田基黃的藥理與質量控制研究進展

[摘要] 田基黃作為傳統中藥在臨床上作為抗肝類藥物使用已久，其具有廣泛的藥理作用，有待于更深入的研究和探討，使田基黃能更多地應用于臨床。本文通過查閱近半年來國內外相關文獻，結合田基黃的藥理及臨床應用、含量測定，指紋圖譜的研究概況進行歸納并綜述。

[關鍵詞] 田基黃；藥理作用；質量控制

[中圖分類號] R285 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701（2011）34-31-03

The Progression of Pharmacological Effect and Quality Control of Hypericum Japonicum

CHEN Xia

Department of Pharmacy，Zhuji Red Cross Hospital in Zhejiang Province，Zhuji 311800，China

[Abstract] Hypericum japonicum as traditional Chinese medicine having extensively pharmacological effect has been used in clinical practice for a long time and more researches are required to expand its clinical application. The pharmacology and clinical application，assaying and finger print of hypericum japonicum combined with the foreign and domestic literatures were reviewed and summarized.

[Key words] Hypericum japonicum；Pharmacological effect；Quality control

田基黃始載于我國清代何克諫所撰寫的《生草藥性備要》，民間別名有小元寶草、雀舌草、七層塔等，為藤黃科金絲桃屬植物地耳草（Hypericum japonicum Thunb）的干燥全草。據《中國植物志》記載其原植物地耳草為一年生纖細草本，廣泛分布于遼寧、山東至長江以南各省區，生田邊、溝邊、草地以及撩荒地上。其味甘、微苦、性涼，歸肝、膽、大腸經，具有清熱利濕，解毒、散瘀、消腫、止痛等功效，中醫臨床上常用于治療肝炎、急性黃疸型肝炎、腸炎、急性腎炎、急性結膜炎以及毒蛇咬傷、跌打損傷等[1]。本文現對近年來田基黃的藥理及臨床應用、含量測定、指紋圖譜的研究概況總結如下。

1 藥理作用

1.1 保肝作用

林久茂等[2]以四氯化碳（CCl4）制備小鼠急性肝損傷的模型，并以田基黃水煎劑灌胃，通過監測小鼠血清中的丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉移酶（AST）、超氧化物歧化酶（SOD）活力以及一氧化氮（NO）、腫瘤壞死因子（TNF）-α、白介素（IL）-6的含量，觀察肝組織的病理損傷程度。結果表明不同濃度的田基黃能不同程度地降低CCl4所致異常升高的小鼠血清中的ALT、AST、NO、TNF-α和IL-6含量，升高SOD活性，并對細胞因子介導的免疫炎癥反應性損傷具有保護作用，可保護和修復肝細胞病理學損傷。提示田基黃對CCl4所致小鼠肝損傷具有防治作用，其作用機制可能與降低轉氨酶、提高抗氧化能力和抑制NO、TNF-α和IL-6過量生成等有關。

1.2 抑癌作用

肖大江等[3]應用SRB法檢測田基黃對CNE22細胞生長的抑制作用，PI分析細胞周期的變化，AnnexinV檢測細胞凋亡的發生。結果顯示田基黃抑制CNE22細胞的生長，引起細胞死亡；田基黃誘導CNE22細胞發生凋亡和壞死；田基黃作用人鼻咽癌細胞后S期細胞的比例增加，G2/M期細胞的比例減少。因此，一定濃度的田基黃可明顯抑制人鼻咽癌細胞CNE22生長，并誘導其凋亡，其機制可能與阻滯細胞停留在S期有關。

1.3 抗病毒作用

劉妮等[4]建立體內抗病毒實驗，以甲3型流感病毒滴鼻感染小鼠，觀察田基黃對肺指數、病毒致小鼠死亡率的影響。結果表明口服10g/（kg·d）田基黃可明顯抑制甲3型流感病毒引起的小鼠肺組織炎性實變，降低甲3型流感病毒感染小鼠的死亡率。因此，田基黃是一種治療流行性感冒的有效藥物，并對病毒性感冒的病因治療具有良好的前景，安全有效，值得進一步開發。許潘健等[5]將田基黃與等量的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）或乙型肝炎病毒核心抗原（HBeAg）陽性血清混勻，使混合后的濃度分別為6g/L、12g/L、24g/L、48g/L和96g/L，孵育8h、16h。然后采用ELISA法測定HBsAg或HBeAg的滴度，觀察其對HBsAg或HBeAg的抑制作用。結果表明96g/L和48g/L濃度的田基黃在作用16h后對HBsAg或HBeAg具有明顯的抑制作用（P＜0.01），因此田基黃在體外也有較強的抗HBsAg和HBeAg作用。

