刺藍抗疲勞口服液提取工藝的研究

李康 李柯 陳丹 李若存

刺藍抗疲勞口服液提取工藝的研究

李康 李柯 陳丹 李若存

目的研究影響刺藍抗疲勞口服液提取工藝因素，確定最佳條件。方法采用L9(34)進行正交設計試驗，對刺藍抗疲勞口服液提取工藝進行優選，以紫丁香苷、人參皂苷Rb1提取量及浸膏提取率為考察指標，考察加水量、提取時間、藥材粒徑對提取工藝的影響。結果最佳工藝條件為飲片加水煎煮二次，第一次加10倍水，煎煮2 h，第二次加8倍水，煎煮1.5 h。結論該工藝穩定可靠，簡便易行，可用于刺藍抗疲勞口服液的工業化生產。

刺藍抗疲勞口服液;正交設計;提取工藝

刺藍抗疲勞口服液是由刺五加、絞股藍枸杞子等制成的中藥六類新藥，功能調補氣血，強精神，益氣力，用于術后疲勞綜合征。證屬氣血虧虛者。為了提高藥材中有效物質的利用率，我們根據處方有效成分的性質，采用正交試驗對刺藍抗疲勞口服液的提取工藝進行了研究。

1 儀器與試液

LC-10A高效液相色譜儀(日本島津)，N2000色譜工作站(浙江大學智能信息工程研究所)，PBQ-Ⅱ型薄層自動鋪板器(重慶南岸新力實驗電器廠)，硅膠G(青島海洋化工廠)，AE-240型電子分析天平(中國梅特勒-托利多儀器廠);刺五加、絞股藍等藥材購自長沙九旺醫藥有限公司，紫丁香苷、人參皂苷Rb1均由中國藥品生物制品檢定所提供，所用試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 因素水平表

表1 試驗因素水平表

2.2試驗方法與結果

表2 L9(34)正交實驗設計表

2.2.1 浸膏得率的測定 用L9(34)正交表安排試驗，見表2，稱取1/10處方量藥材，按設定方案進行提取，濾過，濾液合并，濃縮，定容至100 ml。精密吸取10 ml，置已干燥至恒重的蒸發皿中，水浴蒸干，于105℃干燥3 h，置干燥器中冷卻0.5 h，迅速稱重，按下式計算浸膏得率，計算結果見表3。

2.2.2 紫丁香苷含量測定［1］

2.2.2.1 色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲醇-水(13∶87)為流動相;檢測波長為265nm;理論板數按紫丁香苷峰計算不得低于2000。

對照品溶液的制備精密稱取紫丁香苷對照品適量，加甲醇制成每1 ml含0.1 mg的溶液，即得。

表3 浸膏得率的測定結果(%)

2.2.2.2 供試品溶液的制備 取(2.1)項下已定容的9份余液，分別精密量取2 ml，置10 ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45 μm的微孔濾膜濾過，取續濾液，即得。共制得9個樣品。

2.2.2.3 測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液10 μl，注入液相色譜儀，測定，計算，即得。結果見表4。

2.2.3 人參皂苷Rb1含量的測定

2.2.3.1 色譜條件與系統適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;乙腈-0.5%磷酸(20∶80)為流動相;檢測波長為203nm;理論板數按人參皂苷Rb1峰計算不得低于2000。

2.2.3.2 對照品溶液的制備 精密稱取人參皂苷Rb1對照品適量，加甲醇制成每1 ml含0.1 mg的溶液，即得。

2.2.3.3 供試品溶液的制備 取紫丁香苷含量測定項下的供試品作為供試品。

2.2.3.4 測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液10 μl，注入液相色譜儀，測定，計算，即得。結果見表5。

表4 紫丁香苷提取量(mg)

表5 人參皂苷Rb1提取量(mg)

表6 浸膏提取率方差分析表

以浸膏得率為考察指標，表中極差R值大小顯示，各因素作用主次為B＞A＞C;B1＞B2＞B3，A2＞A3＞A1，C2＞C1＞ C3;方差分析結果表明:B因素有非常顯著性意義(P＜0.01)，A因素有顯著性意義(P＜0.05)，以B1A2C2組合為佳。

