甲硝唑氧氟沙星滴鼻液的制備與質量控制

李 容，王柏桉（重慶市涪陵中心醫(yī)院藥劑科，重慶市 408000）

甲硝唑系廣譜抗厭氧菌藥物，殺菌力強；氧氟沙星系廣譜、高效、低毒的喹諾酮類抗菌藥物，對多種革蘭陽性和陰性致病菌具有較強的殺滅作用[1]。二者是2種不同類型抗菌藥物，合用可擴大抗菌譜，提高療效。筆者以甲硝唑和氧氟沙星為主藥，研制了甲硝唑氧氟沙星滴鼻液（該制劑正處于研制中，目前尚未取得制劑許可證），用于治療急慢性鼻炎、鼻竇炎、副鼻竇炎等疾病，并建立了以雙波長分光光度法[2]測定甲硝唑和氧氟沙星含量的質量控制方法。現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

UV-2401型紫外分光光度計（日本島津公司）；TG328B型電光分析天平（上海天平儀器廠）。

甲硝唑（原料藥及對照品，廣西河池化工醫(yī)藥股份有限公司，批號：050604，純度：99.76%）；氧氟沙星（原料藥及對照品，成都藥業(yè)股份有限公司，批號：060903，純度：99.85%）；甲硝唑氧氟沙星滴鼻液（自制，批號分別為：100723、100916、101102，規(guī)格：每支10 mL，其中甲硝唑含量為：0.5%，氧氟沙星含量為：0.3%）。

2 方法與結果

2.1 處方與制備

處方：甲硝唑5.0 g，氧氟沙星3.0 g，氯化鈉8.0 g，1 mol·L－1醋酸溶液3.5 mL，純化水加至1 000 mL。

制備：稱取處方量甲硝唑和氧氟沙星，置于燒杯中，加入1 mol·L－1醋酸溶液調(diào)成糊狀，加入800 mL沸水攪拌溶解，趁熱加入氯化鈉攪拌溶解，放冷過濾，由濾器加純化水至全量，于100℃、30 min流通蒸氣滅菌，搖勻分裝即得。

2.2 性狀

本品為微黃色澄明溶液。

2.3 鑒別

甲硝唑：取本品適量（約相當于甲硝唑10 mg），加氫氧化鈉試液2 mL，溫熱，即得紫紅色溶液；滴加稀鹽酸使成酸性后即變成黃色，再滴加過量氫氧化鈉試液則變成橙紅色。

氧氟沙星：取本品10 mL，置于水浴上蒸干，取殘渣適量，加丙醇約30 mg與醋酐約10滴，在水浴上加熱5～10 min，溶液即顯紅棕色。

2.4 檢查

2.4.1 pH值。應為4.5～6.0，結果符合規(guī)定。

2.4.2 裝量。按《中國藥典》2010年版規(guī)定[3]，平均裝量不少于10 mL，每只滴鼻液裝量不少于9.3 mL，結果符合規(guī)定。

2.4.3 微生物限度。按《中國藥典》2010年版規(guī)定[3]，取本品，依法檢查，結果符合規(guī)定。

2.5 含量測定

2.5.1 測定波長的選擇。取甲硝唑和氧氟沙星適量分別溶解于0.1 mol·L－1鹽酸溶液中，以0.1 mol·L－1鹽酸溶液為溶劑，在220～350 nm波長之間掃描。結果，甲硝唑在275.8 nm波長處有最大吸收，氧氟沙星的等吸收參比波長為301.7 nm；氧氟沙星在293.4 nm波長處有最大吸收，甲硝唑的等吸收參比波長為252.7 nm。另取處方中的輔料制備成溶液掃描，結果輔料不干擾主成分的測定。故選定甲硝唑測定波長為275.8 nm，參比波長為301.7 nm；氧氟沙星測定波長為293.4 nm，參比波長為252.7 nm。紫外吸收光譜見圖1。

圖1 紫外吸收光譜圖Fig 1 UV absorption spectrum

2.5.2 標準曲線的制備。精密稱取經(jīng)105℃干燥至恒重的甲硝唑100 mg和氧氟沙星50 mg，分別置于100 mL容量瓶中，用0.1 mol·L－1鹽酸溶液溶解并稀釋至刻度。分別精密量取上述溶液0.4、0.8、1.2、1.6、2.0 mL，置于100 mL容量瓶中，加入0.1 mol·L－1鹽酸溶液至刻度。分別在275.8、301.7、293.4、252.7 nm波長處測定吸光度。根據(jù)公式：甲硝唑ΔA1＝A275.8nm－A301.7nm，氧氟沙星ΔA2＝A293.4nm－A252.7nm，以濃度（c）為縱坐標，以ΔA為橫坐標進行線性回歸，得回歸方程：甲硝唑c1＝109.78ΔA1－0.534 6（r＝0.999 9）；氧氟沙星c2＝328.64ΔA2－0.843 7（r＝0.999 9）。結果表明，甲硝唑、氧氟沙星檢測濃度線性范圍分別為4.008～20.040、2.028～10.140 μg·mL－1。

