柴胡注射液對梗阻性黃疸大鼠肝損傷的保護作用

[摘要] 目的 探討柴胡注射液對梗阻性黃疸大鼠肝損傷的保護作用。方法 SD大鼠60只隨機分為3組：假手術組、梗阻性黃疸模型組、柴胡注射液干預組；后兩組采用膽總管結扎法制作梗阻性黃疸模型，術后第1天起分別給藥，并于術后第7、14天分別測定不同組別大鼠血清ALT、AST、TBIL、DBIL等指標。結果 柴胡注射液干預組術后第7、14天大鼠血清ALT、AST活性及TBIL、DBIL含量明顯下降，與梗阻性黃疸模型組比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。結論 柴胡注射液對梗阻性黃疸大鼠肝損傷具有一定的保護作用。

[關鍵詞] 柴胡注射液；梗阻性黃疸；肝損傷

[中圖分類號] R285.5 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701（2011）23-12-02

Protective Effects of Bupleurum Injection on Hepatic Injury Induced by Obstructive Jaundice in Rats

JIN Jianwei1 LIU Zhong2

1.Department of Surgery，Xidian Town Hospital of Ninghai County of Ningbo City in Zhejiang Province，Ninghai 315132，China；2.Department of General Surgery，Affiliated Hospital of Ningbo University，Zhejiang Province，Ningbo 315020，China

[Abstract] Objective To explore the protective effects of Bupleurum Injection on hepatic injury induced by obstructive jaundice in rats. Methods Sixty rats were divided into 3 groups，the sham operation group，the bile duct ligation group and Bupleurum Injection group. Obstructive jaundice were made in rats by double-ligating bile duct in the bile duct ligation group and Bupleurum Injection group. Three groups of rats were sacrificed after 7 and 14 days of postoperation respectively. The levels of serum ALT，AST，TBIL and DBIL were tested. Results The group of Bupleurum Injection could decreased the levels of serum ALT，AST，TBIL and DBIL. Compared with model control group，there was significant difference （P＜0.05）. Conclusion Bupleurum Injection has protective effects on hepatic injury induced by obstructive jaundice in rats.

[Key words] Bupleurum Injection；Obstructive jaundice；Hepatic injury

梗阻性黃疸（obstructive jaundice，OJ）是指由腫瘤、結石、炎癥等多種原因導致的肝內外膽管機械性梗阻所致的黃疸，肝膽組織受損是其主要病理學表現之一[1]。2009年1月～2010年10月我們用膽總管結扎法制造大鼠梗阻性黃疸病理模型，探討柴胡注射液對梗阻性黃疸大鼠肝損傷的保護作用，為開發柴胡注射液臨床新用途提供基礎試驗資料依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1#8195;研究對象 SD大鼠，雌雄各半，體重（220±20）g，由浙江大學醫學動物試驗中心提供，動物合格證號：SCXK（浙）2007-0005。

1.1.2#8195;藥物與試劑 柴胡注射液（神威藥業有限公司）；丙氨酸氨基轉氨酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉氨酶（AST）、總膽紅素（TBIL）、直接膽紅素（DBIL）試劑盒（南京建成生物工程研究所）。

1.2#8195;方法

1.2.1 動物分組[2] 取SD大鼠60只，適應性喂養3d后隨機分為3組，即假手術組、梗阻性黃疸模型組、柴胡注射液干預組，每組20只。造模手術后再將各組動物隨機分為第7、14天兩個時相組，每個時相組10只。

1.2.2 動物模型建立與干預[3，4] 各組動物于造模前禁食不禁水12h，腹腔注射2%戊巴比妥鈉注射液2.5mL/kg進行麻醉，麻醉成功后，行上腹正中切口，暴露并分離膽總管。假手術組僅分離膽總管，不結扎；梗阻性黃疸模型組、柴胡注射液干預組于分離膽總管后，用絲線將膽總管中上段雙重結扎。各組大鼠于術后第1天起，分別給予相應的藥物進行干預，柴胡注射液干預組大鼠腹腔注射柴胡注射液5mL/kg，假手術組、梗阻性黃疸模型組大鼠腹腔注射同體積生理鹽水，1次/d，直至預設定時相前24h。