1.4 抗痛風作用

夏隆江等[6]觀察田基黃提取物對尿酸（MSU）所致大鼠足爪腫脹的影響、對MSU誘導家兔急性關節炎的影響、對次黃嘌呤所致小鼠高尿酸血癥的影響、對小鼠扭體反應的影響及小鼠耳廓腫脹法觀察田基黃提取物品抗炎、鎮痛作用。結果表明田基黃對MSU所致大鼠足爪腫脹有較好的抑制作用，能減輕MSU所致家兔急性關節炎炎癥，降低高尿酸血癥模型小鼠血尿酸值，有一定的抗炎作用，但鎮痛作用較弱。說明田基黃具有抗痛風作用，值得進一步研究開發。

1.5 抗菌作用

虞金寶等[7]采用液體稀釋法，將田基黃浸膏及提取物與幽門螺桿菌共同培養，通過比較細菌生長情況而測定田基黃浸膏及提取物的MIC和MBC。結果發現田基黃浸膏及提取物對幽門螺桿菌具有明顯抑殺作用。

1.6 其他藥理作用

傳統中藥田基黃除作為保肝藥物外，還有治療高脂血癥、腎炎的作用。陳厚平等[8]在研究以田基黃為主的復方田基黃茶治療高脂血癥的臨床療效時發現其具有治療高血脂癥的作用。他將96例高脂血癥患者隨機分為治療組56例，其余40例采用脂必妥片對照治療，共治療8周，觀察療效。結果表明，治療組的有效率為91%，與對照組有效率72.5%比較，差異有顯著性意義（P＜0.01）。王邦鼎[9]用自制地耳草湯（地耳草、鴨跖草、益母草、白茅根各30g，白僵蠶、蟬蛻各12g，石韋、車前草各15g）治療急性腎炎62例，取得了良好的效果。

2 質量控制

2.1 含量測定

隨著對田基黃活性成分研究的不斷深入，用于鑒別和測定其含量的方法也有了較大的提高。唐丹等[10]采用分光光度法測定田基黃中總黃酮的含量，他利用黃酮類化合物母核上的酚羥基能與鋁離子絡合而顯色，采用分光光度法，以槲皮苷為對照品，以10%三氯化鋁醇溶液為顯色劑，在波長273nm處對樣品中的總黃酮進行含量測定。結果表明總黃酮在（3.20～16.0）μg/mL范圍內線性良好（r=0.9999），該法的平均加樣回收率為98.25%，RSD為2.21%（n=9），該法穩定性較好，24.0h內吸光度基本無變化，RSD為0.40%（n=6）。實驗證明該方法穩定、簡便、快速，適用于田基黃藥材中總黃酮的含量測定。Juan Su等[11]使用HPLC-DAD-ESI/MS法同時測定田基黃藥材中的五種成分，分別為Taxfolin-7-O-α-l-rhamnoside、異槲皮苷、槲皮苷、槲皮素-7-O-α-l-鼠李糖苷和槲皮素。此分析采用ZORBAX SB-C18色譜柱，流動相為乙腈：0.5%甲酸水溶液，其線性及回收率均符合規定，最低檢測限為0.5～7.5ng，含量范圍為（2.0～34.18）mg/L。王欣欣等[12]采用反相高效液相色譜法測定田基黃中槲皮素的含量，使用迪馬（鉆石）C18色譜柱，以甲醇-0.06%磷酸（52∶48）為流動相，流速為1.0mL/min，檢測波長為360nm。結果表明槲皮素的線性范圍是（7～42）μg/mL（r=0.9999），槲皮素平均回收率為100.3%，RSD=2.1%。該方法簡便、準確，可用于田基黃中槲皮素的含量測定。熊麗等[13]使用高效液相色譜法測定田基黃中槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖苷的含量，首次建立了田基黃中槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖苷的含量測定的HPLC法，并測定了16個不同購買地的田基黃中槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖苷的含量，平均回收率為99.1%，該方法簡便、快速、精密度好，為田基黃藥材質量控制和綜合開發利用提供了科學依據。秦盛瑩等[14]首次建立采用RP-HPLC測定田基黃中異巴西紅厚殼素的含量的方法，本研究采用正交試驗設計優化異巴西紅厚殼素的提取方法，選擇提取溶劑用量、提取次數、提取時間3個因素，每個因素3個水平，按L9（34）正交表安排試驗，以異巴西紅厚殼素的含量為考察指標對正交試驗的結果進行直觀和方差分析，最后選定最佳提取方法為12倍量提取溶劑，回流提取2次，1h/次。該分析線性范圍為（5.01～80.2）μg/mL（r=0.9999），平均回收率為97.5%（n=9），該方法簡便、快速、準確、重復性好，可以為田基黃藥材的質量控制提供依據。而熊麗等[15]改進了異巴西紅厚殼素的質量分析方法，并通過實驗優選了提取方式：采用80%乙醇超聲提取兩次，并同時測定了十六個產地藥材的含量，在其測定的不同產地中，以江蘇南通購買的藥材含量最高。在同時測定有效成分含量方面，熊麗等[16]還使用RP-HPLC同時測定田基黃藥材中異槲皮苷、槲皮苷和槲皮素的含量。其采用梯度洗脫的方式進行測定，其中異槲皮苷、槲皮苷和槲皮素濃度分別在（9.90～330）μg/mL（r=0.9996，n=6）、（19.2～640）μg/mL（r=0.9998，n=6）和（2.16～72.0）μg/mL（r=0.9997，n=6）范圍內與峰面積線性關系良好；平均加樣回收率（n=9）分別為97.2%，99.1%，98.9%，為田基黃藥材質量控制提供了方法。

