Agilent1100型高壓液相色譜儀常見(jiàn)故障排除和維護(hù)

摘 要:Agilent1100型高壓液相色譜儀是高等院校實(shí)驗(yàn)室化學(xué)分析和物質(zhì)精密測(cè)量常用的儀器。本文主要對(duì)該種液相色譜儀在使用中出現(xiàn)的常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法詳細(xì)介紹，供從事液相色譜儀維修和使用的人員參考。

關(guān)鍵詞:高壓液相色譜儀Agilent1100維護(hù)保養(yǎng)故障排除

中圖分類號(hào):TH7文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1674-098X(2011)07(b)-0064-01

高效液相色譜法是20世紀(jì)60年代末迅速發(fā)展起來(lái)的一種新型分離技術(shù)。具有適用范圍廣、分離效率高、分析速度快、流動(dòng)相可選擇范圍寬、檢測(cè)靈敏度高、色譜柱可反復(fù)使用、流出組分容易收集等優(yōu)點(diǎn)。目前，在醫(yī)藥衛(wèi)生、食品、環(huán)保等各個(gè)領(lǐng)域已得到了廣泛的應(yīng)用[1]。其在使用過(guò)程中難免會(huì)出現(xiàn)各種各樣的問(wèn)題，并將直接影響到所測(cè)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和儀器的正常工作。操作者如果能了解故障的成因，即可清楚預(yù)防和排除這些故障，就可正確地使用儀器并最大限度地發(fā)揮儀器的性能。

常見(jiàn)問(wèn)題及其解決方法:

1 保留時(shí)間變化

保留時(shí)間縮短時(shí)，流速增加，應(yīng)檢查流速的設(shè)定;柱溫高時(shí)，應(yīng)檢查柱溫的設(shè)置;進(jìn)樣量太大時(shí)，減少樣品用量或降低樣品濃度;流動(dòng)相的組成發(fā)生了改變，比如流動(dòng)相中易揮發(fā)有機(jī)相蒸發(fā)，兩相之間互溶不好，會(huì)導(dǎo)致流動(dòng)相不均勻或某一相出現(xiàn)部分沉淀;流動(dòng)相的pH值應(yīng)保持在3～7.5范圍內(nèi)，否則會(huì)引起柱鍵合相的流失。

保留時(shí)間延長(zhǎng)時(shí)，流速減小，應(yīng)檢查流速的設(shè)定和管路是否有泄漏;柱溫低時(shí)，檢查柱溫的設(shè)置;流動(dòng)相的組成發(fā)生了改變，比如流動(dòng)相中易揮發(fā)有機(jī)相蒸發(fā)，兩相之間互溶不好，會(huì)導(dǎo)致流動(dòng)相不均勻或某一相出現(xiàn)部分沉淀;檢查流動(dòng)相的pH值是否在3～7.5范圍內(nèi)，否則會(huì)引起柱鍵合相的流失[2]。

2 柱壓的變化

壓力過(guò)高、過(guò)低和波動(dòng)都屬于柱壓?jiǎn)栴}，縮短色譜柱的使用壽命。

壓力過(guò)高的原因很多，但可以用一個(gè)字總結(jié)，即“堵”！如柱子進(jìn)口過(guò)濾芯被污染;PURGE閥過(guò)濾芯被污染;色譜柱被污染;連接管路，尤其是針座毛細(xì)管堵塞;進(jìn)樣器旋轉(zhuǎn)密封閥被堵塞;進(jìn)樣針或針座被堵塞。究竟是那一段被堵塞，可以用分段法來(lái)檢查。解決方法:(1)反沖洗。(2)阻尼器之后分段拆解檢查壓力。

壓力過(guò)低，一個(gè)字“漏”！如連接管路泄漏;溶劑或流速改變;主動(dòng)閥失靈;四元比例閥失靈;單向出口閥失靈;色譜柱失效(固定相)。但要注意如果某處堵塞也可能壓力過(guò)低，即溶劑進(jìn)口過(guò)濾芯堵塞。

3 異常峰形

異常的色譜峰指的是色譜圖中無(wú)峰或出現(xiàn)負(fù)峰、寬峰、雙峰、肩峰、峰形不對(duì)稱等情況。具體問(wèn)題具體分析，根據(jù)出現(xiàn)問(wèn)題峰的原因采取不同的解決方法。

3.1 峰拖尾(拖尾因子＞1.2)

色譜柱超載時(shí)，要減少進(jìn)樣量或稀釋樣品或使用高容量的色譜柱;色譜柱性能不佳時(shí)，更換色譜柱;死體積或柱外體積過(guò)大時(shí)，將連接點(diǎn)降至最低，并對(duì)所有連接點(diǎn)作合理的調(diào)整，盡可能采用細(xì)內(nèi)徑的連接;加入硅羥基，其作用是鈍化色譜柱，增加緩沖液的濃度，降低流動(dòng)相的pH值，鈍化樣品;出現(xiàn)峰干擾時(shí)，應(yīng)清潔樣品，調(diào)整流動(dòng)相。

3.2 前伸峰(拖尾因子＜0.9)

