紫外分光光度法測定刺五加總苷總黃酮軟膠囊1中總苷含量

魏淑梅 武桂萍 王 莉 崔玉海 李紹銘

（哈爾濱仁皇藥業有限公司 黑龍江省中藥提取物及中藥創新藥物研究重點實驗室 黑龍江省刺五加研究所 哈爾濱 150300）

中藥5類新藥刺五加總苷總黃酮軟膠囊是以刺五加總苷總黃酮提取物，加定量植物油和賦形劑經加工而制成軟膠囊劑型。產品具有增強機體免疫力、緩解體力疲勞、抗抑郁的功效。其中所含的刺五加總苷為主要功效性成分，經現代藥理學研究表明刺五加總苷具有增強機體非特異性防御能力，除具有免疫調節、抗腫瘤、抗衰老、抗輻射損傷及抗疲勞等作用外，還可治療心腦血管疾病、糖尿病、神經衰弱等癥。

1 儀器、試藥與試劑

TU1901紫外分光光度儀(上海棱譜儀器儀表有限公司)；刺五加總苷總黃酮軟膠囊（哈爾濱仁皇藥業股份有限公司，批號：20110101，20110102，20110103）；紫丁香苷對照品 (中國生物制品檢定所，批號：111574-200502，含量測定用）；甲醇為分析純，水為純化水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 溶液的制備

2.1.1 對照品溶液的制備

精密稱取紫丁香苷對照品5.14mg，置25ml量瓶中，加50%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液。精密吸取3ml，置10ml量瓶中，用50%甲醇定容至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.1.2 供試品溶液的制備

取本品6粒,剪開,置100ml錐形瓶中少量正己烷洗盡油分,加甲醇50ml,超聲30min,放冷,抽濾,濾液回收至干,殘渣加2mol/L H2SO430ml,沸水浴回流2h,稍冷,加氯仿20ml回流30min,再用氯仿萃取3次,每次20ml,水洗兩次,每次30ml,氯仿液回收至干,加甲醇約8ml溶解,加水定容至10ml,-2℃冷藏2h,微孔濾膜濾過,取續濾液,即得。

2.2 測定法

取樣品適量，配制成與標準曲線濃度適中的濃度，與標準曲線同法處理,從標準曲線上讀出供試品溶液的濃度，計算，即得。

2.3 方法學考察

2.3.1 線性試驗

精密吸取紫丁香苷濃度為0.2056mg/ml的對照品貯備液 1、2、3、4、5 ml, 分別置于10ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,以吸收度為縱坐標，取樣量為橫坐標,進行線性回歸,方程為Y=0.0087X+0.0035,r=0.9995。結果表明,紫丁香苷在20.56～102.8μg/ml線性良好。

2.3.2 精密度試驗

取同一樣品溶液連續進樣6次,測得紫丁香苷的峰面積RSD=1.3%。

2.3.3 穩定性考察

同一樣品溶液和對照分別在0,2,4,6,8 h進樣,測得紫丁香苷濃度RSD=1.4%。表明樣品溶液及對照溶液在8h內穩定。

2.3.4 重現性試驗

取同一批號樣品6份(201101),按2.1.2項下方法操作,分別測定總苷的含量,RSD=1.1%。表明方法重復性較好。

2.3.5 回收率試驗

采用加樣回收率測定方法。取刺五加軟膠囊3粒,添加一定量(61.68μg)的紫丁香苷對照品溶液,按2.2.2項下方法操作,制備成加樣回收供試液,并依法測定。結果紫丁香苷的平均加樣回收率為98.92%,RSD=1.5%(n=5)。

2.4 樣品測定結果

取3批樣品依法操作,測定計算樣品含量。

3 討論

刺五加總苷是刺五加總苷總黃酮軟膠囊中主要功效成分，紫外分光光度法是最常見的測定總苷含量的方法。本試驗建立的紫外分光光度法測定刺五加總苷總黃酮軟膠囊中總苷的含量,方法簡便、快速、重現性好、準確度高,可作為該制劑的定量控制指標。

[1]張萍,周旭,王伽伯等.紫外分光光度法測定不同產地蒺藜中總皂苷的含量.解放軍藥學學報,2010,6（22）,533-534

[2]李艷芬,毛 羽,許婧等.紫外分光光度法測定復方KGY中總皂苷的含量.西南民族大學學報,自然科學,2001,2(36)

[3]黃敏珠,王 棟,尹忠臣等.紫外分光光度法測絞股藍片中絞股藍總苷的含量,中國中藥雜志,2010,18（35）