3種臨床常用梅毒檢測方法的比較

李珍瑤 龍華泉 陳銀仲

廣東省江門市新會區(qū)人民醫(yī)院檢驗科，廣東江門 529100

梅毒（syphilis）屬于一種性傳播疾病，病原體為蒼白密螺旋體（treponema pallidum，TP）蒼白亞種，又稱梅毒螺旋體，主要通過性接觸直接傳染，接吻、手術、哺乳、輸血、接觸污染物也可被傳染。患梅毒的孕婦可通過胎盤感染胎兒，早期可致胎兒流產、早產，晚期感染的成活胎兒可患先天梅毒。近幾年梅毒的檢測陽性率有所增高，現在很多醫(yī)院都將梅毒作為住院患者的常規(guī)檢查項目，筆者所在醫(yī)院這幾年也加大了對門診及體檢中心的檢查患者的宣傳防治力度，很多體檢患者都會進行梅毒的血清學檢測，住院手術患者也開展了輸血前全套檢查，其中就包括梅毒的血清學檢測，因此，如何找出一種靈敏性和特異性都高，同時操作快速簡便的方法，是本研究的目的。

1 材料與方法

1.1 標本來源

2010年1月1 日～2010年12月31日期間筆者所在醫(yī)院進行梅毒血清學試驗的患者，包括住院患者、門診患者，沒有區(qū)分初診患者及復查患者，也沒有從臨床上對陽性患者進行病程（一期到三期）的區(qū)分，共15230例。

1.2 檢測參考品

各方法試劑盒內附的陽性對照品及陰性對照品。

1.3 試劑

梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗診斷試劑盒（TRUST）由上海榮盛生物藥業(yè)有限公司提供；梅毒螺旋體抗體診斷試劑（膠體金法）由英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司提供；梅毒螺旋體抗體診斷試劑（凝集法）（TPPA法）由FUJIREBIO INC（富士瑞必歐株式會社）提供，上述試劑全部在有效期內使用。

1.4 方法

采用TRUST、膠體金法、TPPA法3種方法分別對15 230例標本進行平行檢測，各種試驗操作步驟及判斷嚴格按照試劑盒說明書進行。

2 結果

用TRUST、膠體金法、TPPA法3種方法檢測15 230份血樣，比較各種方法檢測結果的符合率及特性，見表1、2。

表1 3種方法梅毒檢測結果比較表

表2 3種梅毒檢測方法的特性比較

由表1、2看出，TPPA法確認陽性的標本中，TRUST法的陽性檢測率不到20%，因為TRUST只在一期梅毒后期、二期梅毒的檢出率較高；而膠體金法得陽性率達90%以上，不受梅毒病程的影響，只與血清中梅毒抗體的水平有關，且操作較簡易。

3 討論

人體感染梅毒螺旋體后，可產生多種抗體，特異性抗梅毒螺旋體抗體主要有IgM、IgG兩類。IgM抗體持續(xù)時間短，IgG抗體可終生存在，但抗體濃度一般較低，不能預防再感染。非特異性抗體又稱反應素，是人體受TP感染后，機體迅速作出免疫應答，在3～4周左右，由螺旋體破壞的組織細胞所釋放的類脂樣物質以及螺旋體自身的類脂和脂蛋白刺激機體產生的IgM和IgG類抗體。

梅毒的血清學檢測試驗根據抗原不同分為以下兩類：

3.1 非特異性類脂質抗原試驗

試驗使用的抗原由牛心肌中提取的心磷脂、膽固醇和淳化的磷脂酰膽堿（卵磷脂）組成，即類脂質抗原，用于對梅毒的篩查。方法主要有性病研究實驗室試驗（venereal disease research laboratory test，VDRL）、不加熱血清反應素試驗（unheated serum reagin test，USR）、甲苯胺紅不加熱血清試驗（toluidine red unheated-serum test，TRUST）、快速血漿反應素試驗（RPR）等。

3.2 梅毒螺旋體抗原試驗

使用的抗原是梅毒螺旋體的特異成分。這類試驗有多種，國際上通用的試驗是梅毒螺旋體血凝試驗（TPHA）和熒光密螺旋體抗體吸收試驗（FTA-ABS），國內使用較多的是密螺旋體顆粒凝集試驗（TPPA）、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）和金標記免疫層析法。

檢測非特異性抗類脂抗體（反應素）的方法目前國內最常用的是RPR法和TRUST法，并且長期以來作為國內臨床疑似患者和血站獻血員篩檢的主要方法，但其靈敏性與特異性稍差。TRUST在一期梅毒后期、二期梅毒的檢出率較高；而在一期梅毒早期和三期梅毒、潛伏梅毒及治療后梅毒可呈陰性[3]，在一期潛伏期及三期梅毒中檢出率較低（58%～85%[4-5]）。而且有報道稱這種抗體也可在非梅毒螺旋體感染的孕婦血中及多種急、慢性疾病患者，尤其是老年人的血液中檢出。所以TRUST等方法更適合臨床梅毒確診患者的療效跟蹤觀察及各種研究，而不大適合臨床病房的輸血前全套檢查，因為存在一定的漏檢率以及假陽性率。

檢測抗密螺旋體抗體國際上通用的試驗主要有TPHA法和TPPA法，但由于操作稍繁瑣費時，不及TP-ELISA法及金標法方便快捷，目前主要用于篩檢陽性標本的確診。金標法與TPPA法、ELISA法比較，其檢測梅毒螺旋體抗體更快速，操作簡單，不需特殊設備，可單人份檢測，適合急門診患者和基層醫(yī)院，同時也適合體檢人員的大批量篩查。雖然有報道稱其特異性和靈敏度比TP-ELISA法稍低，但可作為住院患者輸血前全套檢查的初篩試驗，陽性結果后再結合TPPA法做進一步的確診試驗及TRUST滴度記錄，這樣結合檢查既可減少向臨床反饋結果的時間，也可大大提高檢測準確性，同時也可減輕實驗室工作人員的工作負擔，提高檢測效率。

[1]曾志良，陳春梅，段逸群.一期梅毒治療后血清學追蹤檢測結果分析[J].中國皮膚性病學，2004，18（3）：15-17.

[2]中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3版.南京：東南大學出版社，2006：101-108.

[3]趙辨. 臨床皮膚病學[M].南京：江蘇科學技術出版社，2001：515.

[4]張卓然.臨床微生物學和微生物檢驗[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2003：287.

[5]陳春梅，曾志良.潛伏梅毒85例血清學檢測分析[J].中國皮膚性病學，2004，18（5）：329-330.