以紫丁香苷提取量為考察指標，表中極差R值大小顯示，各因素作用主次為A＞B＞C，且A1＞A2＞A3，B1＞B2＞B3，C2＞C1＞C3;方差分析結果表明:A因素有非常顯著性意義(P＜0.01)，B因素有顯著性意義(P＜0.05)，以A1B1C2組合為佳。

表7 紫丁香苷提取量方差分析表

表8 人參皂苷Rb1提取量方差分析表

以人參皂苷Rb1提取量為考察指標，表中極差R值大小顯示，各因素作用主次為A＞B＞C，且A1＞A2＞A3，B1＞B2＞B3，C3＞C1＞C2;方差分析結果表明:A、B因素有顯著性意義(P＜0.05)，以A1B1C1組合為佳。

綜合以上實驗結果表明，加水量、提取時間對提取效果具有顯著性影響，藥材粒徑對提取效果無顯著性影響，本產品中紫丁香苷提取量及人參皂苷提取量作為重要因素考慮，因此以A1B1C1為最佳組合。

2.3 驗證試驗 平行稱取同一批1/10處方量藥材3份，按A1B1C1進行試驗，結果見表9。

表9 驗證試驗結果

根據上述驗證實驗結果，故確定最佳工藝條件為A1B1C1，即取飲片加水煎煮2次，第一次加10倍量水，煎煮2 h，第二次加8倍量水，煎煮1.5 h。

3 討論

3.1 刺五加具有益氣健脾，補氣安神的功能，為方中君藥，藥理和臨床研究結果表明:刺五加中所含的總苷是抗疲勞、扶正固本的有效成分［2］;絞股藍所含的絞股藍總苷是抗疲勞、防治多臟器損傷的有效成分［3］;上述成分水溶性好，因此選擇水作為本制劑的提取溶劑。

3.2 本試驗以刺五加中含的紫丁香苷，絞股藍中含的人參皂苷Rb1及浸膏提取率作為評價指標，通過正交試驗法對刺藍抗疲勞口服液的提取工藝條件進行了優化，并按最佳工藝進行了驗證，結果表明該工藝重復性好，有效組分提取效率高，且經濟可行。本研究為刺藍抗疲勞口服液的生產工藝提供了合理依據。

［1］ 中國藥典委員咐．中華人民共和國藥典．一部.北京．中國醫藥科技出版社，2010:192．

［2］ 郭愛民.刺五加的現代研究進展.中國現代藥物應用，2009，3 (10):194．

［3］ 孫萬森，齊典．絞股藍總苷防治多臟器損傷的藥理研究進展.中藥材，2007，30(2):241．

Study on the extraction process in Cilan Kanpilao oral liquid

LI Kang，LI Ke，CHEN Dan，et al．
The First Affiliated Hospital in Hunan University of Traditional Medicine Changsha 410007，China

Objective To study the factor which has effect on the extraction of Cilan Kanpilao oral liquid，select the best process.MethodsThe extracting conditions were optimized by using L9(34)orthogonal test.Employing the content of Syringin，Ginsenoside Rb1and the extraction ratio of extractum as indexes，the effects of the grain size of crude drugs，time andcycles of extracting，the amount of water on the extracting process were investigated.ResultsThe optimal conditions were process herbs，10 times and 8 times amount of water for 2 cycles，and the extracting time was 2 hours and 1.5 hours in each time.ConclusionThe process is stable and repiable，easy and available，suitable for manufacturing of Cilan Kanpilao oral liquid．

Cilan Kanpilao oral liquid;Orthogonal design;Extracting process

湖南省科技廳科研基金資助項目(項目編號: 2010FJ3105)

410007 湖南中醫藥大學附屬第一醫院(李康);湖南省中醫藥研究院(李柯 陳丹 李若存)

李若存 E-mail:liruocun2003@yahoo.com.cn