新輔助化療對(duì)局部晚期乳腺癌中ER、PR、C-erbB-2表達(dá)的影響

[摘要] 目的 探討新輔助化療對(duì)局部晚期乳腺癌中ER、PR及C-erbB-2的表達(dá)有無(wú)影響。方法 通過(guò)免疫組化的方法檢測(cè)新輔助化療前粗針穿刺標(biāo)本及術(shù)后標(biāo)本的ER、PR及C-erbB-2的表達(dá)情況。結(jié)果 新輔助化療前后ER、PR及C-erb-2表達(dá)狀態(tài)發(fā)生改變的分別有5例、10例及7例。新輔助化療前后ER、PR及C-erbB-2的表達(dá)無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。結(jié)論 新輔助化療可使部分晚期乳腺癌患者的EP、PR及C-erbB-2的表達(dá)發(fā)生變化，但EP、PR及C-erbB-2的表達(dá)變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明新輔助化療不會(huì)影響晚期乳腺癌患者的ER、PR及C-erbB-2的表達(dá)。

[關(guān)鍵詞] 新輔助化療；局部晚期乳腺癌；ER；PR；C-erbB-2；免疫組織化學(xué)

[中圖分類(lèi)號(hào)] R737.9 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2011）23-62-03

Influence of Neoadiuvant Chemotherapy on the Expression of ER、PR、C-erbB-2 In Patients with Locally Advanced Breast Cancer

TIAN Mengzi BI Yanqing

Department of General Surgery，Dongying City People’s Hospital，Dongying 257091，China

[Abstract] Objective To explore neoadjuvant chemotherapy locally advanced breast cancer to ER， PR and C-erb-2 without the express impact. Methods Through the immunohistochemical determination of the new adjuvant chemotherapy before thick needle biopsy specimens were collected and postoperative ER， PR and C-erbB-2 expression. Results ER、Pr and C-erbB -2 expression before and after chemotherapy state changes respectively in 5 cases， 10 cases and 7 cases. Statistical analysis results show that that the new adjuvant chemotherapy ER， PR and C-erbB -2 before and after express no significant differences（P＞0.05）. Conclusion Neoadjuvant chemotherapy with advanced breast cancer can be made part of the EP， PR and C-erbB-2 expression changes，but EP，PR and C-erbB- 2 expression change was not statistically significant.Neoadjuvant chemotherapy with advanced breast cancer does not affect the ER， PR and C-erbB-2 expression.

[Key words] Neoadjuvant chemotherapy；Locally advanced breast cancer；ER；PR； C-erbB-2；Immunohistochemical

乳腺癌是女性常見(jiàn)的惡性腫瘤，在我國(guó)占全身各種惡性腫瘤的7%～10%，并呈逐年上升趨勢(shì)，部分大城市統(tǒng)計(jì)學(xué)報(bào)告顯示乳腺癌發(fā)病率已占女性惡性腫瘤首位。乳腺癌病因目前仍不清楚，可能的因素很多，比如遺傳因素、不典型增生、初潮年齡早或未生育哺乳等都可能是導(dǎo)致乳腺癌發(fā)生的原因[1]，局部晚期乳腺癌因其病變侵及局部區(qū)域范圍廣，隨著研究的進(jìn)展，新輔助化療已經(jīng)成為局部晚期乳腺癌的絕對(duì)適應(yīng)證。隨著新輔助化療在乳腺癌尤其是局部晚期乳腺癌中的廣泛應(yīng)用，其對(duì)乳腺癌的各個(gè)生物學(xué)指標(biāo)如EP、PR及C-erbB-2等的表達(dá)到底有無(wú)影響，目前仍無(wú)大規(guī)模試驗(yàn)證明。本文的目的即為探索新輔助化療（NAC）對(duì)局部晚期乳腺癌患者HR和C-er-2表達(dá)的影響，從而進(jìn)一步明確NAC在局部晚期乳腺癌中應(yīng)用的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2004年1月～2009年3月在東營(yíng)市人民醫(yī)院住院的83例女性乳癌患者，年齡41～73歲，中位年齡55歲，患者均可捫及腫塊，且均經(jīng)B超引導(dǎo)下粗針穿刺證實(shí)為浸潤(rùn)性乳腺癌，按TNM分期均為Ⅲ期乳腺癌，且所有患者均同意行新輔助化療。全部病例均接受乳腺癌的根治性手術(shù)。活檢標(biāo)本與術(shù)后標(biāo)本都切片后進(jìn)行免疫組化分析。除去在化療過(guò)程中病情進(jìn)展的3例及化療后腫塊消失（完全緩解）的11例，共有69例患者參與本試驗(yàn)。穿刺后標(biāo)本及手術(shù)后標(biāo)本均處理后送本院病理科行病理檢查及免疫組化實(shí)驗(yàn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 免疫組化染色 所有組織均用10%福爾馬林液固定，常規(guī)石蠟包埋，4μm厚連續(xù)切片，分別做HE和免疫組化染色。

