獻(xiàn)血員Coombs試驗(yàn)陽(yáng)性在臨床輸血中的意義

張靜蕊 申曉環(huán) 遲寶霞 張丹

Coombs試驗(yàn)(DAT)是在免疫血液學(xué)中經(jīng)常使用的一種方法，尤其在自身免疫性溶血性貧血(AIHA)的診斷和輸血科的交叉配血試驗(yàn)中是一種傳統(tǒng)的“金標(biāo)法”?；颊邥?huì)由于很多因素出現(xiàn)DAT陽(yáng)性，但有時(shí)獻(xiàn)血員也會(huì)出現(xiàn)DAT陽(yáng)性，致交叉配血不合，這是由于我國(guó)目前采供血機(jī)構(gòu)和醫(yī)療機(jī)構(gòu)極少對(duì)獻(xiàn)血員血液進(jìn)行DAT所致。獻(xiàn)血員DAT陽(yáng)性對(duì)臨床輸血安全造成很大影響，值得輸血工作者的關(guān)注。筆者在輸血工作中發(fā)現(xiàn)2例獻(xiàn)血員DAT陽(yáng)性致交叉配血不合的案例，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2例獻(xiàn)血員濾白紅細(xì)胞懸液均為遼寧省血液中心提供，我院用其所附交叉配血樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn);2例受血者為我院擇期手術(shù)備血的住院患者，均無(wú)輸血史及輸血反應(yīng)史，紅細(xì)胞不完全抗體篩選為陰性。

1.2 試劑 Liss/coombs微柱凝膠卡(抗IgG+C3d)、孵育器、離心機(jī)均為瑞士DiaMed公司產(chǎn)品;DG Gel DC Scan微柱凝膠卡為美國(guó)Diagnostic Grifols公司產(chǎn)品;紅細(xì)胞血型抗體篩選細(xì)胞為上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司產(chǎn)品。

1.3 方法

1.3.1 交叉配血試驗(yàn):按說(shuō)明書操作。

1.3.2 不完全抗體的篩選:1#、2#、3#抗體篩選細(xì)胞各 50 μl加入Liss/coombs微柱凝膠卡中，再分別加入獻(xiàn)血員血清樣本25 μl，孵育 15 min，離心后觀察結(jié)果。

1.3.3 直接抗人球蛋白定性試驗(yàn):取低離子液配制的0.8%獻(xiàn)血員紅細(xì)胞懸液50 μl加入Liss/coombs微柱凝膠卡中，孵育15 min，離心后觀察結(jié)果。

1.3.4 直接抗人球蛋白分型試驗(yàn):對(duì)于方法1.3.3試驗(yàn)陽(yáng)性的獻(xiàn)血員血標(biāo)本，應(yīng)用DG Gel DC Scan微柱凝膠卡進(jìn)行分型，按說(shuō)明書操作。

2 結(jié)果

2例獻(xiàn)血員與受血者皆為交叉配血不合，且獻(xiàn)血員的不完全抗體篩選均為陰性，獻(xiàn)血員DAT均為陽(yáng)性，分型鑒定結(jié)果為IgG+C3d致敏。見(jiàn)表1。

表1 獻(xiàn)血員血型血清學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3 討論

DAT是檢測(cè)紅細(xì)胞表面是否存在相應(yīng)免疫球蛋白或補(bǔ)體的一種方法。據(jù)統(tǒng)計(jì)，獻(xiàn)血員中 DAT陽(yáng)性者為1/1 000～1/9 000［1］，自從我國(guó)實(shí)行無(wú)償獻(xiàn)血制度以來(lái)，獻(xiàn)血員的來(lái)源十分廣泛。進(jìn)行獻(xiàn)血體檢時(shí)，試驗(yàn)性檢測(cè)項(xiàng)目主要是血紅蛋白、肝功能和傳染性指標(biāo)。一些沒(méi)有癥狀的自身免疫性疾病患者可能也參與了獻(xiàn)血，雖然上述試驗(yàn)性檢測(cè)項(xiàng)目符合獻(xiàn)血要求，但因可能存在致敏紅細(xì)胞和(或)不完全抗體，可引起主次側(cè)配血不合，這種情況的血液一旦確認(rèn)就不能輸注。導(dǎo)致DAT陽(yáng)性的因素很多，如應(yīng)用某些藥物產(chǎn)生藥物抗體、病毒感染、自身免疫性疾病、溶血性貧血、慢性阻塞性肺疾病等。究其原因是紅細(xì)胞的自身抗體或免疫復(fù)合物黏附在紅細(xì)胞膜上CR受體所引起［2］。

