生豬組合免疫技術(shù)的建立與推廣研究

摘 要:為了有效提高我市生豬免疫合格水平，防止生豬疫病發(fā)生和擴(kuò)散，2010年9月-11月，防城港市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心在本市1個(gè)規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)進(jìn)行生豬組合免疫技術(shù)對(duì)比試驗(yàn)。探討豬瘟、豬口蹄疫和豬藍(lán)耳病這三種疫苗的進(jìn)行組合接種的免疫效果，觀察是否產(chǎn)生相互干擾。結(jié)果表明，合理進(jìn)行組合免疫接種能夠有效提高免疫質(zhì)量，減少疫苗浪費(fèi)，并減輕基層動(dòng)物疫病防治員的工作量，從而實(shí)現(xiàn)節(jié)省人力物力的目的，值得推廣。

關(guān)鍵詞:生豬免疫組合免疫技術(shù)推廣

中圖分類號(hào):S828文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1674-098X(2011)08(b)-0124-02

生豬免疫力的產(chǎn)生是一個(gè)非常復(fù)雜的生理過(guò)程，受體質(zhì)狀態(tài)、外界環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)水平、疫苗等多種因素的影響，做好免疫后的管理工作，對(duì)于形成堅(jiān)強(qiáng)免疫力非常重要。豬瘟、口蹄疫和藍(lán)耳病均為國(guó)家強(qiáng)制免疫的病種，推行已有時(shí)日。給生豬按科學(xué)的免疫程序進(jìn)行免疫接種是預(yù)防生豬傳染病最經(jīng)濟(jì)、最方便、最有效的方法之一。但是，目前國(guó)內(nèi)很多地區(qū)對(duì)這3種疾病疫苗的接種水平還不完善，主要存在這免疫程序混亂、抗體水平不高等問(wèn)題，亟待提高。本研究基于此展開(kāi)，旨在找到豬瘟、豬口蹄疫和藍(lán)耳病這3中疫苗合理的組合免疫程序，從而有效提升免疫水平，科學(xué)指導(dǎo)防疫工作的完成，進(jìn)而達(dá)到控制生豬疫病發(fā)生、流行的目的[1]。

1 試劑和材料

1.1 試驗(yàn)器材

注射器、采血器、耳標(biāo)、耳標(biāo)鉗以及試驗(yàn)室生豬免疫其他相關(guān)儀器。

1.2 試驗(yàn)試劑

0.9%的滅菌生理鹽水;

接種疫苗:豬瘟疫苗(兔源)脾淋苗，豬口蹄疫O型滅活疫苗(Ⅱ)，豬藍(lán)耳病疫苗(豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗)。

診斷試劑:豬瘟、口蹄疫正向間接血凝診斷液及陰陽(yáng)性血清;PRRS抗體ELISA檢測(cè)試劑盒。

1.3 生豬來(lái)源

選擇我市1個(gè)規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)作為示范場(chǎng)，從選定的規(guī)模場(chǎng)中選定3欄試驗(yàn)豬和3欄對(duì)照豬進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)。納入標(biāo)準(zhǔn)如下:1)健康仔豬，2)品種無(wú)差異，3)體重為25kg左右，4)日齡50日左右，5)未經(jīng)免疫。

2 試驗(yàn)方案

2.1 分組方法

選定的120頭試驗(yàn)豬隨機(jī)分為2組，每組60頭(每欄20頭)，分別設(shè)為對(duì)照組和試驗(yàn)組。經(jīng)分析，兩組基本情況無(wú)顯著差異(P>0.05)。

2.2 注射和試驗(yàn)方法

對(duì)照組的豬采用三針同時(shí)分點(diǎn)進(jìn)行疫苗接種;試驗(yàn)組豬采用最優(yōu)組合免疫方法，即先接種豬瘟疫苗，一周后再同時(shí)分點(diǎn)接種豬口蹄疫和藍(lán)耳病疫苗。

