骨腫瘤患者血清細(xì)胞因子TNF-α和IL-6水平觀察及臨床意義

周 健 孫 昕

安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院骨科，安徽合肥 230022

隨著腫瘤的研究進(jìn)展，人們已初步認(rèn)識(shí)到腫瘤的發(fā)生發(fā)展與細(xì)胞宿主免疫防御系統(tǒng)對(duì)腫瘤失去調(diào)控密切相關(guān)。本研究測(cè)定骨腫瘤患者及骨轉(zhuǎn)移患者（有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的晚期骨腫瘤患者）血清中腫瘤壞死因子（TNF-α）和白細(xì)胞介素（IL-6）含量，研究與骨腫瘤發(fā)生發(fā)展、惡化轉(zhuǎn)移的關(guān)系，探討其在骨腫瘤惡化轉(zhuǎn)移中的作用，這對(duì)骨腫瘤的診斷、療效評(píng)估預(yù)后判斷及免疫治療具有一定的臨床意義。

1 對(duì)象與方法

1.1 檢測(cè)對(duì)象

標(biāo)本來(lái)源為經(jīng)組織學(xué)或細(xì)胞學(xué)明確診斷的骨腫瘤患者45例（有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的晚期骨腫瘤患者15例），年齡45～70歲，平均（60.1±10.2）歲。其中男27例，女18例。標(biāo)本來(lái)源為健康體檢人員及部分本院健康醫(yī)護(hù)人員，正常對(duì)照組40例，年齡36～ 72歲，平均（53.5±8.7）歲。

1.2 標(biāo)本處理

所有受試者均用一次性注射器取清晨空腹靜脈血1～2 mL，置預(yù)先處理好的清潔干燥無(wú)任何添加物的試管中，常溫下靜置后（嚴(yán)禁溶血）送腫瘤實(shí)驗(yàn)室。為排除化療干擾的可能性，化療后血液在細(xì)胞毒藥物給予后1個(gè)月抽取，方法同上。

1.3 樣品處理

將樣品管編號(hào)后，置高速離心機(jī)中，以3000 r/min離心10 min，用預(yù)先經(jīng)潔凈處理過(guò)的干燥吸管吸取上部清亮血清，置具塞塑料樣品管中。閉塞-70℃低溫冰箱中保存，待測(cè)。

1.4 細(xì)胞因子的檢測(cè)

細(xì)胞因子生物學(xué)活性檢測(cè)，是應(yīng)用依賴(lài)于該細(xì)胸因子而增殖的細(xì)胞檢測(cè)方法，細(xì)胞因子的免疫學(xué)檢測(cè)方法通常用的是酶聯(lián)免疫吸附反應(yīng)（enzyme-Linked immunosorbent assay，ELISA）的方法。本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)骨腫瘤患者血清中的TNF-α和IL-6含量水平，采用的就是ELISA方法。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 3組患者血清TNF-α和IL-6測(cè)定結(jié)果比較

骨腫瘤患者TNF-α和IL-6均高于健康對(duì)照組，統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)TNF-α差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），IL-6差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。骨轉(zhuǎn)移組（遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者）TNF-α和IL-6均高于骨腫瘤組。統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)TNF-α差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），而IL-6差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 TNF-α與IL-6的靈敏度和特異性

若以TNF-α正常值的3倍（45.45 pg/mL）、IL-6正常值的2倍（43.18）為診斷腫瘤截?cái)帱c(diǎn)[1]，則TNF-α的靈敏度為40/45=88.89%，特異性36/40=90.0%（對(duì)照組4例假陽(yáng)性）；而IL-6的靈敏度為35/45=77.78%，特異性35/40=87.50%（對(duì)照組5例假陽(yáng)性）。

表1 骨轉(zhuǎn)移（遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移）與骨腫瘤組TNF-α和IL-6水平變化（± s，pg/mL）

表1 骨轉(zhuǎn)移（遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移）與骨腫瘤組TNF-α和IL-6水平變化（± s，pg/mL）

注：與健康組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與骨腫瘤組比較，⊕P＜ 0.05，⊕⊕P ＜ 0.01

組別 n TNF-α IL-6骨轉(zhuǎn)移（遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移） 15 96.71±33.12**⊕⊕ 57.43±19.74*⊕骨腫瘤組 45 69.04±35.59** 48.17±20.07*健康組 40 15.15±7.71 21.59±9.74

3 討論

近年國(guó)內(nèi)外學(xué)者應(yīng)用腫瘤細(xì)胞株，新鮮腫瘤組織進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)人細(xì)胞系和新鮮腫瘤結(jié)節(jié)中的IL-4、IL-6、IL-10等細(xì)胞因子占優(yōu)勢(shì)[2]，血清中IL-6類(lèi)細(xì)胞因子水平升高與進(jìn)展期腫瘤患者的免疫抑制和惡液質(zhì)相關(guān)[3]。本研究結(jié)果也證實(shí)了上述觀點(diǎn)，骨腫瘤組IL-6水平高于健康對(duì)照組，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。血清中IL-6水平與骨腫瘤臨床分期有關(guān)，分期越晚，腫瘤負(fù)荷越大，有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的晚期骨腫瘤患者血清IL-6水平明顯高于無(wú)轉(zhuǎn)移的早期患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。同時(shí)研究報(bào)道也表明，有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的晚期骨腫瘤患者，也能會(huì)產(chǎn)生較高水平的IL-6含量。

TNF-α可促進(jìn)細(xì)胞的增殖和分化，對(duì)某些腫瘤細(xì)胞具有生長(zhǎng)因子樣作用，并協(xié)同EGF、PDGF和胰島素的促增殖作用，促進(jìn)EGF受體表達(dá)。TNF-α也可與細(xì)胞增殖密切相關(guān)的原癌基因的表達(dá)，引起細(xì)胞周期G0期向G1期轉(zhuǎn)變[4]。王昌才等[5]報(bào)道正常人血清和尿液存在一定量TNF-α，而腫瘤、艾滋病毒感染、紅斑狼瘡患者血清 TNF-α水平明顯升高。腫瘤患者血清TNF-α水平升高機(jī)制目前尚不清楚，可能與免疫反應(yīng)有關(guān)。TNF-α升高往往提示腫瘤的發(fā)生。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的晚期骨腫瘤患者血清TNF-α平均值均高于正常值近6倍，而骨腫瘤組也高于正常值近3.96倍。且隨病變的加重水平亦愈高。故治療前后血清TNF-α水平的檢測(cè)可作為判斷療效的一個(gè)輔助性監(jiān)測(cè)指標(biāo)。

綜上所述，本研究結(jié)果顯示，IL-6、TNF-α與骨腫瘤的進(jìn)展、預(yù)后有一定的相關(guān)性。應(yīng)用ELISA方法測(cè)定血清中IL-6、TNF-α含量水平具有一定的臨床實(shí)用價(jià)值。在結(jié)合臨床資料的情況下，可作為臨床骨腫瘤的輔助指標(biāo)之一。

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