Ki－67、C－erbB－2在乳腺癌組織中的表達及臨床意義

王 磊 楊 瀾 王旭芬

江蘇省常州市第一人民醫院 213003

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，近年來，發病率呈逐年上升的趨勢，傳統判斷乳腺癌預后的指標有腫瘤大小、臨床分期、組織分類、分級及淋巴結轉移等因素。目前大量研究表明，腫瘤的發生、發展與細胞的異常增殖相關，而Ki－67是一種與增殖細胞相關的核抗原，本研究用免疫組化法檢測乳腺癌組織中Ki－67和C－erbB－2的表達，結合臨床病理因素，分析它們之間的相關性及其臨床意義。

1 材料與方法

1.1 標本來源 收集我院乳腺外科2008年9月－2010年6月保存的乳腺癌組織標本144例，均經術后病理確診。患者年齡在30～84歲，平均年齡為51.6歲。全部病例常規行乳腺鉬靶照片、胸透、肝臟B超、血常規及生化肝腎功能檢查，按照 WHO乳腺腫瘤組織學類型分類標準：浸潤性導管癌123例，浸潤性小葉癌2例，黏液腺癌3例，導管內癌10例，髓樣癌3例，浸潤性微乳頭狀癌1例，轉移性腺癌1例，富脂質癌1例。

1.2 主要試劑 SP.9000試劑盒及免疫組化染色一抗 Ki－67（ZM0166）、C－erbB－2（ZM0065）均購于中杉金橋公司，均為工作液。

1.3 檢測方法 組織標本以10%甲醛液固定24h，常規石蠟包埋，制備5μm厚連續切片，貼附載玻片上，60℃烤片2h，免疫組織化學染色，用已知陽性標本作陽性對照；以PBS代替一抗作陰性對照。

1.4 結果判斷 Ki－67陽性細胞多數為核著色，呈棕黃色，少數為較弱的細胞質染色；根據切片所選的視野中陽性細胞占全部細胞的比例將其分為：陽性細胞數≤10%為陰性（－），陽性細胞數11%～25%為弱陽性（＋），陽性細胞數26%～50%為陽性（＋＋），陽性細胞數＞50%為強陽性（＋＋＋）。C－erbB－2陽性細胞為膜著色，不著色為陰性（－）；著色陽性細胞數＞10%為陽性，其中著色弱且不連續為弱陽性（＋），著色中等部分不連續為陽性（＋＋），著色強且連續為強陽性（＋＋＋）。

1.5 統計學方法 采用SPSS16.0統計軟件進行數據處理，采用χ2檢驗分析。

2 結果

2.1 Ki－67 和 C－erbB－2在乳腺癌中的表達 144例乳腺癌組織中，有100例Ki－67染色呈陽性，陽性率為69.4% ；同時檢測出有75例C－erbB－2染色陽性，陽性率為52.1%。見表1。

表1 Ki－67和 C－erbB－2在乳腺癌組織中的表達（n）

2.2 Ki－67和 C－erbB－2表達與乳腺癌臨床病理因素的關系 Ki－67表達與乳腺癌腫瘤臨床分期有關，即分期越晚，Ki－67陽性率越高（P＝0.000），而與患者年齡、腫瘤大小、淋巴結轉移狀況無明顯關系（P＞0.05）。C－erbB－2表達與乳腺癌腫瘤臨床分期（P＝0.003）及淋巴結轉移有關（P＝0.000），與患者年齡、腫瘤大小無明顯關系（P＞0.05）。見表2。

