56治療后 2.56±0.42 1.34 ±0.95 2.08±041 t值 10.364 8.351 11.057 P值 0.015 0.026 0.034

表2 重度侵襲性牙周炎患者牙周基礎治療前后血清 TNF-α、IL-4水平的比較( ±s,ng/L)

表2 重度侵襲性牙周炎患者牙周基礎治療前后血清 TNF-α、IL-4水平的比較( ±s,ng/L)

時間 TNF-α IL-4治療前 1.94±0.35 41.3±7.9治療后 1.89±0.38 40.9±8.1 t值 3.267 2.304 P值 0.126 0.072

表3 重度侵襲性牙周炎患者牙周基礎治療前后齦溝液TNF-α、IL-4 水平的比較±s)

表3 重度侵襲性牙周炎患者牙周基礎治療前后齦溝液TNF-α、IL-4 水平的比較±s)

時間 TNF-α(μ g/L) IL-4(ng/L)治療前 7.3±1.9 29.4±5.1治療后 3.5±1.3 67.3±12.7 t值 9.3640 8.109 P值 0.016 0.042

3 討 論

TNF,又稱淋巴毒素,包括 TNF-α、TNF-β兩個亞型,其中TNF-α相對分子質量為17 000,常以二聚體的形式存在。TNF-α主要由活化的單核-巨噬細胞、活化的自然殺傷細胞、抗原刺激的 T細胞、肥大細胞分泌〔7〕。TNF-α具有廣泛的生物學活性,能促進急性期反應物質、IL-1、IL-6以及 IL-8的合成,增強主要組織相容性復合體(MHC)Ⅰ類抗原表達以及細胞毒性T淋巴細胞的活性,引起內皮細胞的黏附性增強以及白細胞增多,此外還對多種病毒感染細胞、腫瘤細胞具有細胞毒或抑制生長作用〔8〕。IL-4是一種由活化 T細胞產生的細胞因子,相對分子治療18 000～20 000,在B細胞生長的早期可使其活化進入G1期,在B細胞對蛋白質性抗原發生免疫應答時起不可或缺的作用〔9〕。此外,IL-4可以增強B細胞膜上表達CD23以及MHCⅡ類抗原,誘導抗體的同種型轉換,增強單核-巨噬細胞表達MHCⅡ類抗原,與IL-3協同刺激肥大細胞增殖、活化細胞毒性 T 淋巴細胞〔10〕。

在本研究中,經牙周基礎治療后,重度侵襲性牙周炎患者PD、AL、BOP顯著低于治療前,因此牙周基礎治療對重度侵襲性牙周炎患者的療效較好。另外,重度侵襲性牙周炎患者經牙周基礎治療后,血清中TNF-α、IL-4與治療前相比差異無統計學意義(均P＞0.05);這可能是因為侵襲性牙周炎為局限性炎癥,牙周基礎治療是針對局限性炎癥的治療,因此對重度侵襲性牙周炎患者血清中細胞因子濃度的影響不大。最后,重度侵襲性牙周炎患者經牙周基礎治療后,齦溝液中TNF-α顯著低于治療前,而IL-4顯著高于治療前,這主要是因為經過牙周基礎治療后,重度侵襲性牙周炎患者牙周局部的炎癥強度減弱,進一步導致齦溝液中 TNF-α濃度降低、IL-4濃度升高。

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