馬氏珠母貝貝肉與貝殼成分研究

摘要：分別對馬氏珠母貝貝肉及貝殼的氨基酸和脂溶性成分進(jìn)行了分析和對比。結(jié)果顯示馬氏珠母貝貝肉中含有１７種氨基酸，其中必需氨基酸（Ｌｙｓ、Ｔｈｒ、Ｐｈｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｍｅｔ）占總氨基酸含量的３２．０％，呈味氨基酸（Ａｒｇ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ）占總氨基酸含量的５６．２％。貝殼中檢測出１０種氨基酸，必需氨基酸占總氨基酸含量的５２．０％，呈味氨基酸占總氨基酸含量的４１．８％。從馬氏珠母貝貝肉和貝殼中分別鑒定出４７種和３３種脂溶性成分，其中主要是烷烴化合物，貝肉與貝殼有６種組分是相同的。此外，馬氏珠母貝貝肉的脂溶性組分中，棕櫚酸的含量最高，為５８．７８％。

關(guān)鍵詞：馬氏珠母貝；氨基酸；脂溶性成分

中圖分類號：Ｑ１７６文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Ａ文章編號：0439－８114（２０11）07－1439-05

Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｆｌｅｓｈ ａｎｄ Ｓｈｅｌｌ ｏｆ Ｐｉｎｃｔａｄａ ｍａｒｔｅｎｓｉｉ

ＭＩＡＯ Ｄｏｎｇ－ｌｉａｎｇ１ａ，ＪＩ Ｌｉ－ｌｉ２，ＬＩ Ｓｈｉ－ｊｉｅ１ａ，ＨＵ Ｓｈｉ－ｗｅｉ１ａ，ＳＯＮＧ Ｗｅｎ－ｄｏｎｇ１ｂ

（１ａ． Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ； １ｂ． Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ， Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｏｃｅａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｚｈａｎｊｉａｎｇ５２４０８８，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ； ２. Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｅｎｖｉｒｏｍｅｎｔ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｄｏｎｇｈｕａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０００５１， Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ａｍｉｎｏ ａｃｉｄｓ ａｎｄ ｌｉｐｏｓｏｌｕｂｌｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｉｎ ｆｌｅｓｈ ａｎｄ ｓｈｅｌｌ ｏｆ Ｐｉｎｃｔａｄａ ｍａｒｔｅｎｓｉｉ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ａｎｄ ｃｏｍｐａｒｅｄ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｓｅｖｅｎｔｅｅｎ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｉｎ ｍｅａｔ ｏｆ Ｐｉｎｃｔａｄａ ｍａｒｔｅｎｓｉｉ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ， ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ （Ｌｙｓ， Ｔｈｒ， Ｐｈｅ， Ｖａｌ， Ｌｅｕ， Ｉｌｅ， Ｍｅｔ） ａｃｃｏｕｎｔｅｄ ｆｏｒ ３２．０％ ｏｆ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄs； ａｎｄ ｆｌａｖｏｒ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ（Ａｒｇ， Ａｌａ， Ｇｌｙ， Ａｓｐ， Ｇｌｕ） ａｃｃｏｕｎｔｅｄ ｆｏｒ ５６．２％ ｏｆ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ａｍｉｎｌ ａｃｉｄｓ． Ten ｋｉｎｄｓ ｏｆ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｉｎ ｓｈｅｌｌ， ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ａｃｃｏｕｎｔｅｄ ｆｏｒ ５２．０％ ｏｆ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄs； ａｎｄ ｆｌａｖｏｒ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ａｃｃｏｕｎｔｅｄ ｆｏｒ ４１．８％ ｏｆ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄs． Ｆａｔ－ｓｏｌｕｂｌｅ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｍｅａｔ ａｎｄ ｓｈｅｌｌ ｏｆ Ｐｉｎｃｔａｄａ ｍａｒｔｅｎｓｉｉ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ； ａｎｄ ４７ ａｎｄ ３３ ｋｉｎｄ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ ｗｅｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ａｌｋａｎｅ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｗａｓ ｔｈｅ ｍａｊｏｒ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ． Ｓｉｘ ｆａｔ－ｓｏｌｕｂｌｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ ｉｎ ｍｅａｔ ａｎｄ ｓｈｅｌｌ ｗｅｒｅ ｔｈｅ ｓａｍｅ． Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ， ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｐａｌｍｉｔｉｃ ａｃｉｄ ｉｎ ｔｈｅ ｆｌｅｓｈ ｏｆ Ｐｉｎｃｔａｄａ ｍａｒｔｅｎｓｉｉ ｗａｓ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ（５８．７８％）．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｐｉｎｃｔａｄａ ｍａｒｔｅｎｓｉｉ； amino acid； liposoluble content

