四川省跁子病病區飲水和紅苕中DON含量的檢測報告

侯海峰 李群偉 鄧佳云 李富忠

(1.泰山醫學院流行病學研究所，山東 泰安 271016； 2.四川省疾病預防控制中心，四川 成都 610031)

跁子病是發生于我國四川省部分地區的一種原因不明的骨骼疾病，該疾病主要侵犯大關節，造成患者關節畸形、增粗、疼痛，在生長發育期發病者還可導致矮小畸形，嚴重危害當地居民身體健康[1]。

自從本病被報告以來，流行病學家對跁子病進行了多次的流行病學調查，提出了多種病因假設，但都沒能取得一致的共識[2]。哈爾濱醫科大學楊建伯教授在詳細的流行病學調查基礎上，提出是食用紅苕所致的中毒的病因學說[3]。作者的課題組的工作也證明了糧食中的一種真菌毒素——脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON)可導致動物和人類骨關節炎[4-5]。為探討DON與跁子病的發病關系，我們采集了病區水樣和糧樣進行了檢測分析，現報告如下。

1 材料和方法

1.1主要試劑與儀器 DON毒素(純毒素)為FLUKA公司產品，其他試劑均使用市售分析純，ELISA試劑盒為江蘇省蘇微微生物公司產品，550型酶標儀為美國Bio-Rad公司產品。

1.2樣品的采集 2009年4月采集仁壽縣和內江市跁子病病區原飲水井水樣10份，疾病流行時主食紅苕10份，以泰安市泰山區和濟南市長清區萬德鎮采集的水樣和面粉各20份作為對照。

1.3DON檢測方法 水樣采用減壓蒸餾方法濃縮20倍，無菌過濾，采用酶聯免疫吸附試驗法(ELISA)檢測糧食中DON含量。面粉及紅苕則烘干后粉碎，用甲醇和水(體積比9︰1)提取DON，采用ELISA檢測。

1.4統計分析 采用SPSS13.0統計軟件進行數據的統計分析，由于數據不服從正態分布，組間比較采用秩和檢驗。

2 結 果

水樣及紅苕中DON含量檢出情況見表1。跁子病病區紅苕DON檢出率為70%，可檢出DON含量為22.9～170.4 μg/kg，對照面粉DON檢出率為150%，可檢出DON含量為10.2～27.3 μg/kg，兩組糧樣比較差異有統計學意義(P<0.05)。跁子病病區和對照水樣檢測結果差異無統計學意義(P>0.05)。

表1 跁子病病區水樣及紅苕中DON含量檢出情況

注：#兩組比較Z=3.389，P=0.001；*P>0.05。

3 討 論

3.1關于水樣的檢測結果 歷來關于飲水中真菌毒素污染情況的報告不多，原因有多方面，但毒素提取困難、很多毒素不溶于水，檢測意義不大是兩個主要原因。DON毒素溶于水，或為真菌直接在水中產生，或為雨水沖刷溶解于水中，因此有檢測的必要。但本次檢測結果可能與實際不符，其原因是在減壓蒸餾過程中，DON毒素可能隨同蒸汽一起流失了，這樣導致其檢測結果比實際值要偏低一些，但盡管如此，與對照區的檢測結果相比沒有差異，其含量水平也達不到使人中毒的程度，所以成為病因的可能性不大。

3.2關于紅苕的檢測結果 過去紅苕是跁子病流行時的主食，而且當地群眾反映在地窖中貯藏越冬時經常有發霉的現象，然而現在當地居民早已不食用了，而且紅苕的貯藏條件也大有改觀，基本上是作為飼料或調味品偶爾吃一點。所以本次檢測的結果無疑是一個脫離原始現場的回顧性解釋，所以本次檢測結果很可能是低于跁子病流行時的DON污染水平，即便如此，其污染率和含量之高也是令人吃驚的，可以想見在幾十年前跁子病流行時情況可能比現在要嚴重得多。

3.3關于T-2毒素與跁子病的關系 有學者提出糧食中的T-2毒素可能是跁子病的病因，但筆者卻不以為然，為說明這個問題，有必要簡單介紹以下食物中毒性白細胞缺乏癥(ATA)。關于此病最早的報告是在十九世紀初，主要流行地區是前蘇聯，最早的報告認為是食物中毒，其后發現與通常的食物中毒有明顯區別，遂認為是一獨立疾病。ATA曾發生過幾次嚴重流行，累計死亡人數超過百萬人(甚至有人說超過千萬人)，引起當地居民的恐慌。ATA的癥狀主要為白細胞進行性減少，化膿性咽峽炎，皮膚出現出血點或斑，粘膜壞死、水腫，免疫力嚴重低下。本病在每年的春季高發，除吃母乳的嬰幼兒外，各年齡段均可發病[6]。

