飲料中胭脂紅含量測定的不確定度評定

摘 要：對HPLC法測定飲料中胭脂紅含量的不確定度分析評估，以給出測定結果的不確定度。方法：依據《JJF1059—1999測量不確定度評定與表示》原理與方法，利用相關的數學模型對實驗過程的不確定度因素進行分析，計算不確定度各分量，合成不確定度。結果：飲料中胭脂紅含量相對擴展不確定度為0.01470（擴展因子k=2）。結論：從不確定度各分量計算結果可見，影響HPLC法測定飲料中胭脂紅含量的不確定度主要因素是標準溶液的純度。

關鍵詞：高效液相色譜法胭脂紅不確定度

中圖分類號：R155.5文獻標識碼：A文章編號：1674-098X(2011)06(c)-0089-01

測量不確定度在檢測、校準和合格評定中具有重要作用，中國實驗室國家認可委員會(CNAL)要求經CNAL認可的檢測實驗室必須建立測定不確定度的評定程序，并有能力對每項數值要求的測量結果進行不確定評定[1]。為了在測量數據的處理、測定結果的表達和測量結果質量評定等方面與國際接軌，根據“測量不確定度評價和表示(JJF1059 -1999)”[2]，對高效液相色譜法(HPLC)測定飲料中胭脂紅含量的不確定度的測定和評定，建立了高效液相色譜法測定方法的評定方式。

1 檢測方法

采用國標法GB/T5009.35-2003《食品中合成著色劑的測定》[3]中的第一法 高效液相色譜法測定。

所用儀器：Agilent 1200液相色譜儀；二極管陣列檢測器；柱子Agilent-XDB（C18，150mm×4.6mm，填充粒度5μm）；流動相：甲醇：乙酸銨溶液（pH=4，0.02mol/L）；梯度洗脫：甲醇：0-10min，12.0%；10-25min，30.0%；25-30min，70.0%；30-35min，95.0%；35-40min，5.0%；流速：1mL/min；檢測波長：254nm；柱溫：25℃。測量過程：吸取10.00mL試樣，加水定容至50.0mL，0.45μm膜過濾后，供HPLC測定。保留時間定性，外標單標法峰面積定量。

2 數學模型的建立

式中：CX——樣品中胭脂紅含量，mg/mL；

C標——標準使用溶液濃度，mg/mL；

S標——標準溶液的峰面積，mAU·s;

S樣——樣品溶液的峰面積，mAU·s;

V1——樣品取樣量，mL；

V2——樣品稀釋液總體積，mL；

3 識別不確定度的來源

從測量過程和數學模型分析，胭脂紅含量測定的不確定度主要來源可歸納為以下幾方面：(1)標準溶液濃度引入的不確定度；(2)標準溶液峰面積測量不確定度；(3)試樣峰面積測量不確定度；(4)樣品取樣引入的不確定度；(5)試樣定容引入的不確定度；

從測量方法看，各影響參數相對獨立，合成標準不確定度可用相對標準不確定度合成：

4 量化不確定度分量

(1)胭脂紅標準溶液引入的相對標準不確定度評定。標準溶液純度引入的不確定度評定胭脂紅標準溶液〔GBW(E) 100004a〕為國家標物中心提供，質量濃度為0.50mg/mL，純水稀釋10倍后為0.050mg/mL，即用5ml單標線移液管取5mL標準溶液稀釋到50mL。胭脂紅標準溶液引入的不確定度包括標準溶液儲備液引起的不確定度、5ml單標線移液管引起的不確定度和50mL容量瓶引起的不確定度，各分量相對獨立，因此胭脂紅標準溶液引入的相對標準不確定度可由標準溶液儲備液引起的相對標準不確定度、5ml單標線移液管引起的相對標準不確定度和50mL容量瓶引起的相對標準不確定度合成得到。

因各影響參數相對獨立，所以：

(2)由樣品定容引起的相對標準不確定度評定。由樣品定容引起的相對標準不確定度與標準儲備液稀釋引起的相對標準不確定度相同，即50mLA級單標線容量瓶引起的相對標準不確定度為：

(3)合成標準不確定度及相對擴展不確定度的評定

=0.00735

取擴展因子k=2(95%置信度)，則飲料中胭脂紅含量測定的相對擴展不確定度為：=0.01470

(4)結果報告。測定結果：=0.0283mg/mL

則由實驗數據平均值計算飲料中胭脂紅含量的最佳估計值為：mg/mL

其擴展不確定度為：

=0.0004mg/mL

故飲料中胭脂紅含量測定結果為：

mg/mL，K=2。

5 討論

將上述5項參數的相對標準不確定度分量值歸納于表2

由各個相對標準不確定度分量值得出影響結果的主要不確定度分量是標準溶液濃度（C標），因此在樣品檢測過程中應嚴格控制采購的標準溶液的純度以減小測定結果的不確定度。同時標準峰S標和試樣峰S樣的值，表明實驗室的液相色譜儀重現性、穩定性較好。

參考文獻

[1]中國實驗室國家認可委員會．實驗室認可與管理基礎知識[M].北京:中國計量出版社.2003:15．

[2]JJF1059-1999.測定不確定度評定與表示[S]．