馬氏珠母貝（Ｐｉｎｔａｄａ ｍａｒｔｅｎｓｉｉ），又稱合浦珠母貝，是中國南方沿海地區(qū)培育珍珠的主要貝種。我國對馬氏珠母貝資源的開發(fā)研究始于２０世紀(jì)５０年代，并于１９６５年獲得了馬氏珠母貝人工育苗的成功，自此我國海水珍珠產(chǎn)業(yè)得到迅猛發(fā)展［１，２］。

貝殼是由外套膜腺細(xì)胞分泌物經(jīng)鈣化而成，而珍珠的形成過程與此類似。目前珍珠貝中的貝肉和貝殼的成分研究，國內(nèi)外學(xué)者已經(jīng)做了大量的工作［３－５］。但對馬氏珠母貝中貝肉和貝殼的成分對比分析尚未見報道。為了闡明馬氏珠母貝貝殼與貝肉成分之間的關(guān)聯(lián)性，為探究珍珠形成機制提供理論依據(jù)以及為培育更加優(yōu)良的珍珠墊定理論基礎(chǔ)，本文采用高效液相色譜儀、氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用儀對馬氏珠母貝中貝肉和貝殼的氨基酸、脂溶性成分進(jìn)行了測定分析，并進(jìn)行了成分對比與討論。

１材料與方法

１．１試驗材料與儀器

試驗材料：馬氏珠母貝采集于湛江徐聞?wù)渲轲B(yǎng)殖基地的同一批次，貝齡２４個月，殼長６０～８０ ｍｍ，貝重３０～５０ ｇ，樣品清洗后，開殼取其肉，清洗干凈，部分冷凍備用，剩余干燥、粉碎備用；將貝殼清洗干凈，干燥、粉碎備用。

儀器：ＱＰ－２０１０Ａ氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用儀（日本島津公司），ＩＣＳ－２５００高效液相色譜儀（美國ＤＩＯＮＥＸ）。

１．２試驗方法

１．２．１馬氏珠母貝貝肉及貝殼的氨基酸水解①馬氏珠母貝貝肉氨基酸的水解：取干燥貝肉粉末２．０００ ０ ｇ，放入１５０ ｍＬ圓底燒瓶中，加入３０ ｍＬ ６ ｍｏｌ／Ｌ的ＨＣｌ溶液，在２２０Ｖ電熱套上回流１０ ｈ后冷卻到室溫，加６ ｍｏｌ／Ｌ ＮａＯＨ溶液中和，趕酸至ｐＨ＝６～７，加少量活性炭脫色直到溶液呈淺黃色，趁熱過濾，濾液定容到１００ ｍＬ，待測。②馬氏珠母貝貝殼氨基酸的水解：準(zhǔn)確稱取０．５００ ０ ｇ馬氏珠母貝貝殼粉，置于１００ ｍＬ圓底燒瓶中，加入５０ ｍＬ ６ｍｏｌ／Ｌ ＨＣｌ溶液，加熱回流８ ｈ后冷卻到室溫，加６ ｍｏｌ／Ｌ ＮａＯＨ溶液中和，趕酸至ｐＨ＝６～７，然后定容到１００ ｍＬ容量瓶中，待測。

１．２．２馬氏珠母貝貝肉及貝殼脂溶性成分提取①貝肉脂溶性成分提取：準(zhǔn)確稱取馬氏珠母貝貝肉１００．００ ｇ，水蒸氣蒸餾提取６ ｈ，取蒸餾液加入固體氯化鈉調(diào)至飽和，用乙醚萃取出揮發(fā)性成分，再用無水硫酸鈉去水，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)將乙醚蒸干，樣品置于４℃中待測。②貝殼脂溶性成分提取：準(zhǔn)確稱取貝殼粉２５０．００ ｇ置于１ ０００ ｍＬ的圓底燒瓶中，以乙醚為溶劑，６５℃回流提取８ ｈ，過濾，取濾液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中蒸發(fā)濃縮，取上層黃色半透明的油狀液體。提取后的油狀溶液置于５０ ｍＬ小燒杯中，加入０．４ ｍｏｌ／Ｌ氫氧化鉀－甲醇溶液４ ｍＬ，振蕩均勻，６５℃恒溫水浴３０ ｍｉｎ，移至２０ ｍＬ試管中，加入１０ ｍＬ超純水，靜置，待分層清晰后取下清液，加入無水硫酸鎂過夜，次日取澄清液，揮干乙醚，置于４℃中待測。

