藥品微生物限度檢查與藥品質量研究

王定貴

1 檢驗環境產生的影響

微生物限度檢查必須在一個單獨的潔凈度非常高的實驗室內才能進行，并且實驗室還必須配置單獨的空氣凈化系統。其潔凈度應大于等于10 000級，要求局部潔凈度達到100級，下水道不能安裝在操作間內。每次操作之前以及操作結束都必須用苯扎溴銨溶液(濃度為0.1%)或別的消毒液操作臺以及會受到污染的死角進行擦拭，再開啟層流凈化裝置。此外，在緩沖間必須配備洗手盆、無菌衣、口罩、帽以及鞋套等保護用品。同時在操作臺上配備藥物天平、火柴、乙醇燈以及橡皮乳頭等。確保潔凈實驗室溫度維持在18℃～26℃之間，室內的相對濕度應保持在40% ～60%之間。必須注意的是，檢驗所使用的陽性菌操作必須在單獨的陽性菌實驗室內，嚴禁與供試品檢驗共同使用一個潔凈實驗室［1］。

2 檢驗人員自身的影響

2.1 缺乏無菌方面的知識。大部分的藥品檢驗員覺得，藥典所要求的微生物限度標準通常較為寬松，所規定的菌落計數也不是很嚴格，從而影響了對檢品的染菌控制。

2.2 操作水平較差，操作不夠規范。很多藥品檢驗員對檢驗程序、實驗條件等并未進行嚴格控制，同時也未嚴格遵守藥典的操作規范實施檢驗，造成檢品檢驗結果出現錯誤。

3 檢品自身的影響

3.1 檢品自身的特性。檢品自身所具有的特性也會對微生物限度檢查的結果產生較大影響，主要包括兩點:①生態、自然環境具有的不確定性:藥品很容易受到外部微生物的污染，這種類型的污染具有多樣性、其污染程度也難以確定。②活體具有易變性的特點:藥典中的檢驗對象是活的微生物，這正是檢品的獨特之處。

3.2 檢品中的抑菌成分所產生的影響。很多中西都含有抑菌成分，盡管部分檢品所含的并非已知的抑菌成分，然而在菌落計數的時候發現這種成分對菌落有抑菌的功效，從而影響到對檢品的結果判斷。

3.3 檢品對培養溫度所產生的影響。之前的檢驗數據發現，針對部分含菌量非常高的檢品，將其置于30℃的溫度進行培養，菌落在七十二小時之內生長比較慢，因此需要在藥典規定的時間之內增加培養的時間。

4 培養基產生的影響

4.1 培養基的儲存條件以及培養基自身的質量，對于檢驗結果的準確性有直接影響。目前大部分的培養基采取的都是脫水培養基，因此，必須嚴格按照說明書中規定的條件進行儲存，避免培養基吸潮結塊從而產生污染。

4.2 培養基的滅菌處理。根據規定要求培養基應只允許實施一次蒸汽滅菌處理，已經經過高壓滅菌處理的培養基必須盡可能縮減重復加熱的時間，防止出現過度加熱，從而破壞了培養基的營養成份。

4.3 培養基的合理使用。將融化之后的培養基置于45℃ ～47℃的恒溫水浴鍋或者培養箱中進行保溫，直到開始使用。嚴格控制已配好的培養基經過滅菌處理之后的放置時間，其時間不宜過長，防止器水分散失以及出現染菌［2］。

5 菌種以及菌落計數

微生物限度檢驗過程中一種非常重要的生物資源就是菌種，并在使用中定期實施傳代，使用的標準菌種的傳代不能超出五代［3］。必須有專人負責，使用專用冰箱進行保存。如果菌落生長密集的話，計數容易出現誤差。因此，檢驗人員必須在菌落計數的時候認真觀察，仔細鑒別檢品的不溶輔料以及培養基所產生的氣泡等等，并利用適當的工具消除干擾，增加培養時間以便細心觀察。如果菌落成片生長或者重疊的話會對計數產生影響。按照藥典的規定，菌落如果出現蔓延生長成片，此時就不能計數。

為確保藥品微生物限度的檢驗結果能夠準確，盡量減少實驗誤差，必須做到如下幾點:操作環境必須滿足藥典要求;檢驗人員必須具備很強的責任心，嚴格遵守藥品檢驗技術規范中的要求進行操作;嚴格遵守滅菌程序，避免出現二次污染;對檢驗結果準確做出判斷。

［1］馬緒榮，蘇德模.藥品微生物學檢驗手冊.北京:科學出版社，2000:38.

［2］王睿，柴棟.細菌耐藥機制與臨床治療對策.國外醫藥:抗生素分冊，2003，24(3):97.

［3］楊靜.藥品微生物限度檢查法的影響因素分析.中國藥事，2008，22(12):1095-1096.