蒲黃消炎顆粒急性毒性試驗

張涓

(陜西中醫學院藥理學教研室，陜西 咸陽 712046)

蒲黃消炎顆粒急性毒性試驗

張涓

(陜西中醫學院藥理學教研室，陜西 咸陽 712046)

目的:評價蒲黃消炎顆粒的急性毒性，為畜用臨床劑量的設計提供依據。方法:蒲黃消炎顆粒按原生藥4 g/mL的濃度及40 mL/kg的給藥容量，24 h內給昆明種小鼠灌胃1次，連續觀察14 d內小鼠的體重，毒性反應及死亡情況。結果:給藥組和對照組小鼠在第1、7、14天的體重并無差異;小鼠無死亡，也無明顯中毒反應，測得蒲黃消炎顆粒最大耐受量(MTD)為原生藥160 g/kg(成人臨床擬用量的333倍)。結論:蒲黃消炎顆粒在臨床常用劑量下是安全的。

蒲黃消炎顆粒;急性毒性;最大耐受量

蒲黃消炎顆粒是由蒲公英、黃芩、苦地丁等組成，具有清熱解毒，抗炎消腫的功效［1－2］，主要用于呼吸道病毒性感染，消化道感染等。為了確保其臨床用藥的安全性，為其臨床劑量的設計提供依據，我們對蒲黃消炎顆粒進行了小鼠急性毒性實驗研究。

1 材料與方法

1.1 動物

昆明種小白鼠，雌雄各半，SPF級，體重(20±2)g，由西安交通大學醫學院實驗動物中心提供，動物生產許可證號SCXK(陜)2007－001。飼養條件:陜西中醫學院中藥藥理實驗室(國家中醫藥管理局中醫藥科研三級實驗室)，動物使用許可證號SYXK((陜)2007－006，室溫20～25℃，相對濕度45%～70%，飼料為小鼠全價營養飼料。

1.2 藥物

蒲黃顆粒流浸膏，每1 mL含原藥材5 g，由陜西中醫學院藥物研究所提供，批號:20120308。臨床成人擬用量:0.48 g生藥/kg·d(人的體重以60 kg計)。

1.3 預實驗

昆明種小鼠10只，雌雄各半，按稱重隨機分為5組，給藥前禁食不禁水12 h后，第1組以最大給藥濃度(原生藥5 g/mL)和最大給藥體積(40 mL/kg)灌胃蒲黃消炎顆粒流浸膏原液，單次給藥劑量約為原生藥201 g/kg(相當于人臨床擬用量的419倍)，觀察，結果發現，小鼠在第1次灌胃給藥后30 min內出現自主活動減少現象，但無豎毛、抽搐、驚厥、翻倒等異常現象，且在灌胃后1～4 h后活動恢復正常，有1只小鼠出現黑便，較稀。間隔8 h，第2次流浸膏原液40 mL/kg灌胃2 h后，1只出現死亡，經過解剖檢查發現:動物胃內充滿大量濃稠流浸膏，故推測其死亡原因為藥物粘稠度較大，使胃部消化運動受阻而引起的死亡。第2組第1次流浸膏原液40 mL/kg灌胃給藥后，結果同上。間隔8 h，第2次流浸膏原液20 mL/kg灌胃24 h后，1只出現死亡，解剖檢查可見肝臟顏色變深、表面粗糙等，主要為肝臟的毒性。第3組流浸膏原液組(原生藥5.03 g/mL)、第4組流浸膏原液稀釋組(原生藥4 g/mL)、第5組流浸膏原液稀釋組(原生藥3 g/mL)，24 h內均按40 mL/kg灌胃給藥1次;連續觀察14 d，均未見明顯毒性反應和死亡現象。

根據預實驗，小鼠灌胃后有毒性表現和死亡，受濃度和小鼠給藥體積的限制，蒲黃消炎顆粒流浸膏難以測出LD50。故采用測定小鼠的最大耐受量(MTD)來測定藥物的急性毒性作用。根據下列公式計算小鼠的最大耐受量倍數，小鼠最大耐受量倍數=(每只小鼠耐受藥量/小鼠平均體重)×(成人平均體重/成人每日使用劑量)，以人口服耐受量100倍以上為安全［3］。

另取昆明種小鼠10只，按稱重隨機分為2組，24 h內，第1組以流浸膏原液40 mL/kg灌胃給藥1次;第2組流浸膏原液稀釋組(原生藥4 g/mL)，40 mL/kg灌胃給藥1次，連續觀察7 d。第3天第1組有1只小鼠出現死亡，解剖檢查未發現心、肝、脾、肺、腎有明顯特殊改變。

