科技進(jìn)展

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甘露聚糖酶和玉米干酒糟及可溶物對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率和肌肉特性的影響

設(shè)計(jì)了4個(gè)試驗(yàn)研究玉米干酒糟及可溶物（DDGS）配合甘露聚糖酶對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生產(chǎn)性能，能量和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)全消化道表觀消化率（ATTD），血液代謝指標(biāo)和肌肉特性的影響。

試驗(yàn)一，96頭生長(zhǎng)豬（初始體重57.6kg）被分進(jìn)4個(gè)處理，每個(gè)處理4個(gè)圈，每個(gè)圈6頭豬，飼喂含10%DDGS及甘露聚糖酶0、200、400和600U/kg的玉米大豆基礎(chǔ)日糧。日增重（ADG）和血糖隨著日糧甘露聚糖酶濃度的增加而增加（線性效應(yīng)，P＜0.05）。隨著豬甘露聚糖酶飼喂水平的增加，干物質(zhì)和粗蛋白的ATTD得到改善（二次效應(yīng)，P＜0.05）。

試驗(yàn)二，64頭育肥豬（初始體重92.7kg）被分進(jìn)4個(gè)處理，每個(gè)處理4個(gè)圈，每個(gè)圈4頭豬，飼喂含15%DDGS及甘露聚糖酶0、200、400和 600U/kg玉米大豆基礎(chǔ)日糧。ADG、血糖、干物質(zhì)、能量和粗蛋白的ATTD隨著日糧甘露聚糖酶水平增加而呈線性增加（P＜0.05）。

試驗(yàn)三，利用2×2雙因子設(shè)計(jì)，將208頭生長(zhǎng)豬（初始體重60.5kg）分進(jìn)4個(gè)處理，每個(gè)處理4個(gè)圈，每個(gè)圈13頭豬，飼喂含0、10%DDGS及甘露聚糖酶0、400U/kg的玉米大豆基礎(chǔ)日糧。飼喂含有甘露聚糖酶的豬的ADG和血糖增加。豬的干物質(zhì)和粗蛋白ATTD因日糧含有DDGS降低（P＜0.05）， 但因含有甘露聚糖酶而增加（P＜0.05）。

試驗(yàn)4，利用2×2雙因子設(shè)計(jì)，將208頭育肥豬（初始體重86.5kg）分進(jìn)4個(gè)處理，每個(gè)處理4個(gè)圈，每個(gè)圈13頭豬，飼喂含0、15%DDGS及甘露聚糖酶0、400U/kg的玉米大豆基礎(chǔ)日糧。飼喂含有甘露聚糖酶的豬的ADG和血糖增加 。 豬 的 干 物 質(zhì) （P＜0.05） 、 能 量 （P＜0.1） 和 粗 蛋 白（P＜0.05）的ATTD因日糧含有甘露聚糖酶而增加。肌肉特性和肉質(zhì)沒(méi)有受到DDGS和甘露聚糖酶的影響。這些結(jié)果表明，傳統(tǒng)日糧中添加10%和15%的DDGS對(duì)豬的生長(zhǎng)性能和肌肉特性沒(méi)有負(fù)面影響。另外，日糧中含10%和15%的DDGS并配以甘露聚糖酶400U/kg可以改善育肥豬生長(zhǎng)性能和粗蛋白的ATTD。

譯自： Yoon SY,Yang YX,Shinde PL,et al.Effects of mannanase and distillers dried grain with solubles on growth performance,nutrient digestibility,and carcass characteristics of grower-finisher pigs.J Anim Sci,2010（88）： 181-191.

副豬嗜血桿菌細(xì)胞壁表面蛋白6-磷酸葡萄糖酸酯脫氫酶的特性及克隆表達(dá)

（His）（6）6PGD 蛋白引導(dǎo) SJPLC 的 IL-8和 IL-6的產(chǎn)生。此外， 用（His）（6）6PGD 蛋白免疫在腹腔攻毒 5×LD（50）劑量的SH0165株副豬嗜血桿菌后能產(chǎn)生75%的保護(hù)率，免疫保護(hù)效果較好，說(shuō)明6PGD具有很重要的細(xì)菌抗原性。了解6PGD蛋白的特性將有助于我們研究新的藥物和疫苗。

譯自： Fu S,Yuan F,Zhang M,et al.Cloning,expression and characterization of a cell wall surface protein,6-phosphogluconate dehydrogenase,of Haemophilus parasuis.Res Vet Sci，2011Aug 11.[Epub ahead of print]

