幾種藥物制備糖尿病小鼠模型效果的比較

張雅琴 吳萍萍 向敏 肖洋

中國中醫科學院糖尿病研究總院調查資料顯示，我國的糖尿病患者人數已達8000萬左右，占世界糖尿患者群總數的五分之一，患病率居世界第二位［1］。胰島素抵抗和胰島功能受損是糖尿病發病機制中兩個重要環節［2］，為了深入對疾病的探討，我們必須依賴于實驗動物及模型，這需要我們繼續對該方面進行進一步的研究。本實驗選用地塞米松、氫化可的松、四氧嘧啶和鏈脲佐菌素藥物配合高糖高脂飲食制備小鼠糖尿病模型，通過檢測血糖及胰島素水平變化，計算胰島素抵抗指數評價這幾種藥物制備糖尿病模型的效果。目前糖尿病模型的制備研究較多，局限于綜述類，研究制備方法的多樣性和機制闡述，缺乏實際的實驗依據，該實驗研究的意義在于為使用化學藥物誘導糖尿病動物模型時選用何種藥物達到預期的理想造模效果提供精準的實驗數據依據。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 昆明種小白鼠30只(6～8周齡)，體質量18～22 g雄性，購自蘇州大學醫學院實驗動物中心。

1.2 實驗動物的分組及模型制備 實驗動物隨機分為五組，分別為空白對照組、地塞米松組、氫化可的松組、四氧嘧啶組和鏈脲佐菌素組，每組10只小鼠。空白對照組、四氧嘧啶組和鏈脲佐菌素組小鼠按36 mg/(kg·d)腹腔注射，地塞米松組和氫化可的松組小鼠按36 mg/(kg·d)肌內注射，連續給藥30 d，分別于第10，20天和30天禁食8 h測定空腹血糖值，最后一次給藥前禁食，給藥后8 h內眼眶采血收集血液標本。

1.3 實驗動物血糖、胰島素水平的檢測和胰島素抵抗指數的計算 實驗小鼠分別于給藥的第10，20天和30天禁食8 h采取尾動脈微量血，使用強生穩豪倍易型血糖儀及血糖試紙測定空腹血糖值(FPG)。最后一次給藥模型制備結束后8 h內眼眶采血收集血液標本，4℃靜置半小時，吸取上層血清，使用小鼠胰島素水平檢測試劑盒ELISA測定空腹血清胰島素水平(FIN)，使用公式計算胰島素抵抗指數HOMA-IR=［FPG(mmol/L)FIN(mIU/L)］/22.5。

1.4 統計學方法 所有實驗結果采用SPSS 10.0軟件進行統計分析，結果以均數±標準差(±s)的形式表示。組間差異采用t檢驗。

2 結果

2.1 小鼠第10，20天和30天空腹血糖值(FPG)，見表1。

2.2 小鼠空腹胰島素水平(FIN)及胰島素抵抗指數(HOMAIR)計算，見表2。

表1 五組小鼠第10、20、30天空腹血糖值(FPG)的比較

表2 五組小鼠空腹胰島素水平(FIN)及胰島素抵抗指數、胰島素敏感指數的比較

3 討論

糖尿病動物模型的制備方法多種多樣，需根據研究目的和實驗條件，合理地制備實驗動物模型［3］。目前常用的是藥物誘導的方法建立糖尿病動物模型［4］。糖尿病成模效果的評價方法是造模研究的重要內容，正常血糖-高胰島素鉗夾技術是目前評價體內IR的金標準，然而該試驗費時費力，胰島素抵抗指數(HOMA-IR)法評價胰島素抵抗與金標準明顯相關性，該法評價胰島素抵抗更優于其他簡單的測試方法，尤其適合于動物模型評價基礎研究［5］。本實驗中各種方法制備的小鼠均出現出現了明顯的多飲、多食、多尿和體重減輕(即“三多一少”)癥狀，與空白對照組相比，地塞米松組、氫化可的松組、四氧嘧啶組和鏈脲佐菌素組血糖水平有顯著升高，胰島素分泌、胰島素抵抗指數顯著升高，胰島素敏感指標顯著降低，說明各組均存在胰島素的大量分泌和對胰島素的敏感性下降。胰島素敏感指標數據顯示，各組制備糖尿病模型的有效效果依次分別為鏈脲佐菌素、地塞米松、四氧嘧啶和氫化可的松。

［1］秦玉祥．丹參滴丸聯合腸溶阿司匹林治療160例糖尿病血脂紊亂患者的臨床觀察.中國醫藥指南，2010，8(3)：89-90．

［2］Whitcroft S，Herriot A.Insulin resistance and management of the menopause：a clinical hypothesis in practice.Menopause Int，2011，17(1)：24-28．

［3］劉微，李冀，盛波．胰島素抵抗動物模型的研究進展.中醫藥信息，2008，25(6)：9-11．

［4］覃雯，唐愛華．糖尿病實驗性動物模型研究概況．時珍國醫國藥，2007，18(6)：1511-1512．

［5］王玉中，張志國，孫朝輝．2型糖尿病大鼠模型的建立與評價.毒理學雜志，2009，23(6)：476-478．