益母草膏存儲過程中的水蘇堿的含量變化及影響因素

王玉 郭茂鳳 徐艷 秦昆明 蔡寶昌

益母草膏存儲過程中的水蘇堿的含量變化及影響因素

王玉 郭茂鳳 徐艷 秦昆明 蔡寶昌

目的 探討益母草膏在儲存過程中其指標性成分鹽酸水蘇堿含量降解的影響因素。方法 采用薄層掃描法測定益母草膏中鹽酸水蘇堿的含量，考察不同溫度(15℃、35℃)和光照(避光、見光)對益母草膏存儲過程中鹽酸水蘇堿含量的影響。結果 溫度對鹽酸水蘇堿的含量影響較小，并非主要影響因素;光照可以引起益母草膏中鹽酸水蘇堿的分解，益母草膏在見光保存的條件下儲存4個月，鹽酸水蘇堿的含量降低43.3%。結論 益母草膏中的鹽酸水蘇堿對光照不穩定，在生產和儲存過程中均需要避光保存。

益母草膏;鹽酸水蘇堿;薄層色譜法;含量

益母草膏具有活血調經、利尿消腫、清熱解毒之功效，用于血瘀所致的月經不調、產后瘀阻等癥，有“經產良藥”之稱。益母草膏中的主要活性成分為水蘇堿，水蘇堿具有較好的藥用價值，具有興奮子宮、改善血液流變學、抗血栓的作用［1，2］。益母草膏為江蘇海昇藥業有限公司注冊品種之一(批準文號:國藥準字Z32020766)，由原江蘇金康藥業有限公司注冊變更而來。在注冊變更前，江蘇海昇藥業有限公司試生產了三批，在儲存過程中發現鹽酸水蘇堿的含量有降解現象，故對其穩定性進行了研究，考察了可能引起水蘇堿降解的相關因素，為益母草膏的質量標準修訂提供參考依據。

1 資料與方法

1.1 儀器與試藥

SCANNER 3薄層掃描儀(瑞士 CAMAG公司);RE-2000B型旋轉蒸發儀(鞏義宇翔儀器有限公司);YP-250SD穩定性試驗箱(上海邁捷實驗設備有限公司);KQ5200DE數控超聲儀(昆山超聲儀器有限公司);202型電熱恒溫干燥箱(山東濰坊醫藥集團有限公司)。

益母草膏為江蘇海昇藥業有限公司自制產品，批號:S101001、S101002、S101003;鹽酸水蘇堿對照品 (批號:100416)，購自中國藥品生物制品檢定所;其余試劑為分析純。

1.2 供試品溶液和對照品溶液的制備

取本品3 g，置燒杯中，精密稱定，加水10 ml溶解，用稀鹽酸調節pH值至1～2，通過732鈉型強酸性陽離子交換樹脂柱(內徑2 cm，柱高15 cm)上，用水洗脫至洗脫液近無色，棄去洗液，再用2 mol/L氨溶液150 ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣用甲醇溶解并轉移至10 ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，靜置，取上清液作為供試品溶液。

取鹽酸水蘇堿對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 ml含2 mg的溶液，作為對照品溶液。

1.3 薄層色譜分析法

按照《中國藥典》2010版益母草膏中水蘇堿的含量測定的方法，用薄層掃描法檢測鹽酸水蘇堿含量［3］。精密吸取供試品溶液 8μl、對照品溶液 3μl與 8μl，分別交叉點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇－乙酸乙酯－鹽酸(8∶1∶3)為展開劑，展開，取出，晾干，在105℃加熱15分鐘，放冷，噴以1%三氯化鐵乙醇溶液－稀碘化鉍鉀試液(1∶10)混合溶液至斑點顯色清晰，晾干，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，照薄層色譜法進行掃描，波長:λs=510 nm，測量供試品吸收峰積分值與對照品吸收峰積分值，計算，即得。

計算公式為:Y=481584X+5462.2(Y:峰面積;X:樣品中的毫克數)。

1.4 溫度條件的控制

取益母草膏樣品12瓶(每瓶250 g，白色透明玻璃瓶密封)，每個批號(S101001、S101002、S101003)各 4 瓶，分別置于(15±1)℃和(35±1)℃恒溫箱中，每批次每個溫度下各2瓶，儲存4個月(3～6月份)，儲存前用黑色的遮光紙密閉包裹原來的包裝，4個月后開蓋，用玻璃棒攪拌均勻，取適量樣品按照上述方法制備樣品溶液后進行檢測。

