輪狀病毒腸炎細胞因子動態(tài)變化與中藥干預(yù)的研究

[摘要] 目的 探討輪狀病毒腸炎細胞因子的變化與加味葛根芩連湯的干預(yù)作用。方法 68例患兒隨機分為中藥組和西藥組，另加健康組作對照。中藥組在對癥治療的基礎(chǔ)上用加味葛根芩連湯，3次/d口服，西藥組用利巴韋林，（10～15）mg/（kg·d）靜脈滴注，兩組連用5d。結(jié)果 治療前后兩組IL-2、IL-10、TNF-α水平及臨床療效比較差異有顯著性（P＜0.01）。結(jié)論 輪狀病毒腸炎與血清細胞因子失衡有關(guān)，加味葛根芩連湯能對上述細胞因子進行有效的干預(yù)。

[關(guān)鍵詞] 輪狀病毒腸炎；細胞因子；葛根芩連湯

[中圖分類號] R272 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2011）23-151-02

The Research of Changs of Cytokines and Intervention of Traditional Medicine in Rotavirus Enteritis

SHI Xuntong1 HU Guohua2 WANG Youcheng3

1.Cixi Maternal and Child Care Center， Zhejiang Province， Cixi 315300， China; 2.Medicial College， Jinhua Polytechnic， Zhejiang Province，Jinhua 321000， China; 3. Jinhua People’s Hospital， Zhejiang Province， Jinhua 321000， China

[Abstract] Objective To discuss the changs of cytokines and the intervention of gegen qinlian decoction in rotavirus enteritis. Methods Children with rotavirus enteritis were randomly divided into traditional medicine group and western medicine group. On the other hand， a group of health children were selected as control. The traditional medicine group was given gegen qinlian decoction three times a day on the basis of semeiologically treats， and the western medicine group was given ribavirin （10-15）mg/（kg·d）， intravenous drip. Both were given for five days. Results IL-2， IL-10 and TNF-α levels of two groups were significant different before and after treatment （P＜0.01）. Conclusion The unbalance of serum cytokines is responsible for rotavirus enteritis， and gegen qinlian decoction can effectively interfere these cytokines.

[Key words] Rotavirus enteritis; Cytokines; Gegen qinlian decoction

目前我國嬰幼兒感染性腹瀉的主要致病原是輪狀病毒，但是輪狀病毒腸炎的發(fā)病及免疫機制還不完全清楚，療效并不滿意。白細胞介素-2（IL-2）、白細胞介素-10（IL-10）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）是體內(nèi)重要的免疫調(diào)節(jié)因子和促炎癥介質(zhì)。我們在用加味葛根芩連湯進行臨床干預(yù)的同時，用ELISA法對68例輪狀病毒腸炎患兒血清細胞因子IL-2、IL-10和TNF-α的水平進行治療前后的檢測，旨在探討輪狀病毒腸炎細胞因子動態(tài)變化以及細胞因子在發(fā)病機制中的作用和葛根芩連湯干預(yù)的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

68例患兒均于本院2009年11月～2010年3月經(jīng)PCR方法檢測大便輪狀病毒（+）、細菌培養(yǎng)（-），確診為輪狀病毒腸炎，其中男44例，女24例；年齡2～36個月，平均（18.0±9.3）個月。所有腸炎患兒營養(yǎng)狀況良好，既往健康，未使用過免疫抑制劑。隨機分為中藥組35例和西藥組33例。同時選擇健康體檢嬰幼兒30例作為對照組。三組患兒性別、年齡、體重等比較，差異無顯著性（P＞0.05）。

1.2 治療方法

中西藥兩組在對癥治療（口服ORS補液或根據(jù)血清電解質(zhì)及血氣分析的結(jié)果，糾正酸堿失衡及電解質(zhì)紊亂等）的基礎(chǔ)上中藥組用加味葛根芩連湯（中藥煎劑）：方劑由葛根15～20g、炙甘草6g、黃芩碳6～9g、黃連3～6g、白術(shù)6～9g、焦三仙各10g組成?！?歲10mL/次，～2歲20mL/次，～3歲30mL/次，tid，口服。西藥組用利巴韋林注射液（北京雙鶴藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，國藥準字H11020969）（10～15）mg/kg，分2次靜脈滴注，兩組連用5d，同時于治療前后分別清晨空腹采靜脈血2mL，置－20℃冰箱保存，采用ELISA法檢測兩組血清IL-2、IL-10、TNF-α水平及評價臨床療效。

1.3 檢測方法

所有患兒于治療前后分別空腹清晨采靜脈血2mL，離心取血清置-20℃冰箱保存，用雙抗體夾心ELISA法檢測細胞因子的水平。試劑盒由深圳晶美公司提供，儀器為澳大利亞產(chǎn)MumkanEX酶標儀，操作時嚴格按照各試劑盒說明書進行檢測。