1.4 MTD實驗［4－5］

取禁食12 h的昆明種小鼠40只，雌雄各半，隨機分為空白對照組和流浸膏原液稀釋組(原生藥4 g/mL)。藥物組按照40 mL/kg最大給藥量灌胃給藥1次，給藥劑量約為原生藥160 g/kg。對照組給予等體積的純凈水。給藥后自由飲食，每天詳細觀察記錄小鼠行為活動、狀態、飲食、大小便及毛色、分泌物、體重等指標(詳見觀察指標)，連續14 d。觀察期滿后，稱重，脫臼處死動物，進行大體尸解觀察。

1.5 統計學分析

2 結果

給藥后，蒲黃消炎顆粒組動物給藥后個別出現靜臥少動，4 h后恢復正常。第1天飲食減少，大便略稀，第3天自行消失。在其他觀察時間，蒲黃消炎顆粒組外觀體征未見異常，活動自如，進食、飲水、糞便均正常，皮毛光潔，口、鼻、眼無分泌物，外陰清潔。連續觀察兩周，第1、7、14天體重見表1，給藥組體重在觀察期內與對照組無明顯差異，未出現其他急性毒性反應癥狀和死亡。尸檢胸腔、腹腔未見異常液體，腸管未見脹氣，心、肝、脾、肺、腎等重要臟器未見顏色、形態異常，胃粘膜顏色紅潤，無出血點或潰瘍，尸檢無異常。

表1 蒲黃消炎顆粒小鼠體重變化(±s，n=20)

表1 蒲黃消炎顆粒小鼠體重變化(±s，n=20)

19.20±1.2725.10±2.0527.28±2.31給藥組對照組18.90±1.5624.30±1.5226.80±2.05

3 討論

蒲黃消炎顆粒流浸膏以原生藥4 g/mL濃度和40 mL/kg灌胃給藥1次，小鼠未觀察到死亡和明顯的中毒情況，此時，小鼠灌胃的最大耐受量約為原生藥160 g/kg，相當于臨床成人擬用劑量333倍(每日劑量為原生藥0.48 g/kg，人的體重以60 kg計)，可認為在常用劑量范圍內是安全的。由表1可以看出，給藥組小鼠體質量的增加比對照組略少，可能是灌胃操作刺激或藥物本身對小鼠食欲造成一定影響。由于急性毒性實驗是在1 d內給藥1次或數次，且觀察時間也比較短，雖然蒲黃消炎顆粒急性毒性實驗結果表明其具有較高的安全性，但其安全性評價還應結合長期毒性實驗做進一步驗證，以全面保證臨床用藥的安全性。

［1］國家藥品監督管理局.中藥、天然藥物急性毒性研究技術指導原則［S］.2005

［2］徐淑云，卞如濂，陳修.藥理實驗方法學［M］.第3版，北京:人民衛生出版社，2002

［3］李曉宇，孫蓉.薄荷不同組分對小鼠急性毒性實驗比較研究［J］.中國藥物警戒，2012，9(2):65－68

［4］賈鷹玨，李國輝，張平.黃連及黃連解毒湯對小鼠的急性毒性實驗研究［J］.中國藥學雜志，2011，46(18):1399－1404

［5］孫濤，彭成.川貝母止嗽顆粒的急性毒性測試［J］.成都中醫藥大學學報，2011，34(3):60－61

Study of acute toxicity of puhuang antiphlogosis granule

ZHANG Juan
(Department of Pharmacology，Shanxi College of Traditional Chinese Medicine，Xianyang 712046，Shanxi，China)

Objective:To evaluate the acute toxicity of Puhuang antiphlogosis granule，for veterinary clinical doses of designed.MethodsMice were administered with fluid extract of Puhuang antiphlogosis granule for once per day，consecutively observing the body weight，toxic reaction and death of mice during 14 days.ResultsThere was no significant difference between the body weight of mice in the group of fluid extract and control(P＞0.05);the maximum tolerated dose(MTD)of Puhuang antiphlogosis granule on mice is 160.0 g/kg(333 times of clinical adult daily dose).Conclusion:Puhuang antiphlogosis granule is safe in the usual clinical dose.

Puhuang antiphlogosis granule;Acute toxicity;Maximum tolerated dose(MTD)

1005-3697(2012)06-0545-02

R965.3

A

10.3969/j.issn.1005-3697.2012.06.006

陜西省教育廳項目(08JK267)

2012-09-16

張涓(1977－)，女，陜西漢中人，博士，副教授，研究方向:主要從事心腦血管病中藥研究工作。E-mail:rouerou@sina.com

時間:2012-11-1217∶28

網絡出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1254.R.20121112.1728.026.html