骨巨細胞瘤組織中MMP-2、E-cadherin的表達變化及意義

劉煥彩，劉金蘭，孟曉光，陳燕春

(1濰坊醫學院附屬醫院，山東濰坊261031;2濰坊醫學院組織學與胚胎學教研室)

骨巨細胞瘤(GCT)是一種具有潛在惡性的溶骨性腫瘤，術后復發率20% ～50%，1% ～6%的患者可以發生肺轉移［1］，少數患者甚至可發生肉瘤變。目前病理學上一直沿用的Jeffe組織學分級方法已不能準確預測骨巨細胞瘤術后的復發和轉移情況。基質金屬蛋白酶2(MMP-2)是人體內降解細胞外基質的主要酶類，參與腫瘤演進等眾多生理和病理過程，且其表達水平與人體某些惡性腫瘤的浸潤、轉移、復 發 密 切 相 關［2，3］。 上 皮 型 鈣 黏 附 蛋 白(E-cadherin)介導的細胞間黏附功能紊亂是導致腫瘤細胞侵襲和轉移的前提條件之一。本研究對42例骨巨細胞瘤組織標本中的MMP-2和E-cadherin進行了檢測，觀察其表達變化，為骨巨細胞瘤的生物學行為和預后判斷提供依據。

1 資料與方法

1．1 臨床資料 濰坊醫學院附屬醫院和濰坊市人民醫院2000～2008年收治的骨巨細胞瘤患者42例，男22例，女20例;年齡17～58歲。均行手術治療并留取腫瘤組織標本。本組腫瘤按照Jeffe組織學分級標準分為Ⅰ級18例、Ⅱ級15例、Ⅲ級9例。術后復發15例，未復發27例。發生轉移8例，未轉移34例。

1．2 MMP-2、E-cadherin 檢測 腫瘤組織標本經10%甲醛固定，石蠟包埋，連續切片(厚5 μm)。采用免疫組化SP法染色，以PBS代替一抗作陰性對照。MMP-2主要定位于腫瘤細胞的胞質，以胞質出現棕黃色顆粒樣物質為陽性。E-cadherin為跨膜糖蛋白，以細胞膜或細胞質出現棕黃色樣物質為陽性。高倍鏡下隨機選取5個視野，每個視野觀察細胞數不少于200個，按陽性細胞所占百分比及著色深淺進行結果判定:①按切片中細胞著色深淺計分:細胞無顯色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。②按陽性細胞數所占百分比計分:陽性細胞≤5%為0分、6% ～25%為1分、26% ～50%為2分、＞50%為3分。上述兩項評分的乘積0～1判為陰性(-)、2～3為弱陽性(+)、4～5為陽性(++)、≥6為陽強性(+++);+、++、+++視為陽性。

1．3 統計學方法 采用SPSS13．0統計軟件。計數資料比用χ2檢驗。P≤0．05為差異有統計學意義。

2 結果

2．1 MMP-2在骨巨細胞瘤組織中的表達 在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級骨巨細胞瘤中MMP-2呈陽性者分別為6、9、7例，Ⅱ +Ⅲ級與Ⅰ級相比，P ＜0．05;在復發、未復發骨巨細胞瘤中MMP-2呈陽性者分別為13、10例，兩者相比，P＜0．05;在轉移、未轉移骨巨細胞瘤中MMP-2呈陽性者分別為7、14例，兩者相比，P＜0．05。

2．2 E-cadherin在骨巨細胞瘤中的表達 在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級骨巨細胞瘤中E-cadherin呈陽性者分別為17、10、4例，Ⅱ + Ⅲ級與Ⅰ級相比，P ＜0．05;在復發、未復發骨巨細胞瘤中E-cadherin呈陽性者分別為6、20例，兩者相比，P ＜0．05;在轉移、未轉移骨巨細胞瘤中E-cadherin呈陽性者分別為2、25例，兩者相比，P ＜0．05。

3 討論

腫瘤的浸潤轉移是一個復雜、多步驟的腫瘤細胞與宿主細胞間相互作用的連續過程，包括基底膜和細胞外基質的降解、細胞間黏附的改變、腫瘤細胞的移出及形成轉移灶等過程。在腫瘤侵襲轉移過程中，由于腫瘤細胞要多次穿越基底膜并侵入周圍組織，因此對細胞外基質的降解是腫瘤侵襲轉移的關鍵步驟之一。細胞外基質主要由Ⅳ型膠原、層粘連蛋白、纖維連接蛋白(FN)等組成，這些成分均為MMP-2的作用底物［4］。本研究發現，Ⅱ+Ⅲ級骨巨細胞瘤組織中MMP-2陽性者較Ⅰ級多，但Ⅱ、Ⅲ級間無差異。說明MMP-2的表達與Jaffe組織學分級有一定的相關性，但并不完全平行一致，進一步證實Jaffe組織學三級標準不能準確反映骨巨細胞瘤的生物學行為。骨巨細胞瘤轉移、復發者，MMP-2陽性表達率明顯高于未復發和未轉移者，提示MMP-2過表達與骨巨細胞瘤的轉移復發密切相關。Hofmann等［5］研究證實，MMP-2在黑色素瘤的侵襲和轉移中起重要的作用;Ruokolainen等［6］研究證實，頭頸部鱗癌患者瘤組織中MMP-2的表達與腫瘤的復發密切相關。腫瘤細胞通過分泌MMP-2降解腫瘤細胞周圍的細胞外基質和基底膜，增強腫瘤細胞的侵襲和轉移能力。

細胞黏附可分為細胞—細胞黏附和細胞—基質黏附兩大類。前者又可根據參與細胞的類型不同分為同質黏附和異質黏附。同一種類型細胞間的黏附稱同質黏附，兩種以上細胞間的黏附稱異質黏附。E-cadherin是一類主要介導細胞間同質黏附的鈣依賴性跨膜糖蛋白，是維護上皮細胞形態和結構完整性及極性的重要分子［7］。如果E-cadherin介導的細胞間黏附功能發生紊亂，將導致細胞黏附力減弱、細胞形態(成纖維細胞樣)改變、上皮—間質轉化(EMT)、細胞移動性增強等生物學改變。這在腫瘤的病理過程將導致腫瘤細胞的無限制性生長，向周圍組織浸潤及遠處轉移。本研究結果顯示，Ⅱ+Ⅲ級骨巨細胞瘤組織中E-cadherin陽性者較Ⅰ級少，但Ⅱ、Ⅲ級間無差異。說明 E-cadherin的表達與Jaffe組織學分級有一定的相關性，但并不完全平行一致，也表明骨巨細胞瘤的Ⅰ級與Ⅱ、Ⅲ級瘤之間有本質的區別，Ⅱ、Ⅲ級骨巨細胞瘤細胞黏著降低，更容易復發或轉移，應將Ⅱ和Ⅲ級視為惡性來看待。骨巨細胞瘤轉移、復發者，E-cadherin陽性表達率明顯低于未復發和未轉移者。提示E-cadherin低表達與骨巨細胞瘤轉移復發密切相關。E-cadherin表達下調伴隨著腫瘤細胞的去分化、極性消失、浸潤能力增強以及淋巴結轉移力增強，且預示患者預后不良［8，9］。

綜上所述，骨巨細胞瘤組織中 MMP-2、E-cadherin的表達發生變化，這種變化與腫瘤的轉移復發密切相關，對其進行檢測有助于骨巨細胞瘤侵襲、轉移、復發及預后的判斷。

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