近年來文獻報道用黏液組織化學法對胃腸黏膜組織分泌黏液性質的研究,證明胃腸上皮中有兩種黏液成分,即中性黏液物質和酸性黏液物質,又可分為硫酸化黏液物質及唾液酸黏液物質。胃正常黏膜中主要分泌的是中性黏液、小腸黏膜主要分泌唾液酸黏液、大腸黏膜主要分泌硫酸黏液及唾液酸黏液中的O-乙酰化唾液酸黏液。在胃的良性病變組織中經常可以看到不同程度的腸上皮化生,因此,利用黏液組織化學染色可進一步了解到胃的腸上皮化生組織的性質,把腸上皮化生分為兩大類即,完全性腸化生和不完全性腸化生,大腸型腸化生和小腸型化生。
為了了解胃良性病變組織及腸上皮化生的種類和關系,我們用15種組織染色法進行鑒別和分析。
資料與方法
15種組織染色法名稱:HE;H1D/AB;AB/PAS;ABph1.0/NR;PAS;PAT/KOH/PAS;TB/PAS;AF/AB;OR/AB;ABph2.5;PAM/KOH/PAS;ABph1.0/HE;ABph1.0/NFR;Meyers;PB/KOH/PAS。
方法:按照胃良性病變不同表現,為了便于觀察統計,分6個方面進行觀察:①正常的胃黏膜上皮及腺上皮,②各種類型胃炎的胃黏膜上皮及腺上皮,③各種類型的胃潰瘍邊緣及殘存胃黏膜上皮及腺上皮,④各種病變造成的上皮非典型增生,⑤各種病變造成的腸上皮化生,⑥各種病變造成的萎縮。
結 果
各種病變50例,染色15種,用光學顯微鏡觀察,統計分析結果:①HE做為常規觀察,進行以上6種分類觀察,做以下各種染色對照。②染色結果:AB/PAS、PAT/KOH/PAS、TB/PAS、PAS、PAM/KOH/PAS等5種染色,在以上6類中全部呈陽性結果。H1D/AB、AB/NR、AF/AB、OR/AB、ABph2.5、ABph1.0/NFR、Meyers、ABph1.0/HE、PB/KOH/PAS等9種染色,僅腸上皮化生呈陽性結果,其余五類均陰性結果。
各種染色法顯示結果:①HE染色:顯示組織結構及病變特點。②H1D/AB染色:顯色部位:十二指腸及結腸杯狀細胞;結果顯示:硫酸黏液(褐黑色)、唾液酸黏液(藍色)。③AB/PAS染色:顯色部位:胃上皮、十二指腸Brunner氏腺、結腸、十二支持和杯狀細胞;結果顯示:中性黏液(品紅色)、N-乙酰唾液酸黏液(藍色)、O-乙酰唾液酸黏液和微量硫酸黏液(淡藍色)、中性和受過碘酸反應的酸性黏液(紫色)。④ABph1.0/NR染色:顯色部位:腸道杯狀細胞;結果顯示:酸性黏液(褐色)。⑤PAT/KOH/PAS染色:顯色部位:胃腸上皮;結果顯示:O-乙酰唾液酸(紅色)。⑥TB/PAS染色:顯示部位:胃腸上皮;結果顯示:酸性黏液(深紫紅色)、中性黏液(淡品紅色)。⑦AF/AB染色:顯色部位:十二指腸及結腸杯狀細胞;結果顯示:硫酸黏液(紫紅色)、唾液酸黏液(藍色),以上同時存在為深紫紅色。⑧OR/AB染色:顯色部位:十二指腸、結腸杯狀細胞;結果顯示:硫酸黏液(紅棕色)、唾液酸黏液(藍色),以上同時存在為紫藍色。⑨ABph2.5染色:顯色部位:腸的杯狀細胞、唾液腺;結果顯示:N-乙酰唾液酸黏液(藍色)、O-乙酰唾液酸黏液(淡藍色)、微量的硫酸黏液(淡藍色)。⑩PAS染色:顯色部位:胃上皮、十二指腸的Brunners腺、結腸杯狀細胞;結果顯示:中性黏液(PAS陽性)、硫酸黏液(PAS弱陽性)、唾液酸黏液(PAS陽性)。○11PAM/KOH/PAS染色:顯色部位:胃腸上皮;結果顯示:O-乙酰唾液酸黏液(PAS陽性)。○12ABph1.0/NFR染色:顯色部位:胃腸上皮;結果顯示:酸性黏液(藍色)。○13ABph1.0/HE染色:顯色部位:十二指腸、結腸杯狀細胞;結果顯示:硫酸黏液(藍色)。○14Meyers染色:顯色部位:胃腸上皮;結果顯示:黏蛋白(紅色)。○15PB/KOH/PAS染色:顯色部位:腸的杯狀細胞、唾液腺;結果顯示:O-乙酰唾液酸黏液(紅色)。