2.2 指紋圖譜

蔡澤凡等[17]利用高效液相色譜建立了田基黃的色譜指紋圖譜。根據色譜指紋圖譜各個譜峰的相對保留時間值α和相對面積Sr對色譜指紋圖譜進行分析對比研究，建立了一個快速、簡易鑒別田基黃樣品的色譜指紋圖譜分析方法。他們在實驗中比較了田基黃與遍地金兩種藥材的指紋圖譜差異，并通過相似度判定二者的區別，使之成為一種鑒別田基黃的行之有效的方法。王永剛等[18]收集了30多個不同產地的田基黃藥材樣品，經過色譜條件的選擇和優化，構建了田基黃藥材HPLC指紋圖譜，獲得了其指紋特征，利用指紋特征考察了不同來源的田基黃藥材間的質量差異，并論證不同生長期的藥材所含的次生代謝產物含量有差異，并在指紋圖譜上有所反映。因此規定藥材的長度可以間接地固定藥材生長期。并建議在挑選田基黃注射液投料藥材時，該藥材指紋圖譜與參照指紋圖譜（或共有模式）的相似度大于0.92。李仕海等[19]用RP-HPLC法梯度洗脫，測定田基黃及其混偽品細葉金絲桃的指紋圖譜，并作相似度比較分析。結果表明田基黃不同樣品指紋圖譜相似度較好，而田基黃與細葉金絲桃的指紋圖譜具有一定差異。該HPLC指紋圖譜具有重現性好、特征性強、方法簡便等特點，可用于田基黃藥材的鑒別。Wei-Na Gao等[20]采用HPLC-PAD-ESI-MS技術對十個不同產地的田基黃藥材進行指紋圖譜測定，并將色譜指紋圖譜中的20個共有峰進行歸納鑒定，分別為黃酮類及其苷類、間苯三酚類、黃烷醇類、口山酮類、色酮等。該法將指紋圖譜與質量分析相組合，為田基黃的質量控制提供了依據。

3 結語與展望

田基黃是我國傳統中藥，并作為抗肝炎藥物使用已久，現有各種制劑生產，如田基黃注射液、田基黃軟膠囊、田基黃顆粒等。近年來許多學者對其進行了各方面的研究，在對其藥理作用的研究中，發現其除了具有傳統的保肝作用，還具有抑癌、抗痛風、抗病毒、抗菌等多種藥理作用，但對于具有這些藥理活性的作用機理還未完全闡明。在含量分析方面，主要是以槲皮素為主的各式槲皮苷為含量測定的主要對象，鑒于目前2010版《中華人民共和國藥典》中，沒有收錄田基黃含量測定內容，為使其質量標準更加完善，有必要為原藥材建立含量測定指標。同時對于不同產地的田基黃質量評價有待于進一步研究。另外，在質量控制方面，能否運用新的技術和手段建立其較為完善的質量評價體系，也有待深入研究。

[參考文獻]

[1] 肖倍根. 新編中藥志（第3冊）[M]. 北京：化學工業出版社，2002：90-94.