1.2.2 主要試劑 ER、PR、C-erbB-2基因、二步法染色試劑盒、DAB顯色試劑盒、0.01M PBS液、抗原修復(fù)液均購(gòu)于北京中山生物技術(shù)有限公司。

1.2.3 采用二步法染色 根據(jù)試劑盒操作說(shuō)明書(shū)中的要求和步驟制作標(biāo)本，陽(yáng)性對(duì)照采用對(duì)照片（購(gòu)于北京中山試劑公司），以PBS代替一抗作陰性對(duì)照。

1.3 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)著色深淺程度及陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量（%），由我院病理科醫(yī)生在高倍光鏡下隨機(jī)選擇12個(gè)視野，做出判斷。陽(yáng)性細(xì)胞必須是：①細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰；②細(xì)胞定位性好；③著色明顯高于背景。根據(jù)以上標(biāo)準(zhǔn)，-視為陰性表達(dá)，+～+++視為陽(yáng)性表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)數(shù)資料以率和構(gòu)成比表示，用秩和檢驗(yàn)及Fisher法進(jìn)行組間比較，P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

新輔助化療前ER、PR表達(dá)陽(yáng)性的分別是34例（49.27％）和50例（72.46％），化療后ER、PR表達(dá)陽(yáng)性的分別有29例（42.03％）和44例（63.77％）；新輔助化療前后ER、PR陰性表達(dá)及陽(yáng)性表達(dá)發(fā)生改變的分別有5例和10例。其中ER有5例由陽(yáng)性表達(dá)變?yōu)殛幮员磉_(dá)；PR有8例由陽(yáng)性表達(dá)變?yōu)殛幮员磉_(dá)，有2例由陰性表達(dá)變?yōu)殛?yáng)性表達(dá)。ER、PR的表達(dá)在新輔助化療前后無(wú)顯著性差異（P＞0.05） （表1、2）。而C-erbB-2的陽(yáng)性表達(dá)率在輔助化療前后分別為41例（59.42%）及40例（57.97%），化療后C-erbB-2 的表達(dá)3例由陽(yáng)性表達(dá)變?yōu)殛幮员磉_(dá)，有4例陰性表達(dá)變?yōu)殛?yáng)性表達(dá)，化療前后C-erbB-2的表達(dá)無(wú)顯著性差異（P＞0.05）（表3）。新輔助化療雖可使部分晚期乳腺癌患者的EP、PR及C-erbB-2的表達(dá)發(fā)生變化，但這些變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其不會(huì)影響晚期乳腺癌患者的ER、PR及C-erbB-2的表達(dá)。

3 討論

NSABP B-18和B-27等試驗(yàn)研究表明：80%～90%的患者在進(jìn)行化療后腫瘤明顯縮小[2]，增加了手術(shù)機(jī)會(huì)。但是很多生物學(xué)指標(biāo)和病理表達(dá)在化療前后都有了一些變化，尤其是激素受體的表達(dá)狀況，影響我們判斷預(yù)后的同時(shí)還影響了我們對(duì)下一步治療方案的選擇。

ER、PR的表達(dá)狀態(tài)作為是否選擇內(nèi)分泌治療的指標(biāo)從上世紀(jì)70年代已經(jīng)被提出，并且其能預(yù)測(cè)早期復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)[3]。研究分析患者服用5年三苯氧胺（TAM）后，復(fù)發(fā)幾率及死亡風(fēng)險(xiǎn)在ER陽(yáng)性乳腺癌患者中明顯降低了。很多臨床試驗(yàn)表明PR也是重要的預(yù)測(cè)預(yù)后的因子之一，并且認(rèn)為HR陽(yáng)性的乳腺癌病人在輔助內(nèi)分泌治療中獲益最大[4]，作為制定乳腺癌輔助治療的考慮因素，ER及PR是臨床醫(yī)生不可忽視的。本研究發(fā)現(xiàn)，化療前后ER、PR水平比較，雖無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但對(duì)部分患者ER及PR的狀態(tài)有影響。研究認(rèn)為HR狀態(tài)發(fā)生變化的原因有很多，其中包括：①認(rèn)為染色主觀性判斷；②腫瘤細(xì)胞染色的透明度受到化療的影響；③另取材樣本的差異也可能是HR受體表達(dá)發(fā)生變化的重要原因。很多情況下，各種因素共同作用從而導(dǎo)致了穿刺標(biāo)本及術(shù)后標(biāo)本的ER、PR部分出現(xiàn)了表達(dá)的變化。