在生產(chǎn)疫苗的細(xì)胞系和其他細(xì)胞系調(diào)查1型豬圓環(huán)病毒感染情況

1型圓環(huán)病毒（PCV1）在豬只中廣泛流行，最近美國(guó)報(bào)道允許輪狀病毒疫苗上市。從動(dòng)物中提取的原料，比如細(xì)胞、胰島素和血清，是導(dǎo)致生物制品病毒污染的主要原因。

我們調(diào)查了從ATCC（美國(guó)模式培養(yǎng)物集存庫(kù)）獲得的許多細(xì)胞系中PCV1污染的情況（這些細(xì)胞系廣泛用于研究、診斷或者疫苗的研發(fā)）。在這些細(xì)胞系的建立和使用歷史上，由于使用的血清和胰蛋白酶沒(méi)有經(jīng)過(guò)新的病毒滅活方法，也沒(méi)有通過(guò)目前實(shí)驗(yàn)測(cè)試的記錄，預(yù)計(jì)這些細(xì)胞系已經(jīng)感染牛和豬的病毒。這個(gè)研究顯示VERO、MRC-5和 CEFs,已經(jīng)用于許多疫苗的生產(chǎn)，其他細(xì)胞系用于研究疫苗，包括MDCK、HEK-293、HeLa和 A549（上述所有細(xì)胞系用巢式PCR分析，PCV1陰性）；還有一些細(xì)胞系通過(guò)感染試驗(yàn)分析確定為陰性。然而MDBK細(xì)胞系（用于動(dòng)物疫苗生產(chǎn)的一個(gè)細(xì)胞系），雖然沒(méi)有分離到病毒，但是檢測(cè)到含有PCV1的基因序列。

雖然結(jié)果顯示，豬圓環(huán)病毒感染可能沒(méi)有在以前的培養(yǎng)條件下發(fā)生，最近發(fā)生的疫苗污染事件，提示人們應(yīng)繼續(xù)重視預(yù)防從動(dòng)物材料中引入病毒。

譯 自 ： Ma H,Shaheduzzaman S,Willliams DK,et al.Investigations of porcine circovirus type 1 （PCV1）in vaccine-related and other cell lines.Vaccine， 2011Aug 8.[Epub ahead of print]

編碼胸膜肺炎放線桿菌Ⅳ型菌毛基因的DNA疫苗引起強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)對(duì)血清型2型的菌株攻毒保護(hù)力有限

胸膜肺炎放線桿菌是革蘭氏陰性細(xì)菌能引起豬的胸膜肺炎，該病在全世界范圍內(nèi)是一個(gè)致死性的疾病，傳染性極高。

我們之前的研究顯示編碼Apx外毒素結(jié)構(gòu)蛋白ApxIA和ApxIIA的DNA疫苗，可有效對(duì)抗致死劑量的胸膜肺炎放線桿菌血清1型菌株攻毒。胸膜肺炎放線桿菌的疫苗研究由于疫苗的交叉保護(hù)力不確定而受阻（各血清型之間）。IV型菌毛蛋白ApfA已被證明是目前在各種血清型的胸膜肺炎放線桿菌中高度保守的。

一個(gè)新的DNA疫苗編碼ApfA（pcDNA-apfA）被構(gòu)建，其對(duì)胸膜肺炎放線桿菌血清型2型菌株的攻毒保護(hù)力被評(píng)估。在免疫pcDNA-apfA以后，對(duì)于菌毛蛋白的抗體反應(yīng)明顯，暗示了菌毛蛋白在體內(nèi)的表達(dá)。通過(guò)對(duì)IgG亞型的分析（IgG1和 IgG2a）顯示pcDNA-apfA疫苗能激活Th1和Th2免疫反應(yīng)。通過(guò)IgA分析顯示DNA疫苗也能提高黏膜免疫，然而，pcDNA-apfA疫苗雖然能產(chǎn)生大量菌毛蛋白的抗體，但是只能對(duì)攻毒（血清型2型的豬肺炎放線桿菌）產(chǎn)生有限的免疫保護(hù)率（30%）。這項(xiàng)研究的結(jié)果與前人的研究結(jié)果不同（Ⅳ型菌毛蛋白是一個(gè)廣譜有效的候選疫苗蛋白），表明菌毛蛋白在豬胸膜肺炎放線桿菌的疫苗開(kāi)發(fā)中發(fā)揮的作用有限。

譯自： Lu YC,Li MC,Chen YM,et al.DNA vaccine encoding type IV pilin of Actinobacillus pleuropneumoniae induces strong immune response but confers limited protective efficacy against serotype 2challenge.Vaccine， 2011Aug 9. [Epub ahead of print]

