江金蘭,葉 煒,羅慶國,李永清
(福建省三明市農業科學研究所,福建 沙縣 360059)
白掌 (Spathiphyllum floribundum),又名白鶴芋、苞葉芋、一帆風順、和平芋,屬天南星科苞葉芋屬多年生常綠草本觀葉植物,由于白掌花葉兼美,輕盈多姿,生長旺盛,且又耐陰,故深受人們的青睞,常用于室內綠化美化裝飾[1]。白掌不僅是優良的觀葉植物,它還可以抑制人體呼出的廢氣如氨氣和丙酮,同時它也可以過濾空氣中的苯、三氯乙烯和甲醛,它的高蒸發速度可以防止鼻粘膜干燥,使患病的可能性大大降低[2]。白掌常用分株和播種繁殖,年繁殖系數低,遠不能滿足商品化生產的要求,因此大規模生產常采用組織培養法繁殖,增殖迅速,株叢整齊,是種苗生產的最佳途徑。
材料從三明市農科所引進,試驗于2008年在本單位生物中心實驗室進行,選擇生長健壯,無病蟲害的白掌側芽、葉片、葉柄為外植體。
從母株上剪取側芽 (母株少澆水,土壤保持干燥),用清水將芽表面徹底沖洗干凈,剪去外層的苞葉,先用75%的酒精浸30 s后,再用0.1%的升汞浸泡8 min(期間不停的振蕩)后,用無菌水沖洗4~5次,備用。將側芽的葉片、葉柄剪去,側芽接種于側芽誘導培養基 (1) -(4)誘導叢生芽,剪下的葉片、葉柄接種于葉片、葉柄誘導培養基 (5)-(8)誘導愈傷組織,葉柄切成1 cm左右,葉片切成1 cm×1 cm左右,葉片的背面用刀片劃幾刀。為了避免交叉污染,每瓶培養基接種一個外植體。每種培養基接種40個樣本,定期觀察側芽、愈傷組織的萌發情況、不定芽的數量,生根的株數,以比較不同培養基的培養效果。
誘導培養基。側芽誘導不定芽:(1)MS+6-BA 5 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1;(2)MS+6-BA 3 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1;(3)1/2MS+6-BA 5 mg·L-1+NAA 0.5 mg· L-1;(4)MS+6-BA 1 mg·L-1+KT 3 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1。葉片、葉柄誘導愈傷組織:(5)1/2MS+6-BA 5 mg·L-1+NAA 0.2 mg · L-1+2,4-D 0.4 mg·L-1;(6)MS+6-BA 5 mg· L-1+NAA 0.2 mg·L-1+2,4-D 0.4 mg·L-1;(7)MS+6-BA 3 mg·L-1+NAA 0.2 mg · L-1+2,4-D 0.2 mg·L-1;(8)MS+2,4-D 2 mg·L-1。增殖培養基:(9)MS+6-BA 2 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1;(10)MS。生根培養基:(11)1/2MS+IBA 0.5 mg·L-1+AC 0.5 g·L-1;(12)1/2 MS+NAA 0.2 mg·L-1+AC 0.5 g·L-1。pH 為 5.8,培養溫度為(25±1)℃,光照強度1 500~2 000 lx,光照為每天14 h,瓊脂粉 5.5 g·L-1。
將側芽的葉片、葉柄剪去,側芽接種于側芽誘導培養基 (1) -(4),剪下的葉片、葉柄接種于葉片、葉柄誘導培養基 (5) - (8),20 d后側芽萌動,培養基 (1)中萌發的芽較壯,葉色濃綠,表明側芽誘導不定芽時MS較1/2MS好,分裂素6-BA比KT誘導率更高,且以5 mg L-1為宜。葉片、葉柄40 d后邊緣出現少量愈傷組織,60 d后愈傷組織萌發不定芽,培養基 (6)為最適宜 (表1),通過愈傷組織萌出不定芽的時間較側芽長,且變異率更高,故本研究以側芽誘導不定芽方式為主。

表1 不同外植體在不同培養基上的出芽情況
將側芽誘導的不定芽接種于增殖培養基 (9)-(10)中,在種苗生產過程中,9代以前以 (9)為主,分裂素6-BA的量慢慢降低,9代以后以不加激素的空白培養基 (10)為主,每隔30 d左右繼代1次。結果 (表2)培養基 (9)的增殖倍數達3.83,培養基 (10)的增殖倍數為1.93。

表2 不同培養基對叢生芽增殖的影響
將增殖培養中2 cm以上的無根苗切下接種于生根培養基 (11) - (12),7 d后近基部有小根長出,30 d后生根培養基 (11)生根率最高,達100.0%(表 3)。

表3 不同培養基的生根效果
生根培養30 d后,將試管苗煉苗1~2 d,洗凈根部培養基,用1 000倍液的甲基托布津浸泡5 min后,移栽至裝有泥炭土的穴盤中,把移栽苗放在溫室栽培架上,移栽后澆透水,覆蓋薄膜保濕,保持相對濕度90%以上,遮蔭70% ~80%,7 d后掀開薄膜,增加澆水次數,保持苗床濕潤,15 d后開始施肥噴藥,以后每7~10 d為1周期,藥劑防治以1 000倍液的甲基托布津或多菌靈噴霧,施肥以花多多2 000倍液噴施,3個月后可作為穴盤苗出售。
側芽最適宜的培養基為 MS+6-BA 5 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1,葉片、葉柄最適宜的誘導培養基為 MS+6-BA 5 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+2,4-D 0.4 mg·L-1,繼代增殖培養基9代以前以MS+6-BA 2 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1為宜,生根培養基以 1/2 MS+IBA 0.5 mg·L-1+AC 0.5 g·L-1為宜。
在外植體的消毒過程中,側芽相對于用葉片、葉柄困難,在建立無菌系的過程中,用側芽誘導不定芽相對于用葉片、葉柄誘導愈傷組織產生不定芽容易,且變異率更低。
在試驗和生產的過程中發現,白掌較容易生根,省去生根培養階段,把增殖階段的有根苗直接移栽,可以大大的降低生產成本,但未經過生根培養的移栽苗,種苗的整齊度不一致,因此對污染率及種苗整齊度的控制仍然是生產過程中應把握的重點。
[1]譚文澄,戴策剛.觀賞植物組織培養技術 [M].北京:中國林業出版社,2000:84-141.
[2]余亞白,陳源,賴呈純,等.室內空氣凈化植物的研究與利用現狀及應用前景 [J].福建農業學報,2006,21(4):425-429.