運輸溫度對酶免試劑質量影響分析

梁俊杰 肖瑋 劉樂霞 趙國宏 馮麗娜 張燕

國產酶免試劑的有效期為12個月，是指儲存在溫度為2～8℃情況下，若超出此溫度范圍，會影響酶免試劑應用質量，有效期會發生變化［1］。酶免試劑在生產后運輸過程中，運輸溫度往往達不到2～8℃要求。我們模擬夏秋高溫及冬季寒冷天氣下試劑運輸過程，監測試劑在各儲存階段的質量變化，確定運輸溫度對試劑有效期的影響，避免血液檢驗過程中使用不合格試劑。

1 材料與方法

1.1 材料 血站在10月份購進乙肝試劑B，批批檢合格，試劑進站時溫度在2～8℃內，進貨抽檢合格。

1.2 試劑與設備 康徹思坦生物有限公司提供0.2 U/ml HB-sAg弱陽性質控血清;購買成品重蒸餾水。各試劑均經批批檢合格，并在有效期內。愛康全自動酶免分析儀(深圳市愛康電子有限公司，Uranus AE90)，經強檢的外顯式電子溫度計(JM624U型)。

1.3 方法 取5盒乙肝試劑B在2～8℃(2～8℃冰箱冷藏室)存放3 d，作為對照組;另取5盒乙肝試劑B在(24±2)℃［空調控制室溫(24±2)℃］存放3 d，作為實驗組1;取5盒乙肝試劑B在－6～0℃(－6～0℃冰箱冷凍室)存放3 d，作為實驗組2。然后將3組試劑放于2～8℃冰箱冷藏，并在冷藏的第0、1、2、3、4……個月用同批號 0.2 U/ml HBsAg 弱陽性質控血清檢測兩種試劑，分別做20孔，計算原始均值、變異系數CV做至有效期末，分析實驗組與對照組試劑質量差別。

1.4 統計學分析應用SPSS 10.0統計軟件，計量資料以±s表示，采用t檢驗，每組內數據采用F檢驗及S-N-K法計算，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

通過對比實驗組與對照組檢測數值，發現各組試劑在各儲存階段檢測結果均符合試劑說明書實驗有效性最低要求，弱陽性質控品原始均值與臨界值比值均大于1，變異系數CV均小于15%，但組間比較:實驗組1試劑在6、7月時，實驗組2試劑在5～7月時，弱陽性質控品檢測原始均值明顯降低(圖1)，與對照組比較差異有統計學意義(P＜0.05);組內比較:對照組0～7個月間數據無差異，實驗組1后2個月、實驗組2后3個月檢測數據與0月比較差異有統計學意義(P＜0.05)。見表1。

表1 2組試劑檢測結果xˉ±s

3 討論

圖1 3組試劑檢測結果趨勢圖

通過對比實驗組與對照組的檢測數據，發現2組試劑在冷藏冰箱保存的初期檢測結果無差別，但隨儲存時間延長，在接近試劑保存有效期末時，實驗組試劑檢測能力明顯下降，試劑有效期縮短，使用此時的酶免試劑容易漏檢弱陽標本。

《血站技術操作規程(2012版)》明確規定:試劑運送途中的溫度必須符合試劑說明書要求，供應商必須提供試劑運輸冷鏈監控溫度記錄［2］。可見，酶免試劑運輸的冷鏈控制尤其重要，試劑在經過運輸到達用戶手中時，實際的質量可能會有不同程度的變化［3］，試劑盒有效期也會發生改變。若運輸溫度過高會使酶蛋白變性、活性降低，試劑靈敏度降低，顯色劑中的雙氧水溶液分解，使顯色偏低;運輸溫度過低，試劑凍結，也會造成酶活性、抗原抗體活性降低，影響試劑的質量，運輸溫度過高或過低，均會使試劑有效期縮短［1］。

影響酶免試劑運輸溫度的主要因素是內包裝箱保溫性能及包裝箱內冰排放置數量及放置方式。內包裝箱的保溫性能與箱體厚度及其導熱系數(λ)相關，箱體越厚、導熱系數越低，保溫性能越好，但箱體太厚會使包裝箱比較笨重，不易搬移，選取厚85 mm的聚氨酯泡沫作內包裝內箱較為合適［4］。包裝箱內放置冰排數量和方式對試劑運輸溫度影響也較大，目前大多數試劑廠家將5個冰排豎直并排放于靠近箱體中心處試劑盒之間，冰排與試劑盒之間及無隔離措施，炎熱季節時，運輸溫度控制在2～8℃ 的時間短，冰排融化易造成靠近冰排的試劑盒受潮，試劑盒之間空氣流通不暢，遠離冰排試劑盒溫度相對較高，冬季氣溫較低時，靠近冰排的試劑盒溫度過低;9月份我們對一批經3 d運輸到達血站的酶免試劑溫度進行檢測:兩冰排之間為15.3℃，包裝箱內試劑盒溫度分別為16.7℃(靠近冰排)、20.5℃(離冰排較遠)，溫度明顯高于8℃。我們建議試劑供貨方改變包裝箱內冰排放置方式并適當增加冰排數量，可按內包裝箱容積大小，沿內箱周邊箱壁單層豎直放置合適數量冰排，冰排與試劑盒之間用隔溫泡沫隔開，避免冰排與試劑盒直接接觸，靠近冰排的試劑盒不會溫度過低或受潮，試劑盒之間用隔溫泡沫斷續隔開，包裝箱內空氣充分流通，使每盒試劑均能較長時間維持2～8℃。

因此，試劑供貨方應選用合適的包裝材料、合適的冷鏈包裝方式，確保試劑運輸溫度控制在2～8℃內。血站在采購酶免試劑時，一定要考慮運輸溫度對試劑質量的影響，可適當擴大庫存，減少或避免炎熱季節進貨，不在節假日前采購，防止試劑因節假日在運輸中途滯留，不使用接近有效期的試劑，同時與試劑供貨商積極溝通，可要求其在試劑包裝運輸時放置一紐扣式溫度記錄儀，記錄運輸過程中試劑溫度，使用戶能了解整個運輸過程中試劑冷鏈情況，避免運輸過程處于失控狀態，確保血液檢測使用合格的酶免試劑，確保血液安全。

1 邢培青，劉玉振主編.實用輸血檢驗.第1版.鄭州:鄭州大學出版社，2001.116.

2 高東英.采供血機構體外免疫診斷試劑評價系統的初步探討.中國輸血雜志，1999，16:56-57.

3 衛生部醫政司.《血站技術操作規程(2012版)》6.3.9檢驗試劑質量檢查.衛醫政發〔2012〕1號附件.

4 吳太虎，石梅生，劉恩貴，等.S99-野戰運血箱熱傳導仿真分析.醫療衛生裝備，2001，4:11-12.52.