中國(guó)東北部地區(qū)分離出新的豬呼腸孤病毒

我們分離出一個(gè)新的呼腸孤病毒（MRV-HLJ/2007），該病毒是從中國(guó)黑龍江省的豬身上分離出來(lái)的。基因組序列分析顯示MRV-HLJ/2007與SC-A株具有很近的遺傳學(xué)關(guān)系。SC-A株是2006年從四川的豬身上分離出來(lái)的。雖然系統(tǒng)發(fā)育分析顯示MRV-HLJ/2007可能來(lái)自于SC-A株，但這兩株病毒的M2和S3基因不同。系統(tǒng)發(fā)育分析顯示：除了S1基因與感染人的呼腸孤病毒不同，MRV-HLJ/2007和SC-A株的其他基因與感染人的呼腸孤病毒很接近。這些發(fā)現(xiàn)暗示了MRV-HLJ/2007株可能是一種流行在中國(guó)的呼腸孤病毒新毒株。

譯 自 ： Zhang C， Liu L， Wang P， et al.A potentially novel reovirus isolated from swine in northeastern China in 2007.Virus Genes， 2011Jul 15.[Epub ahead of print]

編碼口蹄疫病毒B和T細(xì)胞表位定位到豬白細(xì)胞抗原經(jīng)典Ⅱ類分子的DNA疫苗在攻毒后對(duì)豬只起到保護(hù)作用

研發(fā)有效安全的口蹄疫病毒疫苗是非常重要的。以前我們實(shí)驗(yàn)室的研究證實(shí)DNA疫苗編碼C型口蹄疫病毒（FMDV）的B和T細(xì)胞表位，能有效控制病毒在小鼠中復(fù)制，然而在豬身上卻沒(méi)有保護(hù)作用。

這個(gè)研究工作發(fā)現(xiàn)通過(guò)運(yùn)用新的DNA疫苗（pCMVAPCH1BTT），編碼FMDV B和T細(xì)胞表位融合到單鏈可變區(qū)（1F12小鼠抗豬白細(xì)胞抗原經(jīng)典Ⅱ類分子的單克隆抗體），以增加在豬上的保護(hù)力，DNA疫苗免疫的豬只攻毒后得到100%的保護(hù)，然而其余的豬只與對(duì)照組相比為部分保護(hù)，顯示出延遲、短暫和溫和的病癥。疫苗免疫得到完全保護(hù)的豬只在FMDV攻毒之前激活相關(guān)分泌特異的IFNγ的T細(xì)胞，在FMDV攻毒之后，很快產(chǎn)生大量中和抗體。說(shuō)明該DNA疫苗與免疫反應(yīng)相關(guān)的所有結(jié)構(gòu)都起到保護(hù)作用。我們的試驗(yàn)結(jié)果找到了一個(gè)研究FMDV亞單位疫苗的新方向。

譯 自 ： Borrego B,Argilaguet JM,Pérez-Martín E,et al.A DNA vaccine encoding foot-and-mouth disease virus B and T-cell epitopes targeted to class II swine leukocyte antigens protects pigs against viral challenge.Antiviral Res， 2011Jul 26.[Epub ahead of print]

開(kāi)發(fā)A型口蹄疫單克隆抗體

為了開(kāi)發(fā)A型口蹄病毒（FMDV）單克隆抗體（mAb），BABL/C小鼠用A型FMDV免疫。抗A型FMDV的單克隆抗體（mAb）7B11和8H4被SP2/0骨髓瘤細(xì)胞和脾細(xì)胞融合的細(xì)胞表達(dá)出來(lái)。單克隆抗體7B11和8H4的滴度分別為1024和512。所有的mAb都包括κ輕鏈，mAb為IgG1。為了確定mAb鏈接表位，用間接ELISA研究這些mAb對(duì)A型口蹄疫病毒的反應(yīng)，結(jié)果顯示兩種mAb都與A型FMDV作用。這些mAb可以在未來(lái)用于FMDV疫苗、診斷方法、預(yù)防、病原學(xué)及免疫研究。這些mAb沒(méi)有與豬水皰病毒（SVD）或O型，亞洲1型和C型FMDV的交叉反應(yīng)。腹水中它們的滴度分別為 1： 5×106and 1： 2×106,7B11為 IgG1亞型,8H4為IgG2b亞型。mAb可以用來(lái)臨床檢測(cè)A型FMDV。

譯自： Lin T,Li J,Shao JJ， et al.Develope monoclonal antibody against foot-and-mouth disease virus A type.Virol Sin，2011， 26（4）:273-278.