ATA病最嚴重的流行發生在第二次世界大戰期間的前蘇聯，由于戰爭使得糧食無人收割，堆積在田野，更多的干脆被大雪埋在下面越冬，居民饑不擇食，食用后發生歷史上最為嚴重的ATA流行，當時可以說是餓殍遍野。后來，Joffe從二戰期間采集的谷物樣品中分離得到了幾種真菌毒素，包括T-2毒素、HT-2毒素、丁烯酸內酯和新茄鐮刀菌素等，其中主要是T-2毒素，后來他用霉變的谷物和T-2毒素純品分別復制出了ATA動物模型，據此，Joffe等人證明了人類ATA病的病因是由于霉變谷物中的T-2毒素所引起[7]。

但T-2毒素是跁子病的病因嗎？筆者認為不是，原因有四：其一，ATA病流行于很多地區，而且可以發生于各個年齡段，流行時間也足夠長，但ATA病患者的骨關節沒有任何臨床癥狀被描述，流行病學知識告訴我們這樣的事實背后必有其原因；其二，反過來，跁子病患者沒有ATA病患者的臨床癥狀和體征；其三，有報告面粉中T-2毒素含量可超過1500 ng/g，我們且按1000 ng/g的中等劑量計算，一個生長發育期的兒童體重大約是30～40 kg，每天攝入0.5 kg的谷物，那么他每天攝入的T-2毒素的絕對量應為500 μg，甚至更高，那么，平均攝入量為12.5～16.67 μg/kg，而據封劍南[8]報道，平均攝入6.5 μg/kg的T-2毒素就可以引起惡心、嘔吐等中毒癥狀。我們大膽估計跁子病流行時紅苕受真菌污染比較嚴重，T-2毒素含量可能會很高，那么，此時我們完全應該觀察的到患者的惡心和嘔吐等T-2毒素中毒的癥狀，但遺憾的是，跁子病患者沒有惡心和嘔吐等中毒癥狀；其四，T-2毒素的長期攝入可以引起腫瘤高發，尤其是消化道的腫瘤高發，但我們看到，病區的腫瘤發生情況與非病區幾乎沒有差別，因此，也不支持T-2毒素是跁子病病因的觀點。

根據紅苕中DON毒素含量水平較高，以及飲水和紅苕的DON毒素的污染率遠高于非病區的檢測結果，證明跁子病病區飲水和主食受到真菌侵染的情況比較嚴重，即使DON毒素不是跁子病的致病原因，但作為真菌毒素污染的標識物，已經充分說明了真菌毒素在跁子病發病過程中的致病作用，而且其致病作用主要是通過病區產的糧食來傳播的。

[1] 汪浩，唐雪峰，李富忠.四川省跁子病流行現況調查及分析[J].現代預防醫學，2009，36(13)：2420-2425.

[2] 鄧佳云.四川跁子病調查報告[J].中國地方病學雜志，1988，5(4)：273-275.

[3] 楊建伯，鄧佳云，李德云，等.金塘村調查報告——關于跁子病病因的思考[J]. 中國地方病學雜志，2000，19(1)：36-40.

[4] 李群偉，侯海峰，李曉梅，等.DON致新西蘭兔骨關節損傷的實驗觀察[J].中國地方病學雜志，2009，28(1)：41-43.

[5] 李群偉，侯海峰，李曉梅，等.糧食DON含量與手骨關節炎嚴重程度關系的研究[J].中國地方病防治雜志，2005，20(6)：333-335.

[6] 莫東旭.T-2毒素—人類兩種地方病的“病因”[J].中國地方病防治雜志，1995，10(5)：294-298.

[7] Abraham Z.Joffe.Effects of fusariotoxins in human in:fusarium species their biology and toxicology[M]. New York: Wiley -Interscience Publication,1986: 225.

[8] 封劍南.污染鐮刀菌及T-2毒素的霉大米食物中毒[J].中華預防醫學雜志，1992，26(5)：284-286.