１．２．３儀器條件①采用高效液相色譜儀測定馬氏珠母貝中貝肉和貝殼的氨基酸，檢測條件：色譜柱：Ｈｙｐｅｒｓｉｌ Ｃ１８柱（２５０ｍｍ×４．０ｍｍ ｉ．ｄ．）；柱溫４０℃，進(jìn)樣量２０ μＬ；流動相 Ａ：２０ｍｍｏｌ，ｐＨ７．２乙酸－乙酸銨緩沖液＋０．０１８％三乙銨＋０．３％四氫呋喃；流動相 Ｂ：２０ ｍｍｏｌ，ｐＨ７．２乙酸－乙酸銨緩沖液∶甲醇∶乙腈＝１∶２∶２（Ｖ∶Ｖ∶Ｖ）。流動相使用前經(jīng)０．４５ μｍ微孔濾膜過濾；ＤＡＤ檢測器程序：０～２０ ｍｉｎ波長３３８ ｎｍ，Ｂｗ １０，參比波長３９０ ｎｍ，Ｂｗ ２０；２０～２５ ｍｉｎ波長２６２ｎｍ，Ｂｗ １６，參比波長３２４ ｎｍ，Ｂｗ ８。②采用ＱＰ－２０１０Ａ氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀（ＧＣ－ＭＳ）檢測馬氏珠母貝貝肉和貝殼的脂溶性成分。ＧＣ檢測條件：毛細(xì)管柱，氦氣為載氣，柱溫６０℃，進(jìn)樣溫度２５０℃，柱壓５６．６ ｋＰａ，載氣流量３ ｍＬ／ｍｉｎ。ＭＳ條件：ＥＩ離子源，電子能量７０ ｅＶ，電離溫度２００℃，界面溫度２３０℃，掃描時間：３～４０ ｍｉｎ，掃描質(zhì)量范圍：２０～５００ｕ。用氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀對其進(jìn)行分離測定，結(jié)合計算機檢索對比分離的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，應(yīng)用色譜峰面積歸一化法測定各成分的相對百分含量。

２結(jié)果與討論

２．１馬氏珠母貝氨基酸檢測結(jié)果與討論

采用高效液相色譜法，在１．２．3所述的條件下，測定馬氏貝貝肉和貝殼提取液中的氨基酸，分別檢測出１７種和１０種氨基酸，其圖譜如圖１和圖２。

采用峰面積歸一化法對氨基酸進(jìn)行定量測定，測得各種氨基酸的含量見表１。由表１可知，除因方法所限，未檢測到色氨酸外，馬氏珠母貝貝肉中必需氨基酸和非必需氨基酸種類齊全，谷氨酸含量最高，為２２１．３ ｍｇ／ｇ，總氨基酸含量達(dá)８１９．３ ｍｇ／ｇ，其中必需氨基酸（Ｌｙｓ、Ｔｈｒ、Ｐｈｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｍｅｔ）含量占總氨基酸的比例為３２．０％，呈味氨基酸（Ａｒｇ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ）含量占總氨基酸的比例為５６．２％。而馬氏珠母貝貝殼中只檢測出１０種氨基酸，總氨基酸含量為９．８ ｍｇ／ｇ，賴氨酸含量最高，為４．２ ｍｇ／ｇ，必需氨基酸含量占總氨基酸含量的比例為５２．０％，呈味氨基酸占總氨基酸含量的比例為４１．８％。相比較而言，貝肉中的氨基酸含量高于貝殼，且氨基酸種類也較貝殼豐富，這可能與貝殼的形成機理有關(guān)［６］。