結 果
根據胃黏膜正常黏液分泌,以中性黏液成份為主,用AB/PAS、PAT/KOH/PAS、TB/PAS、PAS、PAM/KOH/PAS 5種染色為陽性結果顯示。其他5種病變均有上述陽性結果,因此可以分析,在胃的良性病變組織中,胃黏膜上皮的黏液分泌性質沒有改變,仍以中性黏液為主。
其他九種染色法:H1D/AB、AB/NR、AF/AB、OR/AB、ABph2.5、ABph1.0/NFR、Meyers、ABph1.0/HE、PB/KOH/PAS,僅在腸上皮化生的組織上顯示陽性,其他良性病變包括正常胃上皮均不顯示,陽性顯示均在杯狀細胞,僅AF/AB、OR/AB、ABph2.5、ABph1.0/NFR、AB/PAS在刷狀緣顯示,主要顯示硫酸黏液和唾液酸黏液。
從染色結果上,腸化生上皮的杯狀細胞含有中性黏液、硫酸黏液及唾液酸黏液,具有了胃和腸上皮所含有的各種黏液。
根據胃、腸(大腸和小腸)分泌黏液的特點來統計:結果在腸上皮化生中可見到大腸型、小腸型、混合型;統計結果:完全腸化型占78%,不完全腸化型22%,其中完全腸化型中大腸型50%,小腸型22%。從上可看到胃的良性病變的腸化以完全型腸化占多數,其中又以大腸型腸化占多數。
討 論
研究胃良性病變是對胃癌的發生發展有很重要的意義,因為癌的發生總是在癌前有一動態的變化,這是已被公認的,關于哪一種變化屬于癌前病變,各家研究不一,本文目的是首先在胃的良性病變中利用黏液組織化學法來了解胃的正常黏液分泌與胃良性病變時在功能上、組織學上的改變,進一步了解胃良性病變的組織學上、功能上發生的改變與胃癌發生之間的關系,這樣對胃癌的發生可能找出一定的規律[1]。
通過15種組織染色法觀察,在胃的正常黏膜中分泌的是以中性黏液為主的黏液物質[2,3],除胃上皮的腸化生外,其余像炎癥、萎縮、不典型增生等均無明顯改變,證明仍具有胃上皮形態的其分泌功能無改變。關于腸上皮化生中的大腸型、小腸型及混合型3種情況均可見到,與胃良性病變中各類病變發生的比例上無統計學意義,但所有病例以大腸型為主。
在腸化生中主要是杯狀細胞顯色,而吸收細胞不顯色。杯狀細胞分泌的黏液中具有胃及腸所分泌的黏液成分,即中性黏液、硫酸黏液和唾液酸黏液,而腸中的杯狀細胞主要分泌硫酸黏液和唾液酸黏液,而胃上皮腸化生中的杯狀細胞則具有分泌胃、腸黏液的雙重功能,這種異常現象有無意義尚待定論[4]。
腸化生隨年齡增長而出現率增高,從統計學上看胃黏膜的不典型增生的腸化生率顯著增高,而不典型增生基本已被公認與癌前病變有關,與腸化之間有密切關系[5]。
參考文獻
1 劉介眉,等.鑒別胃黏膜大腸型腸化生的好幾種組織學染色方法.中華病理學雜志,1998,12:152-153.
2 李蜀華,等.66例胃癌HE黏液組織化學染色與電鏡的對照觀察.中華病理學雜志,1998,1:45-46.
3 閆瑞芬,等.應用組織化學和免疫組織化學方法觀察胃黏膜腸上皮化生與胃癌的關系.中華病理學雜志,1998,12:176-178.
4 龔志錦.病理組織制片和染色技術.上海:上海科學技術出版社,1994:148-173.
5 王泊沄,等.臨床技術操作規.北京:人民軍醫出版社,2004:30-67.