人參蛋白對小鼠抗疲勞作用的研究

徐云鳳，趙 雨，邢楠楠，楊 菲，林艷玲

(長春中醫藥大學，吉林長春 130117)

人參蛋白對小鼠抗疲勞作用的研究

徐云鳳，趙 雨*，邢楠楠，楊 菲，林艷玲

(長春中醫藥大學，吉林長春 130117)

目的:研究人參蛋白對小鼠的抗疲勞作用。方法:選用昆明小鼠，經灌胃給予人參蛋白0.1，0.2，0.4g/kg，同時設空白對照組，連續灌胃30d。分別觀察小鼠的體重變化情況、負重游泳時間、血乳酸、肝糖原和血清尿素氮的含量。結果:人參蛋白能明顯延長小鼠游泳時間、降低血乳酸值、增加肝糖原及血清尿素氮含量。結論:人參蛋白具有增強小鼠抗疲勞功能的作用。

人參蛋白，抗疲勞，小鼠

人參(Panax ginsengC.A.Mey.)是五加科人參屬植物的根和根莖，為我國名貴藥材。人參中含有許多化學活性物質，它對人體中樞神經、心血管、免疫、消化和內分泌等諸多系統都具有生理作用［1－2］。近年來，人們對人參皂甙及揮發性成分研究較多，但對蛋白質及多肽的研究較少［3－4］。本實驗通過研究人參蛋白對小鼠負重游泳和運動后小鼠血乳酸、肝糖原及血清尿素氮含量等抗疲勞指標的影響，綜合分析了其抗疲勞作用，為進一步開發抗疲勞功能食品奠定理論基礎。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

5年生人參 吉林靖宇縣，均為五加科植物人參(Panax ginsengC.A.Mey.)，符合2005年版《中國藥典》規定;樣品 將人參粉碎成粉，加入10倍量蒸餾水浸提24h，浸提液分別進行微濾(泵速為270r/min，進口壓力 3psi，出口壓力 2psi)和超濾(泵速為60r/min，進口壓力5psi，出口壓力3psi)，濾液冷凍干燥得人參蛋白凍干品［5－6］，經Brad－ford蛋白含量試劑盒法測定蛋白含量為80%;動物 昆明種清潔級小鼠240只，吉林大學實驗動物中心，合格證號∶SCXK－(吉)2008－0005，體重∶18～22g;二乙酰肟、三氯化鐵、苯甲酸、4%硫酸銅、1%氟化鈉、濃硫酸、5%的三氯醋酸(TCA)、蒽酮試劑等 國產分析純。

DS－1型高速組織搗碎機 上海標本模型廠; QuixStan型中空纖維膜過濾系統，0.45μm中空纖維過濾柱，100ku纖維過濾膜堆 GE Healthcare公司; LL3000型冷凍干燥機 Heto公司;751－G型紫外分光光度計 上海分析儀器廠;722N型分光光度計上海尤尼柯有限公司;組織勻漿器 上海正慧工貿有限公司;HH.S21－8－S型恒溫水浴鍋 上海躍進醫療器械廠;游泳箱 50cm×40cm×40cm。

1.2 實驗方法

1.2.1 動物分組 將實驗動物適應性喂養2d后隨機分為4組，即空白對照組(同體積蒸餾水)和3個受試藥物組(低劑量組∶0.1g/kg，中劑量組∶0.2g/kg，高劑量組∶0.4g/kg)。每天灌胃一次，連續30d，灌胃期間飼喂合成鼠料，自由進食、飲水。

1.2.2 小鼠游泳實驗 末次給予受試樣品30min后，將尾根部負荷5%體重鉛皮的小鼠置于游泳箱中游泳。箱中水深不少于30cm，水溫(25±1)℃，記錄小鼠自游泳開始至死亡的時間，即小鼠負重游泳時間。

表1 人參蛋白對小鼠體重與負重游泳時間的影響

表2 人參蛋白對小鼠血乳酸含量的影響

1.2.3 血乳酸測定 末次給予受試樣品30min后，各采血20μL加入40μL破膜液中，立即充分振蕩破碎細胞，同時將采血后動物置于溫度為30℃的水中不負重游泳，10min后停止。游泳后立即采血20μL加入40μL破膜液中振蕩，休息20min后再各采血20μL加入40μL破膜液中振蕩，用乳酸儀測定各樣品血乳酸值。

1.2.4 肝糖原測定 末次給予受試樣品30min后，處死動物，取肝臟經生理鹽水漂洗，用濾紙吸干后置于冰面上的平皿內，迅速稱取肝臟100mg，測定肝糖原含量(蒽酮法)。

1.2.5 血清尿素氮測定 末次給予受試樣品30min后，將小鼠置于溫度為 30℃的水中不負重游泳90min，休息60min后采眼球血0.5mL，血凝固后取血清用二乙酰－肟法測定血清尿素氮含量。

2 結果與分析

2.1 人參蛋白對小鼠體重與負重游泳時間的影響

由表1可見，人參蛋白各劑量組與空白對照組比較，小鼠體重均有增加的趨勢，但無統計學意義;人參蛋白0.1g/kg劑量組與空白對照組比較，負重游泳時間增長且有顯著性差異(P＜0.05)，而其他兩組小鼠負重游泳時間也有增長的趨勢，但結果沒有顯著性差異(P＞0.05)。