[2] 林久茂，趙錦燕，周建衡，等. 田基黃對小鼠急性肝損傷的防治作用[J].時珍國醫國藥，2008，19（3）：550-551.

[3] 肖大江，朱國臣，王曉嵐，等. 田基黃對人鼻咽癌細胞CNE22生長和凋亡的影響[J]. 中國耳鼻咽喉顱底外科雜志，2007，13（5）：337-339.

[4] 劉妮，胡溪柳，孟以蓉，等. 田基黃體內抗甲3型流感病毒作用研究[J]. 中藥材，2008，31（7）：1022-1024.

[5] 許潘健，龐璐，韓余健. 田基黃體外HBsAg和HBeAg作用的研究[J]. 衛生職業教育，2009.27（4）：124-125.

[6] 夏隆江，余曉紅. 田基黃抗痛風的實驗研究[J]. 中國藥房，2007，18（24）：1858-1861.

[7] 虞金寶，聶榮慶，吳東風，等. 中藥田基黃抗幽門螺桿菌的實驗研究[J]. 中華中醫藥雜志，2009，24（6）：821-823.

[8] 陳厚平，肖新成. 田基黃茶治療高脂血癥的療效觀察[J]. 中國醫藥導報，2006，3（30）：92.

[9] 王邦鼎. 地耳草湯治療急性腎炎62例[J]. 實用中醫藥雜志，2004，20（9）：493.

[10] 唐丹，張琳，田景奎. 分光光度法測定田基黃中總黃酮的含量[J]. 中國現代應用藥學雜志，2007，24（7）：620-622.

[11] Juan Su，Peng Fu，Yunheng Shen，et al. Simultaneous analysis of flavonoids from Hypericum japonicum Thunb.ex Murray（Hypericaceae）by HPLC-DAD-ESI/MS[J]. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis，2008，46（2）：342-348.

[12] 王欣欣，張永萍，馮昀熠，等. HPLC法測定田基黃藥材槲皮素的含量[J]. 貴陽中醫學院學報，2009，31（3）：18-20.

[13] 熊麗，陳曉輝，高詢，等. HPLC法測定田基黃槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖苷的含量[J]. 沈陽藥科大學學報，2008，25（10）：806-807.

[14] 秦盛瑩，陳曉輝，米丹，等. RP-HPLC法測定田基黃中異巴西紅厚殼素的含量[J]. 藥物分析雜志，2007，27（5）：718-720.

[15] 熊麗，梁建，陳曉輝，等. 高效液相色譜法測定田基黃中異巴西紅厚殼素的含量[J]. 中國實用醫藥，2008，3（19）：8-9.

[16] 熊麗，陳曉輝，梁建，等. RP-HPLC同時測定田基黃藥材中異槲皮苷、槲皮苷和槲皮素的含量[J].藥物分析雜志，2008，28（10）：1619-1622.

[17] 蔡澤凡，張峰，朱學峰. 指紋圖譜應用于田基黃的鑒定研究[J]. 計算技術與自動化，2006，25（1）：104-107.

[18] 王永剛，楊立偉，蘇薇薇. 田基黃藥材指紋圖譜研究[J]. 南方醫科大學學報，2006，26（7）：1001-1002.

[19] 李仕海，劉訓紅，韓樂，等. 地耳草的HPLC指紋譜鑒定研究[J]. 新疆中醫藥，2008，26（3）：72-73.

[20] Wei-Na Gao，Jian-Guang Luo，Ling-Yi Kong. Quality evaluation of Hypericum japomicum by using high-performance liquid chromatography coupled with photodiode array detector and electrospray ionization tandem mass spectrometry[J]. Biomedical Chromatography，2009， 23（9）：1022-1030.

（收稿日期：2011-09-06）