1.4 療效標準

按照1998年全國腹瀉病防治學(xué)術(shù)研討會組委會關(guān)于腹瀉病療效判斷標準的補充建議[1]，顯效：治療72h時糞便次數(shù)及性狀恢復(fù)正常，大便成形，全身癥狀消失；有效：治療72h時大便次數(shù)及性狀明顯好轉(zhuǎn)，大便次數(shù)減少，大便轉(zhuǎn)稠，全身狀況明顯改善；無效：治療72h時大便次數(shù)及性狀、全身狀況均無好轉(zhuǎn)甚至惡化。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件包進行處理，動態(tài)變化以數(shù)表示，陽性率比較采用χ2檢驗，各細胞因子與臨床指標采用直線相關(guān)分析；藥物療效的組間比較采用方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組治療前后血清細胞因子的變化

治療前中西藥組血清IL-2與健康組比均顯著降低（P＜0.01），而IL-10、TNF-α水平與健康組比均顯著升高（P＜0.01）；治療后中藥組IL-10、TNF-α水平明顯低于西藥組，IL-2明顯高于西藥組，兩組比較有顯著性差異（P＜0.01）。見表1。

2.2#8195;兩組臨床療效比較

顯效率：中藥組65.71%，與西藥組36.36%相比，P＜0.01；總有效率：中藥組100.00%，與西藥組78.79%相比，P＜0.01；差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。見表2。

2.3 不良反應(yīng)

西藥組4例惡心、嘔吐，4例紅細胞、白細胞及血紅蛋白輕度下降，停藥后消失，中藥組未見不良反應(yīng)。

3 討論

輪狀病毒腸炎目前仍占我國嬰幼兒感染性腹瀉首要位置，急性腹瀉患兒中11%～71%（平均33%）由RV引起[2]，嚴重威脅著嬰幼兒的健康和生命。其病毒主要侵犯小腸黏膜上皮細胞，使絨毛萎縮、變短、黏膜固有層單核細胞浸潤。

IL-10由B淋巴細胞、T淋巴細胞及肥大細胞產(chǎn)生，主要作用是促進肥大細胞和T淋巴細胞增殖，并抑制T淋巴細胞產(chǎn)生干擾素。以介導(dǎo)細胞免疫應(yīng)答為主的Th1細胞主要分泌IL-2、IFN-γ等細胞因子，其中IL-2主要由活化的淋巴細胞產(chǎn)生，是調(diào)節(jié)機體免疫功能最主要的淋巴因子之一[3]。IL-2能激活多種免疫細胞，誘導(dǎo)淋巴細胞的增生與免疫效應(yīng)，促進B細胞的免疫應(yīng)答以及NK細胞、單核巨噬細胞的增生[4]。TNF-α是由激活的單核巨噬細胞產(chǎn)生，充當炎癥介質(zhì)，能介導(dǎo)內(nèi)毒素的多種生物學(xué)作用參與體內(nèi)炎癥反應(yīng)和組織損傷。輪狀病毒腸炎時病毒的毒素激活吞噬細胞等炎癥細胞，釋放炎癥介質(zhì)和細胞毒素，導(dǎo)致腫瘤壞死因子表達水平增高。同時TNF-α可通過其免疫調(diào)節(jié)作用促進炎癥時的免疫反應(yīng)和具有抗病毒作用，TNF-α分泌適量時可發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，分泌過多時可致機體損傷[5，6]。

中醫(yī)將輪狀病毒腸炎歸屬于濕熱泄范疇。治擬化濕和中，清熱解毒主之。加味葛根芩連湯中黃芩、黃連清熱解毒；葛根生津止渴、解肌退熱、升陽止瀉；白術(shù)健脾除濕；甘草補牌益氣?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究認為：黃芩具有抗炎、抗變態(tài)反應(yīng)、抗病毒等廣泛的藥理活性作用。黃連體外試驗對多種病毒、細菌和真菌有抑制作用。葛根有改善微循環(huán)，對沙門菌所致家兔發(fā)熱有明顯解熱作用。白術(shù)能增強網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能，促進細胞免疫。甘草具有腎上腺皮質(zhì)激素樣抗炎作用[7]。臨床藥學(xué)研究表明，葛根芩連湯能直接殺滅輪狀病毒，明顯抑制腸道常見致病菌，并能保護胃腸黏膜，有益于消化吸收功能的恢復(fù)，提高機體免疫力，達到迅速止瀉的目的[8]。

我們的研究顯示葛根芩連湯治療前中、西藥組血清IL-2與健康組比均顯著降低（P＜0.01）；而IL-10、TNF-α水平與健康組比顯著升高（P＜0.01），治療后中藥組IL-10、TNF-α水平明顯低于西藥組，而IL-2明顯高于西藥組，兩組比較有顯著性差異（P＜0.01）。表明葛根芩連湯可能有促進Th1細胞活化，參與輪狀病毒腸炎Th1/Th2細胞失衡的免疫應(yīng)答與調(diào)節(jié)。

我們的研究表明，葛根芩連治療湯輪狀病毒腸炎的臨床顯效率65.71%與西藥組36.36%相比具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；總有效率中藥組100.00%與西藥組78.79%相比，差異有顯著性（P＜0.01）。葛根芩連湯能夠增強輪狀病毒腸炎的免疫功能，控制炎性反應(yīng)，抑制病毒，改善腸道微生態(tài)內(nèi)環(huán)境和改善腸道微循環(huán)，促進消化，縮短病程、提高治愈率等，且無明顯不良反應(yīng)。由于我們的樣本資料較少，尚待以后進一步積累資料與研究。

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（收稿日期：2011-06-01）