2.2 人參蛋白對小鼠血乳酸含量的影響

由表2可見，游泳前給藥組小鼠比對照組小鼠血乳酸含量明顯降低，且有極顯著性差異(P＜0.01);游泳后0min，給藥組小鼠血乳酸含量有所升高，但低于對照組，且低劑量組有顯著性差異(P＜0.05);游泳后20min，各組小鼠血乳酸含量都降低，其中低劑量組與對照組有顯著性差異(P＜0.05);人參蛋白高、中、低劑量組較對照組乳酸曲線下面積均明顯降低，其中高、中劑量組有顯著性差異(P＜0.05)，低劑量組有極顯著性差異(P＜0.01)。

2.3 人參蛋白對小鼠肝糖原含量的影響

由表3可見，與對照組比較，人參蛋白0.1g/kg劑量組能明顯增加小鼠肝糖原的含量(P＜0.01)，而人參蛋白中、低劑量組有增加肝糖原含量的趨勢，但無顯著性差異(P＞0.05)。

表3 人參蛋白對小鼠肝糖原含量的影響

2.4 人參蛋白對小鼠血清尿素氮含量的影響

由表4可見，與對照組比較，人參蛋白各劑量組小鼠血清尿素氮含量均有增加趨勢，但沒有顯著性差異(P＞0.05)，說明人參蛋白對血清尿素氮含量的影響不大。

表4 人參蛋白對小鼠血清尿素氮含量的影響

3 討論

運動耐力是反映機體疲勞程度最直接、最客觀的指標［7］。研究結果表明人參蛋白可延長小鼠負重游泳時間，有利于增強動物的運動耐力。機體大量運動后處在高度缺氧狀態時主要依靠糖無氧酵解供給能量，乳酸是糖無氧酵解的產物，長時間劇烈運動使機體中乳酸積累過多，從而影響體內環境的相對穩定和體內的正常代謝過程。血乳酸水平可以反映有氧代謝能力、疲勞的產生和消除速度［8］。研究表明負重游泳后給藥組小鼠的血乳酸曲線下面積明顯少于對照組(見表2)，說明人參蛋白能夠有效減緩小鼠的疲勞增加，同時加快其消除速度。糖原是運動能量的重要來源，糖原的儲存量可以直接影響機體的運動能力，提高糖原儲備量有助于提高耐力和運動能力，抵抗疲勞。肝糖原含量直接反映機體糖原代謝情況，本實驗以肝糖原的含量來反映運動對糖原消耗情況［9］，結果顯示給藥組小鼠肝糖原消耗量明顯低于對照組。機體血清尿素氮含量隨運動負荷的增加而增加，是機體運動過程中的一種代謝產物，需要及時運輸，在體內積累后，將表現為機體對負荷的適應能力差，機體顯示疲勞的現象，本實驗中人參蛋白對小鼠血清尿素氮含量影響不明顯。綜上所述，人參蛋白具有增強機體抗疲勞功能的作用，本研究為人參活性資源的開發利用提供理論依據。

［1］賀興東.淺談人參的合理使用［J］.中國中藥雜志，1989，14 (7):52－53.

［2］李晶晶，徐國鈞，金蓉鸞，等.人參與西洋參的皂甙成分分析［J］.中國中藥雜志，l995，20(4):l97－199.

［3］馬波，邱芳萍，嚴銘銘，等.人參蛋白的分離純化［J］.現代食品科技，2006，22(4):156－163.

［4］王洪濤，尹花仙，金海珠，等.海參肽對小鼠抗疲勞作用的研究［J］.提取與活性，2007，23(3):89－91.

［5］王貞貞，張維玉.現代過渡技術——超濾技術［J］.中國醫院藥學雜志，1992，12(6):284.

［6］幺寶金，趙雨，楊士慧，等.人參總蛋白的提取工藝研究［J］.中藥材，2009，32(2):293－295.

［7］何來英，嚴衛星，樓密密，等.保健食品抗疲勞作用實驗方法研究［J］.中國食品衛生雜志，1997，9(4):1－6.

［8］龔晨睿，李宇紅，馬良，等.紅景天復合制劑對小鼠運動代謝指標的影響［J］.湖北預防醫學雜志，2002，13(6):5－8.

［9］李永進，楊睿悅，扈學俸，等.火麻仁蛋白對小鼠抗疲勞和免疫調節功能的初步研究［J］.衛生研究，2008，37(2):175－178.

Study on anti－fatigue effects of ginseng protein on mice

XU Yun－feng，ZHAO Yu*，XING Nan－nan，YANG Fei，LIN Yan－ling
(Chinese Medicine and Bio－engineering Research Center，Changchun University of Chinese Medicine，Changchun 130117，China)

Objective:To study the anti－fatigue effect of ginseng protein on mice.Methods:Three doses(0.1，0.2，0.4g/kg)of ginseng protein and a blank dose were applied to mice for 30 days continuously.The weight，swimming time，the contents of blood lactic acid，and liver glycogen and blood urea nitrogen of mice were observed.Results: Ginseng protein had no effect on mice’s weight，all doses of ginseng protein could significantly prolong swimming time in mice，lower the content of blood lactic acid，increase the content of liver glycogen after strenuous exercise. Conclusion:The study showed that the ginseng protein had anti－fatigue effects.

ginseng protein;anti－fatigue;mice

TS201.4

A

1002－0306(2011)11－0406－03

2010－11－15 *通訊聯系人

徐云鳳(1986－)，女，碩士研究生，研究方向:中藥學。

國家自然科學基金資助項目(30873371);國家科技支撐計劃資助項目(2007BAI38B02)。