免疫后48h內(nèi)逐頭觀察和記錄各組豬的免疫反應(yīng)情況，注重觀察各豬有無(wú)精神沉郁、減食、抽搐等免疫副反應(yīng)情況。并于注射完最后一針疫苗后14天、21天、28天、35天分別采集對(duì)照組和試驗(yàn)組的豬血，分離血清后進(jìn)行豬瘟、豬O型口蹄疫及藍(lán)耳病抗體檢測(cè)。

2.3 試驗(yàn)時(shí)間

試驗(yàn)從2010年9月1日至2010年11月30日。

2.4 指標(biāo)的觀察與記錄

豬瘟抗體水平的檢測(cè)使用正向間接血凝試驗(yàn)的方法，具體操作如下:即按照NY／SY156—2000，并進(jìn)行改進(jìn)。免疫合格判定標(biāo)準(zhǔn)如下:即抗體效價(jià)不小于1:32，就判斷被檢血清豬瘟抗體合格;如果抗體效價(jià)小于1:32，則判斷被檢血清豬瘟抗體不合格。

豬O型口蹄疫抗體水平采用正向間接血凝試驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)，具體操作遵照試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。判定標(biāo)準(zhǔn)如下:如果豬血清抗體滴度不小于1:32，則認(rèn)為被檢血清O型口蹄疫抗體合格;如果抗體滴度小于1:32，則認(rèn)為被檢血清0型口蹄疫抗體不合格。

藍(lán)耳病抗體水平采用ELISA方法進(jìn)行檢測(cè)，具體操作按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

2.5 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與處理

運(yùn)用Excel軟件的統(tǒng)計(jì)學(xué)功能對(duì)抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析。豬瘟和O型口蹄疫抗體效價(jià)平均值采用幾何平均法計(jì)算得出。

3 結(jié)果統(tǒng)計(jì)

3.1 免疫副反應(yīng)情況統(tǒng)計(jì)(如表1）

實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組樣本數(shù)一致，兩組接受免疫后副反應(yīng)無(wú)顯著差異(P>0.05)，表明實(shí)驗(yàn)組免疫方法不會(huì)增加免疫副反應(yīng)。

3.2 免疫水平監(jiān)測(cè)結(jié)果(如表2)

通過(guò)表2可以看出，對(duì)照組豬瘟疫苗與其他兩種疫苗同時(shí)免疫，豬瘟抗體水平峰值產(chǎn)生推遲到免疫后35d。與之相比較，實(shí)驗(yàn)組提前免疫豬瘟疫苗，在免疫后21天豬瘟抗體水平就能夠達(dá)到峰值。根據(jù)抗體生成特點(diǎn)，當(dāng)抗體水平以幾何級(jí)增長(zhǎng)速度達(dá)到峰值后，將會(huì)有所回落并進(jìn)入到平臺(tái)期。所以實(shí)驗(yàn)中抗體水平回落屬于正常現(xiàn)象。此外，對(duì)照組口蹄疫與藍(lán)耳病的抗體水平比實(shí)驗(yàn)組低，可以推斷豬瘟對(duì)口蹄疫與藍(lán)耳病抗體的生成產(chǎn)生干擾。

4 小結(jié)與討論

4.1 針對(duì)統(tǒng)計(jì)結(jié)果的討論

豬瘟、豬O型口蹄疫和豬高致病性藍(lán)耳病三種疫苗最佳的免疫接種方法一直是研究討論的熱點(diǎn)。針對(duì)基層免疫工作中存在一豬多針、費(fèi)時(shí)費(fèi)力，人工成本高、免疫保護(hù)率不高的問(wèn)題，本研究選擇了兩種免疫方法進(jìn)行比較研究。實(shí)驗(yàn)組豬群采用先接種豬瘟疫苗，一周后再同時(shí)分點(diǎn)接種豬口蹄疫和藍(lán)耳病疫苗的組合免疫方法，對(duì)照組豬群采用三針同時(shí)分點(diǎn)接種的免疫方法。隨后運(yùn)用血清學(xué)試驗(yàn)跟蹤檢測(cè)豬群免疫抗體，最終通過(guò)統(tǒng)計(jì)分析抗體效價(jià)比較得出最佳的免疫方法。