本實(shí)驗(yàn)的C-erbB-2高表達(dá)陽(yáng)性率偏低，NCCN規(guī)定C-erbB-2高表達(dá)是免疫組化染色表達(dá)為+++，一旦為++則必須加FISH試驗(yàn)加以確定。本實(shí)驗(yàn)把所有表達(dá)為+～+++的定義為陽(yáng)性，有可能導(dǎo)致陽(yáng)性率增高。雖然目前來(lái)看，因?yàn)閲?guó)內(nèi)人群經(jīng)濟(jì)等各方面的原因?qū)е聦?duì)C-erb-2的重視程度低于HR受體，但隨診研究的進(jìn)展，其在乳腺癌中的重要地位已經(jīng)越來(lái)越受到人們的重視。本研究表明，新輔助化療前后對(duì)C-erbB-2的狀態(tài)無(wú)顯著變化，參考了國(guó)內(nèi)外很多關(guān)于C-erb-2的試驗(yàn)來(lái)看，我們的結(jié)論與其一致。研究認(rèn)為凡是C-erbB-2+++或++而加用FISH確定用高表達(dá)者，含蒽環(huán)類(lèi)或/和紫杉類(lèi)的化療藥物效果明確。加用FISH檢查是考慮賀普丁治療費(fèi)用高昂，一般人群難以承受，為了精確的了解C-erb-2高表達(dá)的的狀態(tài)必須加用FISH檢查。

雖然有研究證實(shí)乳腺癌的新輔助化療對(duì)患者的DFS及OS無(wú)明顯改善，但新輔助化療可以增加手術(shù)幾率，保乳成功幾率較前明顯增加。根據(jù)NSABPB-18試驗(yàn)的年隨訪結(jié)果，新輔助化療后的病理完全緩解率可以作為局部進(jìn)展期乳腺癌的獨(dú)立預(yù)后指標(biāo)[5]。德國(guó)學(xué)者Prisack等[6]的研究表明，ER及PR高表達(dá)和C-erbB-2低表達(dá)，腫瘤分化程度高的乳腺癌患者進(jìn)行乳腺癌的新輔助化療后PCR增加。根據(jù)意大利歐洲腫瘤研究所Collconi等[7]的研究表明，對(duì)于ER、PR陰性且腋窩較少淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病人行乳腺癌的新輔助化療后病理完全緩解率高于其他類(lèi)型病人。英國(guó)Burcombe和澳大利亞Taucher的研究卻提出了不同見(jiàn)解：他們認(rèn)為無(wú)論是手術(shù)標(biāo)本的ER、PR或C-erb-2還是粗針穿刺活檢的生物學(xué)標(biāo)記結(jié)果都不能作為乳腺癌新輔助化療的預(yù)測(cè)指標(biāo)。在我國(guó)，類(lèi)似的實(shí)驗(yàn)開(kāi)展的較少，仍未得出統(tǒng)一的結(jié)論。

分析多個(gè)國(guó)內(nèi)外臨床試驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)，雖然有部分實(shí)驗(yàn)提示在新輔助化療前后ER及PR的表達(dá)狀態(tài)會(huì)發(fā)生影響，主要表現(xiàn)為陽(yáng)性改為陰性的幾率增加，但是90%以上的研究結(jié)果提示乳腺癌新輔助化療前后的HR受體狀態(tài)無(wú)顯著變化。對(duì)于C-erb-2的研究則結(jié)論沒(méi)有大的異同，一般認(rèn)為在新輔助化療前后C-erb-2的狀態(tài)無(wú)明顯改變，大多都承認(rèn)了費(fèi)博建的理論[8]。我們的研究結(jié)果表明，新輔助化療前后ER、PR及C-erb-2的表達(dá)有部分發(fā)生了改變，以ER及PR為著，但是沒(méi)有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在國(guó)內(nèi)，大部分的乳腺癌患者的輔助治療計(jì)劃是通過(guò)術(shù)后的免疫組化結(jié)果來(lái)明確ER、PR及C-erb-2的情況從而確定其輔助治療方案，根據(jù)我們的研究結(jié)果，局部進(jìn)展期乳腺癌患者新輔助化療前后ER、PR及C-erb-2的表達(dá)狀態(tài)仍然有部分發(fā)生了改變，我們建議LABC的病人輔助治療方案的選擇以新輔助治療前的穿刺標(biāo)本的免疫組化結(jié)果為準(zhǔn)。

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（收稿日期：2011-03-21）