表2 Ki－67和 C－erbB－2表達與乳腺癌臨床、病理因素的相關性研究

2.3 Ki－67、C－erbB－2的關系 見表3。

表3 Ki－67陽性表達與C－erbB－2陽性表達的關系

3 討論

細胞增殖標志物Ki－67抗原是一類與細胞周期相關的增殖細胞核抗原和細胞增殖密切相關，由Gerdes［1］等從霍奇金病細胞系L428的粗核成分免疫鼠制備名為Ki－67的抗體時發現。Ki－67抗原存在于細胞周期中除G0期以外的所有階段。它開始表達于細胞周期的G1期，在S期及G2期表達增加，至M期達高峰，在細胞分裂晚期很快消失。細胞增殖抗原Ki－67表達能可靠而迅速地反映惡性腫瘤增殖率。相關研究表明將Ki－67應用于臨床其最大的作用在于能判斷某些疾病的預后。在乳腺癌、軟組織腫瘤、肺癌、星形細胞瘤、腦脊膜瘤、宮頸癌、前列腺癌中均有大量研究證實Ki－67有預后價值［2～7］。有 文 獻 統 計［8］，在 上 世 紀 24 個 關 于 Ki－67在判斷乳腺癌預后的研究中有23個表明Ki－67有很強的預后潛力。本研究顯示Ki－67在144例乳腺癌組織中陽性表達率為69.4% （100／144），且其陽性表達與乳腺癌腫瘤臨床分期有關，Ki－67在不同臨床分期中存在差異，其在TNM分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級中陽性表達率分別為41.2% （21／51），84.4%（65／77）和87.5%（14／16），即分期越晚，Ki－67陽性率越高（P＝0.000），經卡方檢驗發現 Ki－67陽性差異性表達出現在TNM分期的Ⅰ、Ⅱ之間，在Ⅱ、Ⅲ級之間不存在差異。Ki－67與患者年齡、腫瘤大小、淋巴結轉移狀況無明顯關系（P＞0.05）。

原癌蛋白C－erbB－2是表皮生長因子受體家族成員之一，原癌蛋白C－erbB－2位于人類第17號染色體長臂（17q21）上，編碼細胞膜磷酸糖蛋白，是細胞生長、分化和存活的重要調節因子之一。原癌蛋白C－erbB－2又稱 HER－2或neu基因，具有酪氨酸激酶活性，可以促進細胞分裂和蛋白水解酶的分泌，使DNA合成增加，癌細胞生長加快。增強細胞的運動能力，從而促進腫瘤侵襲和轉移。有研究表明原癌蛋白C－erbB－2的過度表達與淋巴結的轉移狀況密切相關，在乳腺癌的發生、發展過程中起一定的作用，因此原癌蛋白C－erbB－2為判斷乳腺癌侵襲力的指標之一。相關文獻報道乳腺癌C－erbB－2原癌基因蛋白陽性率用免疫組化方法檢測為20%～66%［9］。本研究結果顯示，C－erbB－2原癌基因蛋白在144例乳腺癌組織中陽性表達率為52.1%（75／144），與文獻報道相符。且與乳腺癌腫瘤臨床分期（P＝0.003）及淋巴結轉移有關（P＝0.000），有淋巴結轉移的（46／49＝93.9%）陽性率明顯高于無淋巴結轉移的（29／95＝30.5%），與患者年齡、腫瘤大小、無明顯關系（P＞0.05）。

本研究發現 Ki－67與 C－erbB－2之間存在著相關性（P＝0.001），這點與 Ki－67、C－erbB－2和乳腺癌腫瘤臨床分期都存在著正相關相符。淋巴結轉移越多，乳腺癌腫瘤臨床分期越晚，乳腺癌中C－erbB－2和Ki－67表達陽性率越高。

綜上所述，乳腺癌組織中Ki－67陽性表達與C－erbB－2表達與腫瘤的分期有關，分期越晚，Ki－67與C－erbB－2陽性率越高，C－erbB－2表達還與淋巴結轉移有關，由此筆者認為Ki－67與C－erbB－2各自高表達或兩者高表達均是乳腺癌預后不良的指標，可為乳腺癌患者的臨床治療提供參考，對于乳腺癌的預后判斷具有顯著臨床意義。

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