陸英的不同提取分離物對小鼠鎮痛作用的影響

袁志軍 易增興

(1.江西省宜春市人民醫院; 2.江西省宜春學院化生學院 江西宜春 336000)

陸英(英)Sambucus chinensis Lindl《拼音》LUYING,又名接骨草、八棱麻、走馬風。來源為忍冬科植物蒴藿Sambucus chinensis Lindl.的全草,分布于華北、華東、華南、西南及陜西、甘肅、寧夏等省區,生于山坡、路旁、溪邊、荒野灌叢中,采制:夏、秋季采收,曬干,性味:性溫,味苦[1]。由于陸英各個部分所含的有效成分不同,所以其作用也不同,以根、莖及葉入藥,具活血散瘀、祛風除濕、通經活絡之功效,能治扭傷、腰肌勞損、骨折、風濕痹痛等癥,又能作獸藥治牛跌傷[1]。莖、葉含綠原酸、烏索酸、齊墩果酸、香樹酯醇、谷甾醇,并顯黃酮甙、鞣質及還原糖反應,種子含氰甙類。陸英為民間常用藥,應用廣泛。《本經》:“主骨間諸痹,四肢拘攣疼酸,膝寒痛,陰痿,短氣不足,腳腫。”鑒于傳統文獻及民間多用陸英治療跌打損傷,有較好的止痛作用,故設計此提取分離方法及小鼠的鎮痛作用實驗來證明陸英的鎮痛效果,以期探明陸英有效成分之所在。

1 材料

1.1 試劑

陸英原藥材于2007年8月采自宜春市袁州區湖田鄉,取全草曬干,切斷,儲存,備用。氯仿：分析純,寧波市樂嘉化工有限公司,生產批號20080806;正丁醇：分析純,上海源景化學品有限公司,生產批號20090301;石油醚：分析純,天津市大茂化學試劑廠,生產批號20080924;乙酸乙酯：分析純,天津市博迪化工有限公司,生產批號20080902;醋酸：分析純,江西宏都生物化學有限公司,20080422;萘普生片;江西華太藥業有公司,生產批號20081216;用蒸餾水配制成0.2%萘普生。

1.2 儀器

電子天平(北京賽多利斯儀器系統有限公司),旋轉蒸發儀(上海亞榮生化有限公司),分液漏斗;鼠籠,注射器(1mL),灌胃器(1mL)。

1.3 動物

昆明小鼠56只,體重20～45g,由南昌大學醫學院動物科學部提供。

2 方法

2.1 提取分離方法

2.1.1 提取 將陸英原藥材粉碎,稱取粉末76g,于旋轉蒸發儀1000mL的圓底燒瓶中,水浴溫度設為80℃,用75%乙醇500mL回流提取3次,第一次回流1h,第2,3次為每30分鐘1次,合并3提取液減壓回收溶劑,得250mL濃縮液。

2.1.2 分離 采用的是溶劑極性依次遞增分離法,即將陸英濃縮液分別用石油醚→氯仿→醋酸乙酯→正丁醇萃取,分取有機層。用石油醚、氯仿、醋酸乙酯、水萃取的有機層水浴即可回收溶劑,正丁醇萃取的有機層溶劑需加熱回收(正丁醇的沸點高于水浴溫度)。后用5%乙醇溶解稀釋,調整濃度,配成實驗用藥。陸英的石油醚層、氯仿層、醋酸乙酯層、正丁醇層、水層萃取物含生藥量的濃度均為2.6g/mL。

2.2 小鼠醋酸扭體鎮痛法

2.2.1 分組給藥 取小鼠56只,禁食12h后(不禁水),隨機分為7組,每組8只,稱重標記。1組灌胃給藥0.9%生理鹽水溶液;2組灌胃給藥0.2%萘普生;3、4、5、6、7組分別灌胃陸英的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水萃取分離物配制的實驗用藥。給藥后60min左右,各小鼠腹腔注射1.0%醋酸(灌胃、腹腔注射均按0.1mL/10g小鼠體重的劑量給藥[2])。

2.2.2 觀察記錄 觀察并記錄注射醋酸溶液后15min內出現扭體反應的次數(腹部收縮內凹、伸展后肢、臀部扭轉)。計算扭體反應抑制率:抑制百分率(%)=(對照組平均扭體數一給藥組平均扭體數)／對照組平均扭體數×100%。

3 結果及分析

采用SPSS 10.0統計軟件包對各組數據進行單因素方差分析,0.2%萘普生能顯著減少醋酸所致小鼠扭體反應次數(P＜0.01),扭體抑制率為72.82%;陸英正丁醇萃取物也能顯著減少醋酸所致小鼠扭體反應次數(P＜0.01),扭體抑制率為72.49%;陸英氯仿萃取物也能顯著減少醋酸所致小鼠扭體反應次數(P＜0.01),扭體抑制率僅為48.75%,而陸英的石油醚、醋酸乙酯、水萃取物這3組與生理鹽水組比較,對醋酸所致小鼠扭體次數幾無減少。陸英正丁醇萃取物的扭體抑制率較0.2%萘普生組稍低,可見陸英正丁醇萃取物具有較好的鎮痛作用;陸英氯仿萃取物的扭體抑制率較0.2%萘普生組差一半,其鎮痛效果相對不是很好,而其它3層相對0.2%萘普生幾乎沒有鎮痛作用。

5 討論

鎮痛實驗結果表明,陸英正丁醇萃取物和陸英氯仿萃取物能抑制醋酸刺激腹腔黏膜引起的痛反應,減少扭體鼠數和各鼠的扭體次數,說明陸英氯仿萃取物與正丁醇萃取物均有鎮痛效果。

6 結語

陸英氯仿和正丁醇萃取物均有鎮痛效果。陸英正丁醇萃取物作用效果相近。

[1]南京中醫藥大學.中藥大辭典(下冊)[M].上海:上海科技出版社,2005:2456.

[2]陳奇.中藥藥理研究方法學[M].北京:人民衛生出版社,2000:484.