1.2.3 指標檢測及方法 分別于術后第7、14天兩個時相點對相應組別的大鼠行腹主動脈抽血，分離血清，按試劑盒方法測定ALT、AST活性及TBIL、DBIL含量。

1.3 統計學處理

采用SPSS13.0統計軟件處理數據，所有數據均以（χ±s）表示，組間采用t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 柴胡注射液對梗阻性黃疸大鼠血清AST、ALT活性影響

由表1可知，造模后，梗阻性黃疸大鼠血清中AST、ALT活性逐漸升高，柴胡注射液干預組、梗阻性黃疸模型組造模術后第7、14天兩個時相的AST、ALT活性均高于假手術組，差異有統計學意義（P＜0.05），提示膽總管結扎法致梗阻性黃疸大鼠模型造摸成功。各相同時相比較，柴胡注射液干預組AST、ALT活性低于梗阻性黃疸模型組，差異有統計學意義（P＜0.05），提示柴胡注射液對梗阻性黃疸大鼠血清AST、ALT活性有降低作用。各不同時相比較，假手術組術后第7、14天兩個時相的AST、ALT活性均無明顯差異，差異無統計學意義（P＞0.05），梗阻性黃疸模型組術后第14天比術后第7d天時相的AST、ALT活性均明顯升高，差異有統計學意義（P＜0.05），柴胡注射液干預組術后第14天比術后第7天時相的AST、ALT活性均明顯降低，差異有統計學意義（P＜0.05），提示柴胡注射液對梗阻性黃疸大鼠肝損傷保護作用是漸進性的。

2.2 柴胡注射液對梗阻性黃疸大鼠血清TBIL、DBIL含量影響

由表2可知，造模后，梗阻性黃疸大鼠血清中TBIL、DBIL含量逐漸升高，柴胡注射液干預組、梗阻性黃疸模型組造模術后第7、14天兩個時相的TBIL、DBIL含量均高于假手術組，差異有統計學意義（P＜0.05），提示膽總管結扎法致梗阻性黃疸大鼠模型造摸成功。各相同時相比較，柴胡注射液干預組TBIL、DBIL含量低于梗阻性黃疸模型組，差異有統計學意義（P＜0.05），提示柴胡注射液對梗阻性黃疸大鼠血清TBIL、DBIL含量有降低作用。各不同時相比較，假手術組術后第7、14天兩個時相的TBIL、DBIL含量均無明顯差異，差異無統計學意義（P＞0.05），梗阻性黃疸模型組術后第14天比術后第7天時相的TBIL、DBIL含量均明顯升高，差異有統計學意義（P＜0.05），柴胡注射液干預組術后第14天比術后第7天時相的TBIL、DBIL含量均明顯降低，差異有統計學意義（P＜0.05），提示柴胡注射液對梗阻性黃疸大鼠肝損傷保護作用是漸進性的。

3 討論

肝臟是含酶豐富的器官，它在進行分解合成等物質代謝時，需要多種酶的參與。AST、ALT是肝臟內重要的功能酶，ALT、AST主要分布于肝細胞漿和線粒體中，肝功能正常時在血中活性水平很低，當肝臟實質細胞受損傷或壞死時，肝細胞膜通透性增高，使肝細胞內AST、ALT等多種酶大量釋放出來，從而使血中酶的活性水平升高，故根據血中AST、ALT等酶活性升高的程度，可反映出肝損傷的嚴重程度。因此，血中ALT、AST活性水平升高，可提示肝細胞受到破壞、肝細胞膜通透性增強及線粒體損傷。

梗阻性黃疸是肝膽外科常見病，可導致機體腸黏膜功能損害、敗血癥及肝腎等多臟器衰竭[5]。據文獻報道[2]，膽道梗阻可引起腸道膽鹽缺乏，清除內毒素的能力下降，后者可直接致肝細胞凋亡；膽道梗阻后亦可導致肝臟線粒體呼吸鏈電子傳遞障礙，促進氧自由基的生成，加之肝臟內自由基清除酶合成數量減少，致使自由基清除能力下降，從而誘發肝細胞凋亡。