有文獻(xiàn)報(bào)道，某些健康獻(xiàn)血員DAT陽(yáng)性往往預(yù)示著AIHA或其他自身免疫性疾?。?］。Bareford等［4］通過(guò)對(duì)26例DAT陽(yáng)性的健康獻(xiàn)血員20年的隨診發(fā)現(xiàn)，26例中的9例DAT仍為陽(yáng)性，其中1例已發(fā)展為AIHA，其余17例雖然DAT仍為陰性，但其中7例通過(guò)酶法仍可檢測(cè)到自身抗體。Grost等［5］對(duì)14年中65名檢出DAT陽(yáng)性的32名獻(xiàn)血員進(jìn)行復(fù)檢，發(fā)現(xiàn)隨著獻(xiàn)血員年齡的增長(zhǎng)，DAT陽(yáng)性程度也會(huì)增加，這說(shuō)明健康獻(xiàn)血員DAT陽(yáng)性可能與年齡有關(guān)。Win等［6］通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，健康獻(xiàn)血員的DAT陽(yáng)性可能與抗磷脂抗體存在有關(guān)，抗磷脂抗體是導(dǎo)致獻(xiàn)血員DAT陽(yáng)性的一個(gè)偶然因素。本文通過(guò)血型血清學(xué)實(shí)驗(yàn)證明，2例交叉配血不合系獻(xiàn)血員DAT陽(yáng)性所致，但鑒于目前血液中心對(duì)獻(xiàn)血員個(gè)人信息的保密限制，筆者未能聯(lián)系到相關(guān)獻(xiàn)血員，并進(jìn)一步查明原因。

另?yè)?jù)文獻(xiàn)報(bào)道，72%DAT陽(yáng)性的血源會(huì)縮短紅細(xì)胞壽命，輸注給患者后，會(huì)影響患者病情［7］。因此，檢測(cè)獻(xiàn)血員DAT和(或)不完全抗體，可以方便臨床交叉配血，防范和減少臨床輸血不良反應(yīng)，有利于輸血安全，對(duì)DAT陽(yáng)性和(或)不完全抗體陽(yáng)性的獻(xiàn)血員，應(yīng)及時(shí)通知，以查明原因，有利于治療。

1 劉達(dá)莊主編.免疫血液學(xué).第1版.上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社，2002.145-157.

2 郭峰主編.現(xiàn)代紅細(xì)胞免疫學(xué).第1版.上海:第二軍醫(yī)大學(xué)出版社，2002.68-70.

3 嚴(yán)康峰，謝敬文，莫錦政.無(wú)償獻(xiàn)血者同種不規(guī)則抗體發(fā)生率的研究.臨床輸血與檢驗(yàn)，2003，5:195-196.

4 Bareford D，Longster G，Gilks L，et al.Follow-up of normal individuals with a positive antiglobulin test.Scand J Haematol，1985，35:348-353.

5 Gorst DW，Rawlinson VI，Merry AH，et al.Positive direct antiglobulin test in normal individuals.Vox Sang，1980，38:99-105.

6 Win N，Islam SI，Peterkin MA，et al.Positive direct antiglobulin test due to antiphospholipid antibodies in normal healthy blood donors.Vox Sang，1997，72:182-184.

7 Habibi B，Muller A，Lelong F，et al.Red cell autoimmunization in a"normal"population 63 cases.Nouv Presse Med，1980，9:3253-3257.