根據(jù)ＦＡＯ／ＷＨＯ（１９７３）提出的的理想蛋白質(zhì)中人體必需氨基酸含量的模式，質(zhì)量較佳的蛋白質(zhì)其氨基酸組成為必需氨基酸占總氨基酸的３５％左右［７］，馬氏珠母貝貝肉的氨基酸組成基本符合標(biāo)準(zhǔn)，是一種高品質(zhì)的蛋白源。此外，水產(chǎn)的風(fēng)味主要取決于其體內(nèi)的氨基酸組成和含量，馬氏珠母貝貝肉的呈味氨基酸含量比較豐富，占總氨基酸的５６．２％，這就決定了馬氏珠母貝有其特有的海鮮風(fēng)味。因此，馬氏珠母貝的貝肉可以作為一種新型的調(diào)味料原料，而貝殼可被開發(fā)成飼料添加劑等產(chǎn)品，這些將會帶動珍珠貝的高值化加工，同時將會推動南珠產(chǎn)業(yè)鏈的發(fā)展。

２．２馬氏珠母貝脂溶性成分分析結(jié)果與討論

按１．２．3的試驗條件，對馬氏珠母貝的貝肉和貝殼脂溶性提取液進(jìn)行ＧＣ－ＭＳ分析，從馬氏珠母貝貝肉中分離出５８個化合物，貝殼中分離出５０個化合物，總離子流色譜圖見圖３和圖４。

對總離子流色譜圖中的各峰經(jīng)質(zhì)譜掃描后得到的質(zhì)譜圖，經(jīng)過質(zhì)譜計算機數(shù)據(jù)系統(tǒng)檢索（質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫ＮＩＳＴ、ＮＢＳ），按各色譜峰的質(zhì)譜裂片圖與文獻(xiàn)資料核對［８，９］，結(jié)合人工圖譜解析，分別對各色譜峰加以確認(rèn)，進(jìn)而鑒定出馬氏珠母貝的各個脂溶性組分。采用氣相色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，用面積歸一化法得到各組分的相對含量。其中馬氏珠母貝貝肉中鑒定出４７種脂溶性化合物，馬氏珠母貝貝殼中鑒定出３３種，見表２。

馬氏珠母貝貝肉和貝殼中檢測出的脂溶性成分中絕大部分是烷烴化合物，其中有６種組分是相同的，為二乙基癸氧基硼烷、二十烷、３，８－二甲基十一烷、３，７－二甲基壬烷、二十一烷、鄰苯二甲酯異丁酯。馬氏珠母貝貝肉中的脂溶性組分中，棕櫚酸的含量最高，達(dá)５８．７８％，與劉書成［１０］等研究的結(jié)果一致。棕櫚酸，又名軟脂酸或十六（烷）酸，主要用于制蠟燭、肥皂、金屬皂、潤滑脂、合成洗滌劑、軟化劑等［１１］。工業(yè)上主要用牛脂（含７０％左右的棕櫚酸）、棕櫚油（在脂肪酸組成中含４０％～５０％的棕櫚酸）或木蠟（含７０％棕櫚酸）在高溫、高壓下水解制取棕櫚酸。棕櫚酸用途很廣，也可用來制備復(fù)合相變材料［１２］。馬氏珠母貝貝肉中棕櫚酸相對含量高達(dá)５８．７８％，是一種理想的棕櫚酸提取原料。

３結(jié)論

馬氏珠母貝貝肉與貝殼中氨基酸的含量和種類相差較大，其中貝肉中含有１７種氨基酸，而貝殼中只有１０種。貝肉中總氨基酸含量達(dá)到８１９．３ ｍｇ／ｇ，而貝殼中總氨基酸含量為９．８ ｍｇ／ｇ。呈味氨基酸在貝肉的比例較高，可以考慮將其開發(fā)成一種新型的調(diào)味劑。從馬氏珠母貝貝肉中鑒定出了４７種脂溶性化合物，從貝殼中檢測并鑒定出３３種脂溶性化合物，其中有６種組分是相同的。貝肉脂溶性成分中棕櫚酸的含量最高，是一種優(yōu)良的棕櫚酸提取原料。

通過上述結(jié)果分析可知，馬氏珠母貝有巨大的開發(fā)利用價值，是海洋生物中可利用的寶貴財富。本文為馬氏珠母貝的綜合利用提供了有應(yīng)用價值的基礎(chǔ)理論數(shù)據(jù)。

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