中藥柴胡始載于《神農本草經》，列為上品，具有疏散退熱、疏肝解郁、升陽舉陷之功效，臨床主要用于感冒發熱、寒熱往來、肝郁氣滯、胸肋脹痛等證[6]。有文獻報道[7]，柴胡中主要成分柴胡皂苷對酒精、四氯化碳、D-氨基半乳糖胺、脂多糖及卡介苗等因素導致的大、小鼠慢性肝損傷均有顯著的保護作用；以柴胡為主要組成的復方保肝效果也十分明顯，特別是對阻塞性黃疸病癥，具有明顯的疏肝利膽效用。繆輝來等[8]的研究結果顯示，加味大柴胡湯可顯著降低膽總管結扎致阻塞性黃疽大鼠血清中膽汁酸的含量，并可明顯減輕肝細胞損傷，具有明顯的保肝、利膽作用。謝毅[9]的研究表明，加味大柴胡湯具有保護肝功能、抗感染、提高機體免疫力，緩解內毒素血癥病情，其對膽總管結扎致大鼠阻塞性黃疸的保護作用是通過抑制TOLL樣受體4（Toll-lilee receptor 4，TLR4）來實現的。柴胡注射液是從中藥柴胡根中提取有效成分后經精制而成的中藥制劑，具有解熱、抗炎、抗病毒、鎮靜、鎮咳等藥理作用，臨床上常用于上呼吸道感染引起的高燒及細菌、病毒引發的肺炎、肝炎等疾病。

本研究結果表明，梗阻性黃疸大鼠經柴胡注射液干預后，可顯著降低AST、ALT活性及TBIL、DBIL含量，表明柴胡注射液對膽總管結扎致梗阻性黃疸大鼠肝、膽損傷病情具有很好的治療效果，有關此方面的作用機制與臨床應用尚有待于進一步深入研究探討。

[參考文獻]

[1] 胡洪生，鄔善敏，朱光輝，等. 鈴蟾肽對梗阻性黃疸大鼠肝臟的保護作用[J]. 華中醫學雜志，2007，31（6）：472-474.

[2] 劉文生，吳德全，楊書龍，等. 精氨酸對梗阻性黃疸大鼠肝損傷的保護作用及其對肝細胞凋亡的影響[J]. 肝膽胰外科雜志，2009，21（6）：439-443.

[3] 邵文武，張輝. 膽總管結扎術誘導大鼠肝纖維化模型的建立[J]. 黑龍江醫藥科學，2010，33（4）：102.

[4] 和華，李國祥，張練，等. 重組生長激素對梗阻性黃疸大鼠肝細胞凋亡的影響[J].中國現代醫學雜志，2011，21（8）：973-976

[5] 張小龍，鄔善敏，許漢兵，等. N-乙酰半胱氨酸對梗阻性黃疸大鼠腸黏膜屏障的保護作用[J]. 武漢大學學報（醫學版），2010，31（3）：320-324.

[6] 鄭純威，丁華熳，陳宇，等. 柴胡皂苷改善大鼠肝纖維化的實驗研究[J]. 中國中醫急癥，2011，20（5）：755-756.

[7] 黃偉，趙燕，孫蓉. 基于柴胡皂苷類成分的保肝作用與肝毒性研究進展[J]. 中國藥物警戒，2011，8（1）：38-41.

[8] 繆輝來，林木生，張利，等. 加味大柴胡湯對阻塞性黃疽大鼠膽汁酸代謝的影響及機制[J]. 中華實外科雜志，2006，23（8）：934-936.

[9] 謝毅，陳明，談燚，等. 加味大柴胡湯對阻塞性黃疸大鼠TLR4 mRNA表達的影響[J].蘇州大學學報（醫學版），2009，29（1）：88-90.

（收稿日期：2011-04-12）