對(duì)照組豬瘟疫苗、口蹄疫、藍(lán)耳病均能產(chǎn)生有效免疫抗體水平，但是豬瘟的有效抗體水平產(chǎn)生的時(shí)間被延長(zhǎng)或推遲，而口蹄疫、豬藍(lán)耳病抗體的產(chǎn)生也會(huì)受到豬瘟干擾。與對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組為較優(yōu)的組合免疫程序。國(guó)內(nèi)研究也多次證實(shí)口蹄疫和豬藍(lán)耳病疫苗具有積極地協(xié)同作用，另外提前免疫豬瘟也避免了與其他兩種疫苗互相干擾。

因此，作為基層防疫工作者，要根據(jù)實(shí)際情況選擇運(yùn)用不同免疫方法。建議條件較好的養(yǎng)殖場(chǎng)采用先接種豬瘟疫苗，一周后接種豬口蹄疫和藍(lán)耳病疫苗的組合免疫程序;農(nóng)村少量散養(yǎng)生豬和無(wú)疫源地區(qū)可酌情采取三種疫苗同時(shí)分點(diǎn)注射，以節(jié)省防疫工作當(dāng)中的財(cái)力、人力、物力。

4.2 接種時(shí)注意事項(xiàng)的探討

免疫注射前需要先把注射器各個(gè)部位進(jìn)行調(diào)節(jié)，確保完好，不能太松或太緊。需要對(duì)針頭進(jìn)行檢查，不可以采用彎曲、松動(dòng)或者直徑太大的，以防止藥液損失。使用過(guò)程中，需要按照疫苗標(biāo)簽(說(shuō)明書)要求，對(duì)疫苗進(jìn)行稀釋、搖勻，并在瓶蓋上固定1顆專用針頭進(jìn)行吸藥。注射過(guò)程中，免疫的劑量需要根據(jù)疫苗的種類適當(dāng)調(diào)整，確保注射劑量足夠。注射技術(shù)要熟練，防止打“飛針”，嚴(yán)格遵守1生豬1顆針頭的原則，杜絕1顆針頭注射多頭生豬的現(xiàn)象。注射過(guò)程中還要時(shí)刻注意人畜安全[2]。

另外，接種前需要及時(shí)了解當(dāng)?shù)貍魅静×餍星闆r。如果有傳染病，接種前要確保生豬的健康，根據(jù)規(guī)定進(jìn)行免疫。對(duì)于各種疫苗的用量和用法，必須嚴(yán)格按照疫苗的說(shuō)明書，絕對(duì)不能為了方便，將幾種疫苗隨意混合后注射。對(duì)于用過(guò)的消毒棉球、注射器內(nèi)剩余的藥液，應(yīng)收集到專用器具內(nèi)，并和啟封未用完的疫苗以及空瓶一起銷毀，防止隨意丟棄，避免疫苗污染導(dǎo)致傳染病的發(fā)生。接種后的生豬，個(gè)別會(huì)出現(xiàn)發(fā)熱等免疫反應(yīng)，此時(shí)需要加強(qiáng)護(hù)理，防止不良后果的發(fā)生。一旦出現(xiàn)免疫副反應(yīng)反應(yīng)，應(yīng)按照癥狀現(xiàn)象，積極采取相應(yīng)的方法。

