用雙向瓊脂擴散實驗檢測甲胎蛋白的安全模擬方法

王美惠，李 巖

（遼寧衛生職業技術學院，遼寧 沈陽 110101）

用雙向瓊脂擴散實驗檢測甲胎蛋白的安全模擬方法

王美惠，李 巖

（遼寧衛生職業技術學院，遼寧 沈陽 110101）

雙向瓊脂；擴散實驗；甲胎蛋白

雙向瓊脂擴散實驗是將抗原和抗體分別加到瓊脂板相對應的孔中，兩者各自向四周擴散，若二者相對應，在比例合適處形成白色沉淀線。若同時含有多種抗原抗體系統，因其擴散速度不同，可在瓊脂層中形成多條沉淀線。這項實驗可用于多種抗原成分的分析和鑒定，如檢測甲胎蛋白。用雙向瓊脂擴散實驗檢測甲胎蛋白需要肝癌患者的血清和健康人血清，為避免學生和實驗教師接觸患者血液標本，我們用模擬方法做這個實驗。

1 材料

（1）1%瓊脂（生理鹽水配制）。（2）陽性血清。（3）甲胎蛋白診斷學清。（4）待檢血清。（5）陰性對照血清。（6）載玻片、打孔器等。

2 模擬方法

（1）陽性血清——人免疫球蛋白IgG代替；

（2）甲胎蛋白診斷血清——羊抗人IgG免疫血清代替；

（3）待檢血清（肝癌患者的血清）——人免疫球蛋白IgG代替；

（4）陰性對照血清——生理鹽水代替。

用生理鹽水將人免疫球蛋白IgG稀釋一定濃度來代替肝癌患者血清（IgG代替肝癌患者血清中的甲胎蛋白），用生理鹽水將羊抗人IgG免疫血清稀釋一定濃度來代替甲胎蛋白診斷血清（IgG抗體代替甲胎蛋白抗體），抗原IgG和IgG抗體在比例合適處形成白色沉淀線。在做實驗之前先做預實驗，找出抗原IgG和IgG抗體能形成白色沉淀線的最佳濃度。

3 實驗方法

（1）用1%瓊脂（生理鹽水配制）鋪板。

（2）用打孔器打梅花孔（見圖1）。

（3）1、4孔加入陽性血清，2、6 孔加入待檢學清，3、5孔加入陰性對照血清，中心孔加入甲胎蛋白診斷血清。

（4）將加好樣品的瓊脂板放于濕盒內，置37℃溫箱24小時，觀察并記錄結果。

4 結果判斷

若待檢血清標本產生沉淀線，并與陽性對照所產生的沉淀線吻接成一線，則表示陽性。如無沉淀線，則表示陰性。

5 優點

此模擬方法安全，實驗效果非常好。

G424.31

B

1671-1246（2011）01-0132-01