2.5.3 加樣回收率試驗。分別精密稱取經(jīng)105℃干燥至恒重的甲硝唑和氧氟沙星適量，置于500 mL容量瓶中，用0.1 mol·L－1鹽酸溶液溶解并稀釋至刻度，分別量取1、2、3 mL置于100 mL容量瓶中，再分別加入已知含量的甲硝唑氧氟沙星滴鼻液適量，按“2.5.2”項下方法操作，使其含甲硝唑濃度約為10.0、13.0、16.0 μg·mL－1，氧氟沙星濃度約為5.8、7.4、9.0 μg·mL－1，每份平行操作2次，以0.1 mol·L－1鹽酸溶液為空白，在275.8、301.7、293.4、252.7 nm波長處測定吸光度，代入回歸方程，計算回收率，結果見表1。

2.5.4 穩(wěn)定性試驗。取甲硝唑濃度為8.016 μg·mL－1、氧氟沙星濃度為4.056 μg·mL－1的溶液，于0、2、4、6 h時測定吸光度，計算甲硝唑和氧氟沙星的ΔA平均值分別為0.077 7、0.014 9，RSD為0.26%和0.35%（n＝4），表明溶液至少可穩(wěn)定6 h。

2.5.5 精密度試驗[4]。按處方稱取各輔料及不同量的甲硝唑和氧氟沙星，分別制成低、中、高3種濃度的甲硝唑氧氟沙星滴鼻液，其中甲硝唑濃度為8.166、10.082、12.006 μg·mL－1，氧氟沙星的濃度為4.958、5.926、7.468 μg·mL－1。于同日內(nèi)測定5次，計算日內(nèi)RSD，結果甲硝唑RSD分別為0.29%、0.37%、0.46%（n＝5），氧氟沙星RSD分別為0.37%、0.45%、0.43%（n＝5）。每日測定1次，連續(xù)測定5 d，計算日間RSD，結果甲硝唑RSD分別為0.39%、0.49%、0.62%（n＝5），氧氟沙星RSD分別為0.87%、0.73%、0.65%（n＝5）。

2.5.6 樣品含量測定。精密量取甲硝唑氧氟沙星滴鼻液2 mL，置于100 mL容量瓶中，以0.1 mol·L－1鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻。精密量取10 mL置于100 mL容量瓶中，以0.1 mol·L－1鹽酸溶液稀釋至刻度。以0.1 mol·L－1鹽酸溶液為空白，在275.8、301.7、293.4、252.7 nm 波長處測定吸光度，計算ΔA1、ΔA2，并代入各自的回歸方程求出含量。結果批號為100723、100916、101102的樣品中甲硝唑含量分別為標示量的98.58%、102.62%、100.75%（n＝3），氧氟沙星含量分別為標示量的99.65%、100.59%、99.16%（n＝3）。

表1 加樣回收率試驗結果（n＝6）Tab 1Results of recovery tests（n＝6）

3 討論

鼻咽部感染以金黃色葡萄球菌為主，且多伴有厭氧菌感染[5]。甲硝唑氧氟沙星滴鼻液通過滴鼻給藥，可克服口服給藥引起的全身不良反應和肝臟的“首關效應”，提高病患部位的藥物濃度，吸收好、起效快，使用方便，能更好地發(fā)揮藥物療效。

試驗處方中加入醋酸，可增強甲硝唑和氧氟沙星的溶解性，且性質穩(wěn)定，同時還起到調(diào)節(jié)pH值的作用。制備時以0.1 mol·L－1鹽酸溶液作溶劑，既有利于2主成分的溶解，同時又能滿足二者穩(wěn)定性的需要。

本文采用雙波長分光光度法測定甲硝唑與氧氟沙星含量，與已報道的替硝唑左氧氟沙星滴鼻液的含量測定方法[5]相同，說明用雙波長分光光度法測定制劑中2主成分含量具有可普及性。

本制劑原料價格便宜，適宜于基層醫(yī)院。

綜上所述，該制劑制備工藝簡單、可行，質量控制方法可靠、簡便。

[1] 王 震，朱興年，冒 鎮(zhèn)，等.復方替硝唑栓劑的制備及質量控制[J].中國藥房，2000，11（4）：158.

[2] 張煜鑫，戴其昌.雙波長分光光度法測定甲硝唑氯霉素酊中甲硝唑的含量[J].中國現(xiàn)代應用藥學雜志，2006，6（23）：236.

[3] 國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典（二部）[S].2010年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄ⅩF、ⅪJ.

[4] 喻德雅，劉鳳琴，楊常成.更昔洛韋陰道栓的制備及質量控制[J].中國藥房，2010，21（25）：2 363.

[5] 祁淑香，肖 泉.替硝唑左氧氟沙星滴鼻液的制備與質量控制[J].中國藥業(yè)，2006，15（6）：32.