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外源赤霉素誘導(dǎo)‘藤稔’葡萄果實(shí)差異表達(dá)基因的cDNA—RAPD分析

2012-01-01 00:00:00王西成宋長(zhǎng)年等
果樹(shù)學(xué)報(bào) 2012年5期

摘要: 【目的】為鑒定葡萄果實(shí)赤霉素誘導(dǎo)響應(yīng)基因,【方法】應(yīng)用cDNA—RAPD技術(shù),以鮮食葡萄品種‘藤稔’為研究對(duì)象,對(duì)赤霉素處理后果實(shí)發(fā)育過(guò)程中基因表達(dá)進(jìn)行了mRNA指紋分析。【結(jié)果】通過(guò)16條隨機(jī)引物的篩選,共分離得到61個(gè)差異表達(dá)的轉(zhuǎn)錄衍生片段(TDF),其中增強(qiáng)表達(dá)或赤霉素誘導(dǎo)下特異性表達(dá)TDF42條,抑制表達(dá)19條。對(duì)其中18個(gè)TDF進(jìn)行了克隆、測(cè)序和序列分析發(fā)現(xiàn),17個(gè)TDF與NCBI已有序列同源,其中10個(gè)為已知功能基因,另有1個(gè)TDF無(wú)同源序列。對(duì)選取的6個(gè)TDF進(jìn)行半定量RT—PCR驗(yàn)證,結(jié)果表明3個(gè)基因片段在處理?xiàng)l件下均特異表達(dá)或上調(diào)表達(dá),另外3個(gè)基因片段在處理?xiàng)l件下均未見(jiàn)表達(dá)或下調(diào)表達(dá),這與cDNA—RAPD表達(dá)譜結(jié)果相一致。【結(jié)論】利用cDNA—RAPD技術(shù)成功分離了部分受赤霉素誘導(dǎo)的差異表達(dá)基因。

關(guān)鍵詞: 葡萄; ‘藤稔’; 赤霉素; cDNA—RAPD; 差異表達(dá)基因

中圖分類號(hào):S663.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號(hào):1009—9980(2012)05—0733—07

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