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李屬壞死環斑病毒(PNRSV)新疆巴旦木分離物外殼蛋白基因(CP)片斷的克隆與序列分析

2012-01-01 00:00:00殷智婷韓劍等
果樹學報 2012年5期

摘要: 【目的】為了查明新疆巴旦木果樹病原病毒的種類,為病毒的分子檢測提供基礎?!痉椒ā坎捎秒p抗體夾心酶聯免疫吸附法(DAS—ELISA),從巴旦木果樹葉片中檢測到李屬壞死環斑病毒(PNRSV)。以陽性樣品的總RNA為模板進行PNRSV外殼蛋白基因(CP)RT—PCR擴增,對預期430 bp大小的4個擴增產物進行克隆、測序和序列分析。【結果】結果表明,PNRSV新疆巴旦木分離物CP基因的核苷酸和氨基酸序列與世界各地已報道的分離物具有較高的同源性,分別為80.0%~97.2%和80.1%~94.1%,其中與阿根廷分離物AY217的同源性最高;而與同屬03亞組的蘋果花葉病毒(ApMV)同源性較低,僅為52.9%~55.4%和45.6%~48.6%。新疆PNRSV各分離物之間CP基因高度同源。序列比對與系統發生樹的分析顯示,PNRSV新疆巴旦木分離物的株系屬于GroupⅠ組?!窘Y論】確定了PNRSV為侵染新疆巴旦木果樹的病原病毒。這是PNRSV在新疆發現的首次報道。

關鍵詞: 巴旦木; 李屬壞死環斑病毒(PNRSV); 雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(DAS—ELISA); RT—PCR; CP基因

中圖分類號:S662.9 文獻標志碼:A 文章編號:1009—9980(2012)05—0740—07

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