不同激素對樹蘭組織培養的影響

孫 瑤，黃康康

(浙江省杭州市農業科學研究院，浙江 杭州 310024)

樹蘭為蘭科樹蘭屬熱帶蘭，原產于厄瓜多爾，是一種具有很高觀賞價值的熱帶氣生蘭，深受臺灣蘭花愛好者的青睞，但在國內尚屬少見［1-2］。谷祝平等［3］、潘學峰等［4］曾利用樹蘭種子誘導形成的原球莖進行擴繁取得成功，但種子間差異很大，利用種子擴繁不利于親本性狀的保持［1］。為了加速繁育速度，縮短育種周期，在工廠化育苗中常采用組織培養的方式［5-6］。樹蘭是瀕危蘭花物種，數量稀少，因此研究樹蘭組織培養技術，構建一套簡便高效的再生體系，對樹蘭的快繁研究具有重要意義。現將作者的試驗結果總結如下。

1 材料與方法

1.1 材料

供試材料為樹蘭 (Epidendrum Yellow)無菌苗的莖段和叢芽，由課題組組培室提供。

1.2 方法

取健壯無菌試管苗，以1/2 MS為基本培養基，每升附加8 g瓊脂粉，30 g蔗糖和2 g活性炭，添加不同濃度的NAA(0.2，0.5，1.0 mg·L-1)和6-BA(0.5，1.0，2.0，3.0，4.0 mg·L-1)。試驗設15個處理。每瓶接種5個外植體，每處理接種10瓶，pH值調至5.8，培養溫度25℃左右，每天光照時間14 h，光照強度1 500～2 000 lx，培養40～50 d后統計數據。

2 結果與分析

2.1 對愈傷組織和芽誘導的影響

外植體接入誘導培養基上約20 d后開始膨大，產生愈傷組織，但不同激素組合對樹蘭莖段愈傷組織的誘導作用差異顯著，以NAA 1.0 mg·L-1+6-BA 3.0 mg·L-1誘導出的愈傷組織最好，誘導率達50.0%(表1)，且愈傷組織呈黃綠色、表面濕潤、松軟，生長狀態好。

表1 NAA、6-BA不同配比組合對愈傷組織誘導的影響

在激素對樹蘭莖段的誘導過程中發現，經40～50 d的培養后，有些莖段分化成芽 (表2)，且不同激素組合對芽的誘導效果不同。以NAA 1.0 mg·L-1+6-BA1.0 mg· L-1和 NAA 1.0 mg·L-1+6-BA 0.5 mg·L-1誘導出的芽最多，誘導率分別達52.0%和48.0%，且植物生長健壯。

表2 NAA、6-BA不同配比組合對芽分化的影響

2.2 對生根的影響

從表3可以看出，不同NAA和6-BA配比組合對樹蘭組培苗生根的影響不同。NAA 0.5 mg·L-1+6-BA 2.0 mg·L-1的激素組合對生根的誘導率最低，只有87.5%。其余各生長調節劑組合對生根的誘導率均達90%以上。

表3 NAA、6-BA不同配比組合對組培苗生根的影響

3 小結和討論

本實驗中樹蘭原球莖的誘導率和芽的分化率較低，這可能是由于這2個實驗均是在同一種培養基中統計所致，也即是說莖段培養40～50 d后，同一個組培瓶中出現原球莖和芽并存的情況。如NAA 1.0 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1培養基中原球莖的誘導率為30%，芽分化率為52%，即在該培養基中培養40～50 d后30%莖段轉變成原球莖，另外52%的莖段分化成芽，誘導和分化率總和則為82%。表明樹蘭的誘導和分化相對容易，可以在同一種培養基 中 完 成。其 中 NAA 1.0 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1配方中誘導和分化總和最高，達82%。此外，樹蘭生根相對容易，在各培養基中的生根率均在87.5%以上，其中在培養基NAA 1.0 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1上的生根率達100%。因此，推斷樹蘭的誘導、分化和生根可以在同一個培養基上完成。張先云等［7］的研究也表明雜交蘭的從誘導、增殖、分化到生根可以用同一種培養基。這樣大大縮短了生產和試驗周期、簡化了操作程序、降低了成本。

根據已有研究可知，不同品種間的差異性較為顯著。本文僅對樹蘭的一個品種進行了研究，不能對不同品種的培養效果進行評價。因此對具有廣泛品種適應性的培養基還有待于進一步研究。

［1］ 魏翠華.樹蘭離體培養和植株再生 (簡報)［J］.亞熱帶植物科學，2006，35(2):64-65.

［2］ 龍雅宜.初識奇妙的蘭科觀賞植物 (中)［J］.花木盆景:花卉園藝版，2007(12):7-11.

［3］ 谷祝平，徐濤.樹蘭原球莖增殖中體細胞胚發生的研究 ［J］.蘭州大學學報:自然科學版，1990，26(1):76-79.

［4］ 潘學峰，凌梅，王安石.樹蘭未成熟種子離體快繁技術［J］.熱帶生物學報，2010，1(2):158-164.

［5］ 江金蘭，周輝明，羅慶國.6-BA、NAA不同配比對大花蕙蘭叢生芽增殖的影響 ［J］.浙江農業科學，2009(1):85-86.

［6］ 馬華升，王偉科，王佳.培養基、激素和添加物對大花蕙蘭原球莖誘導增殖的影響 ［J］.浙江農業科學，2005(6):452-456.

［7］ 張先云，袁秀云，馬杰.雜交蘭的組織培養與快速繁殖技術研究 ［J］.河南科學，2009，27(4):419-421.