肺結(jié)核患者血清蛋白電泳圖譜與體液免疫水平相關(guān)性的探討

何菊芳,佟愛華,董 梅,蔣 瀅,褚衍闖,楊彩娥

(解放軍309醫(yī)院 檢驗科,北京 100091）

近年來結(jié)核病的發(fā)病有上升趨勢,我國每年新增160萬例。結(jié)核病患者血清蛋白電泳譜的特征及其與體液免疫水平相關(guān)性的報道國內(nèi)極少。為此,本研究采用法國SEBIA公司高效全自動毛細管電泳儀進行血清蛋白電泳分析,調(diào)查其體液免疫水平。

1 資料與方法

1.1 研究對象

1.1.1 對照組 體檢健康者51例,男27例,女24例,平均年齡35歲,健康體檢者。

1.1.2 肺結(jié)核組 本院初治的符合中國結(jié)核痰分類方法標準[1]肺結(jié)核住院患者63例,男32例,女44例,年齡平均為 38歲,所有病例均經(jīng) X線、CT、病史、癥狀、體征等證實,采用同樣的抗結(jié)核治療方案。

1.2 儀器與試劑

1.2.1 儀器 法國SEBIA CAPILLRYS全自動高效毛細管電泳儀進行血清蛋白電泳分析,在200 nm波長檢測各種蛋白質(zhì)的百分比濃度;其它指標的檢測在日立7 600全自動分析儀上進行。

1.2.2 試劑 TP、ALB試劑為北京萊邦公司產(chǎn)品,免疫球蛋白等指標的試劑由德賽公司提供。電泳試劑為法國SEBIA公司CAPILLRYS全自動毛細管電泳配套產(chǎn)品。

1.3 方法空腹靜脈采血分離血清。TP、ALB檢測方法分別為雙縮脲法、溴甲酚綠法。免疫球蛋白等項目的檢測方法為免疫比濁法。血清蛋白電泳分析方法為高效毛細管法,按照操作規(guī)程進行。

應(yīng)用SAS統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理,數(shù)據(jù)呈正態(tài)分布的兩組均數(shù)比較采用t檢驗,非正態(tài)分布的兩組均數(shù)比較采用秩和檢驗,結(jié)果用(±s）表示,P＜0.05差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 見表1。

2.2 通過電泳圖譜的比較可以看出:ALB區(qū)帶所占比例有所下降,α1、γ區(qū)帶有所升高(三者均為P＜0.05）;α2區(qū)帶明顯升高(P＜0.01）。

表1 兩組血清蛋白電泳及體液免疫等指標水平的比較(±s）

表1 兩組血清蛋白電泳及體液免疫等指標水平的比較(±s）

肺結(jié)核組(n=63） 正常對照組(n=51）ALB(%） 51.03±6.74* 59.5±2.86 α1(%） 5.93±1.70* 3.87±0.4 α2(%） 14.61±18.82** 8.96±1.12 β1(%） 5.38±0.85 5.85±0.58 β2(%） 5.72±1.13 4.75±0.83 γ(%） 21.99±4.78* 17.6±2.45 TP(g/L） 68.9±8.41* 70.55±4.87 ALB(g/L） 39.26±5.77** 45.75±4.72 C3(g/L） 1.65±0.39 1.28±0.254 C4(g/L） 0.41±0.13 0.27±0.082 IgG(g/L） 16.06±5.41** 12.34±2.72 IgM(g/L） 1.21±0.70 1.42±0.564 IgA(g/L） 3.74±2.11* 2.45 ±0.75 CRP(mg/L） 73.22±70.63** 1.02±1.07

圖1 肺結(jié)核患者血清蛋白電泳典型圖譜

圖2 正常人血清蛋白電泳圖譜

3 討論

由表1可見,肺結(jié)核組血清中ALB水平下降(P＜0.01）,TP水平下降(P＜0.05）,說明患者存在蛋白合成代謝障礙,血清TP的降低主要是ALB下降所致。發(fā)熱是肺結(jié)核最常見的癥狀,主要是因結(jié)核菌毒力很強而出現(xiàn)中毒癥狀[2]。另外因結(jié)核菌毒素的影響,使人體蛋白合成代謝障礙[3]。如蛋白質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)補充不足或因消化系統(tǒng)功能差,影響吸收時會導(dǎo)致蛋白質(zhì)代謝負平衡[4],引起不同程度的血清ALB低下,此降低在血清蛋白電泳的圖譜上表現(xiàn)更為直觀,因ALB主要是由肝細胞合成,故其水平的顯著下降可能與肝臟受損有關(guān)[5]。