其原因是柱子過(guò)載或者小峰在大峰之前洗脫出來(lái)。

3.3 柱外擴(kuò)展

柱外死體積增大帶來(lái)的柱外效應(yīng)，會(huì)使得色譜峰展寬，降低分離度。解決辦法是用較短的、窄內(nèi)徑的毛細(xì)管連接進(jìn)樣器和色譜柱以及柱子和檢測(cè)器;確認(rèn)連接管的接頭都相互匹配;使用死體積小的流動(dòng)池;減少進(jìn)樣量[3]。

3.4 雙峰

進(jìn)樣量過(guò)大;樣品濃度過(guò)高;柱頭塌陷或柱床運(yùn)動(dòng);泵頭過(guò)濾芯部分堵塞;組分共流出都會(huì)造成雙峰。

3.5 峰擴(kuò)展

當(dāng)所有峰都擴(kuò)展時(shí)，其原因?yàn)橹Ы档突蛴兄?進(jìn)樣體積過(guò)大;流動(dòng)相粘度大。部分峰擴(kuò)展時(shí)，其原因?yàn)榍耙淮畏治鰳悠返牧鞒鑫?存在高分子量樣品，如蛋白質(zhì)或聚合物。

3.6 肩峰或分叉

進(jìn)樣量太大或樣品濃度過(guò)高時(shí)，要減少進(jìn)樣量或稀釋樣品;樣品溶劑太強(qiáng)時(shí)，應(yīng)使用軟弱的樣品溶劑;色譜柱性能欠佳時(shí)，應(yīng)更換色譜柱。

3.7 鬼峰

出現(xiàn)鬼峰的原因90%以上是流動(dòng)相臟，尤其是水臟。要求使用超純水，最多兩天就應(yīng)更換一次水。值得注意的是即使使用超純水凈化系統(tǒng)，也要注意經(jīng)常檢查、更換其過(guò)濾柱。

3.8 負(fù)峰

其原因是樣品吸收比流動(dòng)相吸收小;溶解樣品的溶劑通過(guò)柱子時(shí)平衡被破壞;溫度不穩(wěn)定(RID)中最為常見(jiàn)。

4 基線噪聲和漂移

4.1 基線噪聲較大和對(duì)策

對(duì)于紫外檢測(cè)器，氘燈光源打開(kāi)后要預(yù)熱30min以上，基線才能穩(wěn)定。噪聲是指與被測(cè)物無(wú)關(guān)的檢測(cè)器輸出信號(hào)的隨機(jī)擾動(dòng)變化，分短期噪聲和長(zhǎng)期噪聲兩種。氘燈用的過(guò)久，接近壽命期時(shí)(氘燈的壽命約1000h)，會(huì)使基線噪音明顯增加，應(yīng)及時(shí)更換氘燈。

4.2 基線漂移

一般說(shuō)來(lái)，機(jī)器剛啟動(dòng)時(shí)，基線容易漂移，大概要30min的平衡時(shí)間，如果在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)基線漂移，則可考慮以下所列原因及解決方法:

流通池被污染或有氣體:用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池(斷開(kāi)柱子)，如有需要，可以用1mol·L-1的硝酸沖洗。

紫外燈能量不足:更換新的紫外燈。

流動(dòng)相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成:檢查流動(dòng)相的組成，使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級(jí)的溶劑。

樣品中有強(qiáng)保留的物質(zhì)以饅頭峰樣出現(xiàn):使用保護(hù)柱，如有必要，在進(jìn)樣之前; 在分析過(guò)程中，定期用強(qiáng)溶劑沖洗柱子。

檢測(cè)器沒(méi)有設(shè)定在最大吸收波長(zhǎng)處:將波長(zhǎng)調(diào)整至最大吸收波長(zhǎng)。

流動(dòng)相的pH值沒(méi)有調(diào)節(jié)好:加適量的酸或堿調(diào)至最佳pH值，對(duì)于硅膠基質(zhì)的填料，其所能承受的流動(dòng)相約范圍為1～8。

以上從幾個(gè)方面介紹了高效液相色譜儀的常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法。但在具體的工作中常出現(xiàn)幾種故障并存的復(fù)雜情況，這就需要根據(jù)故障的癥狀認(rèn)真分析和判斷，然后利用上述方法逐一排除故障，使儀器恢復(fù)正常。完好的儀器和設(shè)備，除了正確的使用，更離不開(kāi)日常的維護(hù)和修理，只要勤思考，親動(dòng)手，肯于實(shí)踐和總結(jié)，大膽心細(xì)，就能使儀器設(shè)備的故障得到及時(shí)排除。既避免了資源的浪費(fèi)，又提高了儀器維修水平，為高校的實(shí)驗(yàn)教學(xué)和科研提供更好的服務(wù)。

參考文獻(xiàn)

[1]劉萍，侯西成，郝滿良.高效液相色譜儀使用中常見(jiàn)的問(wèn)題及解決方法[J].飼料博覽，2007(1):34-36.

[2]封躍鵬，邱赫男.液相色譜儀的日常維護(hù)和故障排除[J].分析儀器，2004(3): 54-55.

[3]張曉彤，云自厚.液相色譜檢測(cè)方法[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2003.