1.5 光照條件的控制

取益母草膏樣品12瓶(每瓶250 g，白色透明玻璃瓶密封)，每個批號(S101001、S101002、S101003)各4 瓶，置于普通樣品留樣室同一地點的樣品架(通透貨架)上，每個批次取2瓶在原來包裝的基礎上，采用黑色的遮光紙密閉包裹(即避光保存)，另外6瓶采用原來的包裝(白色透明玻璃瓶密封)見光保存(室內自然光)，溫度為普通留樣室溫度(常溫:10～30℃)、時間為4個月(3～6月份)。以鹽酸水蘇堿含量為考察指標。4個月后開蓋，開蓋后用玻璃棒攪拌均勻，取適量樣品按照上述方法制備樣品溶液后進行檢測。

2 結果

2.1 溫度對鹽酸水蘇堿含量的影響

益母草膏在實際儲存中，溫度是儲存條件控制的關鍵參數之一，故考察溫度參數對鹽酸水蘇堿含量的影響。結果顯示:在(15±1)℃儲存條件下，3批產品中鹽酸水蘇堿平均含量為5.08 mg/g;在(35±1)℃儲存條件下，3批產品中鹽酸水蘇堿的平均含量為5.05 mg/g，說明溫度對鹽酸水蘇堿的穩定性影響較小。

表1 儲存溫度對益母草膏中鹽酸水蘇堿含量變化的影響

2.2 光照對鹽酸水蘇堿含量的影響

益母草膏在實際儲存中，光照是儲存條件控制的另一個關鍵參數，故本研究考察光照參數對鹽酸水蘇堿含量的影響。結果表明:光照對益母草膏中鹽酸水蘇堿的含量變化有顯著影響，在避光保存條件下，3批產品中鹽酸水蘇堿的平均含量為5.31 mg/g，在見光保存條件下，鹽酸水蘇堿的平均含量為3.01 mg/g，含量降低了43.3%，見光降解為鹽酸水蘇堿含量下降的主要原因。

表2 光照條件對益母草膏中鹽酸水蘇堿含量變化的影響

3 討論

益母草膏為益母草經加工制成的煎膏，屬婦科用藥，具有活血調經、利尿消腫、清熱解毒之功效。益母草膏可用于經閉、痛經及產后瘀血腹痛等癥。黃鳴清等［4］研究發現益母草藥材儲存一年后，鹽酸水蘇堿保留率僅為40%左右，并且研究認為見光分解是鹽酸水蘇堿含量降低的主要原因。海昇藥業有限公司在益母草膏成品儲存的留樣觀察中，發現了鹽酸水蘇堿的含量隨著時間的推移有明顯的降解現象，所以通過該研究確認益母草提取物及含益母草的制劑中鹽酸水蘇堿是否也會見光分解。本研究在產業化條件下，對益母草膏中鹽酸水蘇堿含量變化的原因進行探討，對可能影響鹽酸水蘇堿含量變化的溫度因素和光照因素進行研究，結果表明，含益母草制劑益母草膏中鹽酸水蘇堿見光易降解，沒有采取避光保存的益母草膏放置4個月后，鹽酸水蘇堿保留率僅為60%左右。

鹽酸水蘇堿含量是控制益母草膏質量的重要指標之一，本研究提示，鹽酸水蘇堿見光易降解，故益母草膏成品在儲藏過程中應避光、密封保存。針對益母草膏中鹽酸水蘇堿在見光條件下容易分解，導致含量降低的問題，筆者建議在進行益母草膏等以益母草為主要原料的產品生產過程中，對益母草原藥材、益母草飲片、中間提取物清膏等均應避光存儲，建議將成品的包裝白色透明的玻璃瓶更換為避光的棕色玻璃瓶。同時，筆者也將在此基礎上進行進一步深入研究，探討鹽酸水蘇堿見光分解的化學反應機理，闡明其見光分解的機制，為指導益母草膏產品的規范化生產及安全有效使用提供依據。

［1］李林.水蘇堿的研究概況［J］.安徽農業科學，2009，37(3):930-931.

［2］馬玉紅，楊解人.水蘇堿對家兔心肌缺血再灌注損傷的保護作用［J］.中國實驗方劑學雜志，2006，12(5):40-42.

［3］國家藥典委員會.中國藥典［S］.北京:中國醫藥科技出版社，2010.

［4］黃鳴清，陳瑞云，謝友良，等.鹽酸水蘇堿在中藥生產過程中的含量變化及影響因素研究［J］.時珍國醫國藥，2009，20(10):1587-2589.

(本文編輯:鈕麗霞)

R284.2

A

10.3969/j.issn.1674-1749.2012.05.012

南京市科技計劃項目(201007005);江蘇省企業博士集聚計劃項目

210061南京海昌中藥集團有限公司(王玉、郭茂鳳、徐艷、秦昆明、蔡寶昌);南京中醫藥大學國家教育部中藥炮制規范化及標準化工程研究中心(蔡寶昌)

王玉(1975－)，本科，工程師。研究方向:中藥新藥開發。E-mail:wjn0206@163.com

蔡寶昌(1952－)，碩士，教授，博士生導師。研究方向:中藥質量標準。E-mail:bccai@126.com

2012-02-10)