患者組中α1、γ區(qū)帶有所升高(P＜0.05）,α2區(qū)帶明顯升高(P＜0.01）,雖β2輕度增高,β1輕度下降,但無統(tǒng)計學意義(均P＞0.05）,通過圖譜的比較可直觀地看到。α1區(qū)帶主要可分為α1抗胰蛋白酶、α1-酸性糖蛋白,為主要的急性時相反應(yīng)蛋白,在急性炎癥時增高。肺結(jié)核是結(jié)核分枝桿菌感染引起的呼吸道傳染病,感染后即發(fā)生炎癥反應(yīng)。α2區(qū)帶主要包括結(jié)合珠蛋白、α2-巨球蛋白,急性時相反應(yīng)中血漿結(jié)合珠蛋白增加,在低白蛋白血癥時α2-巨球蛋白含量可增高,可能系一種代償機制以保持血漿膠體滲透壓?；颊呓Mγ區(qū)帶的比值升高(P＜0.05）,γ區(qū)帶球蛋白主要成份為免疫球蛋白IgG、IgA、IgM 和CRP,γ區(qū)帶百分比的增高與其中各蛋白組份水平的升高有關(guān),可能是感染刺激機體的免疫系統(tǒng),使得免疫球蛋白和CRP含量增高[6-7]。CRP在機體炎癥或組織破壞時出現(xiàn)于血清中的一種特殊蛋白質(zhì),在正常人血清中含量極微,急性炎癥時可明顯升高,無組織器官特異性。患者感染結(jié)核后,病灶周圍聚集大量活性巨噬細胞、淋巴細胞等,能釋放白細胞介素26和腫瘤壞死因子,刺激肝細胞誘使CRP合成增加,病變消退后迅速下降至正常,且不受放療等因素的影響[8];同時炎癥物質(zhì)和組織損傷物質(zhì)大量進入肺循環(huán),產(chǎn)生免疫反應(yīng),通過相應(yīng)的細胞因子也可刺激肝細胞合成CRP[9]。表中顯示疾病組中CRP水平極度升高,為正常對照組的幾十倍,表明患者處于急性炎癥期,體液免疫處于應(yīng)急狀態(tài)。

有動物和臨床實驗證實體液免疫在調(diào)節(jié)抗結(jié)核免疫反應(yīng)中發(fā)揮作用,對過程中各種免疫球蛋白的變化尚有爭議[10],也有文獻報道機體體液免疫水平高低也和結(jié)核病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[11],較強的體液免疫反應(yīng)可增強結(jié)核病化療效果[12]。本研究中患者組血清IgG水平顯著升高(P＜0.01）,IgA略有增高(P＜0.05）,而IgM略有升高但無統(tǒng)計學差異(P＞0.05）,與部分報道相類似[13-15]。補體是一組具有酶活性的蛋白質(zhì),具有多種生物效應(yīng),如增強吞噬作用,增加血管的通透性,中和病毒,免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)作用等,其中C3、C4是免疫功能的重要標志[16]。患者組中C3、C4水平略有升高但無顯著性差異,可能與IgG和IgM與結(jié)核菌結(jié)合,形成的激活物激活C4、C3有關(guān)。

綜上所述,肺結(jié)核患者血清蛋白電泳圖譜、體液免疫水平均可發(fā)生改變,兩者密切關(guān)聯(lián),通過對患者血清蛋白電泳圖譜的分析可對其肝損傷和體液免疫情況得到大致的了解,而對其體液免疫等指標的檢測可以得到更為全面、詳盡的分析,聯(lián)合應(yīng)用可為臨床提供更多的參考價值。

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