4.3 生豬免疫推廣的討論

生豬組合免疫技術(shù)的建立與推廣是防控家畜重大疾病的迫切需要，是加快邊疆地區(qū)畜牧業(yè)健康發(fā)展的需要。我市毗鄰越南，邊境線長(zhǎng)，口岸和非口岸通道眾多，是我國(guó)走向東南亞的門戶、窗口和最便捷的出海大通道。邊民交通便利，來(lái)往頻繁，人員、物資及牲畜出入境流動(dòng)量很大，對(duì)我邊境地區(qū)的動(dòng)物防疫工作帶來(lái)了不小的影響。一旦我市動(dòng)物疫病免疫抗體水平降低，將會(huì)加大動(dòng)物染病風(fēng)險(xiǎn)，極易發(fā)生重大動(dòng)物疫病[3]。所以為了提高我市動(dòng)物疫病免疫合格率，防止重大動(dòng)物疫病在我市發(fā)生，選擇適合的免疫程序是當(dāng)前動(dòng)物疫病防控工作的迫切需要。

生豬組合免疫技術(shù)的建立與推廣，是防城港市防疫工作有效開(kāi)展的需要，是對(duì)基層免疫工作的規(guī)范。目前防城港市防疫工作的開(kāi)展，是由防城港市各級(jí)重大動(dòng)物疫病防治指揮部統(tǒng)一組織，市、各縣(市、區(qū))畜牧獸醫(yī)主管部門牽頭實(shí)施，其他成員單位積極配合開(kāi)展，同時(shí)在基層工作第一線還活躍著一批村級(jí)動(dòng)物防疫員。因此，整個(gè)隊(duì)伍防疫工作相關(guān)技能的規(guī)范和掌握與否，直接關(guān)系到全市重大動(dòng)物疫病防疫工作的好壞。這是動(dòng)物防疫體系健全和逐步完善的要求，也是動(dòng)物防疫工作走上正規(guī)管理的要求。

生豬組合免疫技術(shù)的建立與推廣，是確保免疫工作合理有效的重要舉措。豬瘟和口蹄疫被作為強(qiáng)制免疫病種，在廣大農(nóng)村一直采取兩種疫苗同時(shí)注射，2007年國(guó)家又將藍(lán)耳病納入強(qiáng)制免疫病種，三種疫苗的免疫程序混亂，抗體水平達(dá)不到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，疫情形勢(shì)嚴(yán)峻[4]。一直以來(lái)我市重大動(dòng)物疫病的免疫率維持在較高水平，但免疫合格率波動(dòng)較大，特別是生豬口蹄疫、豬瘟、豬藍(lán)耳病等重大動(dòng)物疫病的免疫合格率都偏低，動(dòng)物抗病能力得不到有力保障。

本文通過(guò)試驗(yàn)，聯(lián)系實(shí)際尋找適合如今基層免疫工作中豬瘟、豬口蹄疫和豬藍(lán)耳病這三種疫苗的聯(lián)合注射的免疫方法，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)豬瘟、豬口蹄疫和高致病性豬藍(lán)耳病疫情的控制，減少其發(fā)生，在全面提高免疫質(zhì)量的前提下，減少疫苗浪費(fèi)，減輕基層獸醫(yī)工作量，減少防疫投入人力物力，促進(jìn)動(dòng)物防疫工作開(kāi)展，科學(xué)指導(dǎo)防疫工作，這一方法值得推廣。

參考文獻(xiàn)

[1]石偉明，黃玉燕.豬瘟免疫抗體的檢測(cè)與分析[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫，2010(1).

[2]謝強(qiáng)明，張英.長(zhǎng)沙市2008年健康人群乙型肝炎免疫成功率和免疫水平分析[J].中國(guó)初級(jí)衛(wèi)生保健，2010(2).

[3]吳悌霖.福建省三明地區(qū)種豬群豬瘟免疫抗體監(jiān)測(cè)與分析[J].養(yǎng)豬，2010(2).

[4]沈聯(lián)華.動(dòng)物免疫失敗的因素及應(yīng)對(duì)措施[J].畜禽業(yè)，2010(4).