不孕不育患者血清中抗精子抗體與抗心磷脂抗體的測定

王青，龐玲霞，王友沛，葛海峰

（溫州醫學院，浙江 溫州 325035，1.機能中心；2.附屬眼視光醫院 檢驗科；3.附屬第二醫院檢驗科）

不孕不育是臨床生殖醫學研究領域的難點和熱點。引起不孕不育的因素有很多，其中免疫因素是其最常見的原因。近年來隨著生殖免疫學的發展，人們開始認識到不孕不育患者可能存在自身免疫失調，因此免疫性不孕不育的檢查已引起臨床的重視。研究發現，抗精子抗體（AsAb）和抗心磷脂抗體（ACA）是導致不孕不育的重要免疫因素。本研究通過檢測不孕不育患者AsAb、ACA水平，并以正常生育組作為對照，探討AsAb、ACA與不孕不育的關系。

1 對象和方法

1.1 對象 2003年1月至2011年3月在溫州醫學院附屬第二醫院生殖中心就診的不孕不育患者1 756例，年齡21～45歲，平均（27.23±3.69）歲；不孕不育時間2～18年，排除生殖器畸形及其他病變。不孕不育的診斷標準參照人民衛生出版社樂杰主編的《婦產科學》第5版[1]。1 756例不孕不育患者檢測了ACA，其中1 326例不孕不育患者（不孕不育組）同時檢測了ACA和AsAb。1 127例反復自發性流產患者（流產≥2次）（高危組）檢測了ACA。20對正常生育夫婦作為正常對照（正常生育組），年齡23～35歲，平均（27.63±3.05）歲。所有入選者均為首次檢測血清AsAb、ACA。該研究經醫院倫理委員會批準。

1.2 試劑及檢測方法 抽取靜脈血3～5 mL，不抗凝，離心后分離出血清，立即測定或置于-20 ℃冰箱保存，測定時血清經解凍平衡至室溫。ACA與AsAb測定采用酶聯免疫吸附（ELISA）法，ACA檢測IgG、IgM及IgA三種抗體，AsAb檢測總抗體及IgM。ELISA試劑盒由歐蒙醫學診斷技術有限公司提供，酶標儀是DIAGNOSTIC.CRIFOLS.S.A.生產的TRITURUS變色龍全自動酶免系統，操作和結果判斷均按試劑盒說明書進行。

1.3 統計學處理方法 采用SPSS13.0軟件進行統計分析，組間統計學處理采用用x2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組血清AsAb的測定結果 1 326例不孕不育患者血清中AsAb陽性284例，占21.4%，其中IgM陽性179例，占13.5%。不孕不育組AsAb陽性率與正常生育組比較，差異有統計學意義（P<0.05）。結果見表1。2.2 各組血清ACA測定結果 1 756例不孕不育患者中ACA陽性643例，陽性率為36.6%；高危組ACA陽性471例，陽性率為41.8%；與正常生育組（5.0%）比較，差異均有統計學意義（P<0.05），結果見表2。

表1 不孕不育組與正常生育組AsAb陽性率比較 n（%）

表2 三組ACA陽性率比較 n（%）

3 討論

隨著檢驗技術的提高和現代生殖免疫學研究的進展，人們對免疫性不孕不育有了更多的認識。據文獻報道，除了遺傳因素、內分泌失調、感染、全身性疾病及生殖器官畸形外，免疫因素約占不孕不育原因的50%～70%[2]。免疫性不孕的檢查現已引起臨床的重視。

AsAb是機體產生的與精子表面抗原特異性結合的抗體，通過抑制精子穿透宮頸黏液，抑制精子獲能、頂體反應及減少精子存活率而降低受孕能力，甚至可導致不育[3]。目前認為AsAb是免疫性不孕不育的重要因素[4]，不孕不育患者AsAb陽性率明顯高于正常生育人群[5]。本研究檢測結果也顯示，不孕不育組AsAb陽性率為21.4%，明顯高于正常生育組的7.5%。

ACA是一種能夠與帶負電荷的磷脂相結合的自身免疫性抗體。研究表明，不明原因的流產、習慣性流產、宮內發育遲緩、胎盤早剝、不孕癥等生殖功能障礙性疾病均與ACA有關[6-8]。目前國內外研究一致認為，ACA陽性率在妊娠丟失以及妊娠并發癥等高危妊娠人群中比正常妊娠人群不孕不育中高得多[9]。ACA可能通過以下幾個途徑損害受孕能力[10]：ACA與卵巢組織磷脂成分結合形成復合物，干擾卵子形成和排出；ACA結合精子的磷脂成分，使精子凝集，失去活動力，導致精子獲能和穿透入卵功能下降；ACA與子宮內膜磷脂成分結合形成復合物，破壞受精卵著床； ACA作用于滋養細胞表面依賴性抗原，影響絨毛黏附、分化及細胞滋養層的浸潤，影響受精卵著床。本組ACA總陽性率為36.6%，高危組陽性率高于不孕不育組，為41.8%，兩組與正常生育組比較差異均有統計學意義（P<0.05），表明ACA的存在很可能是引起不孕不育，尤其是反復妊娠丟失的原因之一。

綜上所述，AsAb、ACA表達與不孕不育有密切關系，是導致不孕不育的重要免疫因素。檢測AsAb、ACA對不孕不育患者診斷具有重要參考價值。

[1] 樂杰.婦產科學[M].5版.北京:人民衛生出版社,2000:416-420.

[2] Schust D,Hill G. Recurrent pregnancy loss[M]//Novak’s Gynecology.13th ed.Philadephia:Lippincott William &Wilkins,2002:371-381.

[3] 湯敏中,蔡永林,鄭裕明,等.不孕及反復流產患者血清抗精子抗體與抗心磷脂抗體測定[J].實用醫技雜志,2006,13(14):2387-2388.

[4] 李笑梅,陳永華,湯明禮,等.精子活力與精子畸形率及抗精子抗體回歸分析[J].臨床檢驗雜志,1998,16(4) :251-252.

[5] Hatasaka H. Immunologic factors in infertility[J].Clin Obstet Gynecol,2000,43(4):830-843.

[6] 陸啟濱,任青玲.安子合劑治療抗心磷脂抗體陽性致先兆流產191例臨床研究[J].中華臨床醫學雜志,2006,11(5):35-36.

[7] 李楨理,談勇.抗磷脂抗體陽性導致反復自然流產的診治心得[J].南京中醫藥大學學報,2004,20(2):118-119.

[8] Birdsall MA,Lockwood GM,Ledger WL,et al. Antiphospholipid antibodies in women having in-vitro fertilization[J].Hum Reprod,1996,11(6):1185-1189.

[9] 白 靜.反復流產與抗心磷脂抗體關系的探討[J].中國優生與遺傳雜志,2004,12(2):58-59.

[10] 顧英,陸啟濱.抗心磷脂抗體與不孕不育關系的研究進展[J].河南中醫學院學報,2008,23(2):84-85.