疾病預防控制機構微生物實驗室質量控制中的“5+1”

廖國東

（茂名市疾病預防控制中心，廣東 茂名 525000）

疾病預防控制機構微生物實驗室是疾病預防控制工作中一個十分重要的技術支持部門，主要承擔著各種突發公共衛生事件的應急檢驗、傳染病監測檢驗、食品及環境衛生微生物檢驗、醫療及托幼機構消毒效果監測檢驗、生活飲用水監測檢驗等任務[1]，所出具的檢驗結果是衛生行政執法、疾病預防控制工作的重要基礎和參考。如此重大的意義決定了疾病預防控制機構微生物實驗室必須時刻注重實驗室的質量控制工作，確保實驗結果及時準確和客觀公證。本文就是通過對影響疾病預防控制機構微生物實驗室實驗結果的重要因素和關健環節進行總結和分析，為各級疾病預防控制機構微生物實驗室的質量控制工作提供參考。

1 材料與方法

依據ISO/IECl7025：2005《檢測和校準實驗室能力的通用要求》[2]、《實驗室資質認定評審準則》（國認實函[2006]141號）[3]、《食品檢驗機構資質認定評審準則》（國認實[2010]49號）[4]的相關要求，結合本中心微生物實驗室的質量控制工作進行回顧性總結和分析。

2 結 果

2.1 實驗人員條件

2.1.1 客觀方面

微生物實驗室專業技術人員過硬的檢驗水平是保證實驗結果準確可靠的重要條件。因此，疾病預防控制機構微生物實驗室應根據工作需要，從專業、學歷和職稱等方面合理配置足夠的檢驗人員，滿足實驗的要求；檢驗人員上崗前應經過專業化的檢驗技術和操作技能培訓，并經考核合格后持證上崗。

2.1.2 主觀方面

疾病預防控制機構微生物實驗室的檢驗人員應有高度的責任心和嚴謹務實的工作態度，認真對待每一次實驗和每一份標本，最大限度地避免實驗誤差，確保檢測結果客觀公證、準確可靠。

2.2 實驗設備配置

2.2.1 合理配置所需的儀器設備

先進優良的實驗設備是微生物實驗室實現檢驗工作的基本硬件要求。因此，疾病預防控制機構微生物實驗室應根據本轄區的實際情況和檢測工作的需要正確配置所需的儀器設備，包括恒溫培養箱、冰箱與低溫冰箱、高壓蒸汽滅菌器、生物安全柜、實時熒光PCR擴增儀等，以滿足當前疾病預防控制工作的需要，特別是要滿足食物中毒、傳染病疫情等突發公共衛生事件應急檢驗的需要。

2.2.2 加強儀器設備的管理

為確保上述儀器設備能正常運行和高效地為實驗工作服務，應加強實驗儀器設備的管理工作，對影響實驗結果的設備要進行有效的控制，包括建立儀器設備檔案、確定儀器設備保管人、制作儀器設備操作規程（SOP文件）、加貼儀器設備狀態標識、規范儀器設備使用和維修的登記、對儀器設備進行檢定/校準和定期維護等。

2.3 實驗方法應用

2.3.1 盡量應用標準檢驗方法

應優先選用現行有效的國家、行業、地方、企業標準中規定的檢驗方法，并對這類標準檢驗方法進行學習和受控，編制標準操作規程（SOP文件），在實際工作中嚴格按照標準檢驗方法及其標準操作規程（SOP文件）開展實驗工作。

2.3.2 非標方法應進行驗證和審批

有部分實驗工作確實沒有現行有效的標準檢驗方法時，可從知名的技術組織或有關科技文獻、權威期刊公布的方法中選擇合適的方法，或者自行研制實驗方法。但這類方法在開始正式使用之前應按相關程序對該方法進行準確性和精密度的驗證和鑒定。

2.4 實驗環境建設

2.4.1 建設規范的生物安全實驗室

隨著我國各種重大傳染病監測力度的不斷加強，如艾滋病監測、流感監測、手足口病監測等，我國疾病預防控制機構微生物實驗室已經面臨越來越多的高生物危險性標本，這就要求疾病預防控制機構微生物實驗室必須建設規范的生物安全實驗室，實驗室的總體布局和各部位的安排要充分考慮減少潛在的對樣本的污染和對人員的危害，實驗室內部設置明顯的分區（污染區、半污染區、清潔區）標識，采取有效的隔離措施防止交叉污染，確保標本、實驗人員和外環境的安全。

2.4.2 規范實驗室的管理

根據工作流程和實驗要求對實驗室進行規范化管理，室內溫度控制在18～26℃，相對濕度控制在45%～65%；利用沉降法定期監測無菌室或潔凈實驗室的空氣潔凈度及紫外線強度，并要進行消毒效果監測，以保證符合樣品檢測所需的環境要求。

2.5 實驗材料選擇

2.5.1 選用合格的供應商

疾病預防控制機構微生物實驗室需要用到的實驗材料種類非常多，包括各種培養基、診斷血清、染色液、生化及免疫試劑、試管、一次性吸嘴等。這些實驗材料的生產廠家多、材料質量好差摻雜，稍有不慎就會造成錯誤的實驗結果。所以實驗材料供應商的選擇原則是國內外知名品牌和市場信譽度高的產品、有質量保證能力和服務保證能力的企業，并且要求供應商應出具三證資質證明（許可證、注冊證、經銷證）。

2.5.2 加強實驗材料的驗收

驗收人員在驗收實驗材料時，應仔細核對實驗材料名稱、規格、批號、生產日期、保質期及密封狀況等。對于一些特殊的實驗材料還應進行相關的驗收試驗，如革蘭氏染色液應分別用革蘭氏陽性和陰性標準菌株進行染色試驗；各種生化試劑和培養基應選用已知特性的標準菌株分別進行性能試驗等，符合要求者才可使用。

2.6 實驗過程質量控制

2.6.1 樣品的采集和流轉

實驗開始前應按實驗項目的要求正確采集樣品，并規范保存和運送，否則會對結果造成很大的影響，如進行艾滋病CD4檢測的血液樣品在采集時應使用抗凝劑且不能在冰箱保存、培養腦膜炎雙球菌的樣品應在室溫下運送和保存等等，只有熟悉各類樣品的采集方法和保存方式，才能確保下一步的實驗能順利進行下去。

2.6.2 實驗及實驗原始記錄

要嚴格按照微生物實驗的各項標準化操作規程進行實驗，不得隨意改動操作程序；嚴格進行無菌操作，并要做好生物安全防護；通過對照（包括空白、陰性和陽性對照）對PCR等分子生物學實驗和血清學試驗結果進行質量控制。 實驗過程應詳細書寫實驗原始記錄，記錄的信息包括檢驗步驟、檢驗結果、檢驗人、所用儀器設備、試劑、環境溫濕度等，以保證在必要時可以再現檢測過程。

2.6.3 數據處理及報告核發

實驗數據出來后應按規范進行科學的處理，包括引用正確的計量單位、有效數字的正確修約及平均值的計算等；實驗報告在發出之前要經過復核，校核無誤后，實驗室應及時編制、出具實驗報告。

2.6.4 實驗資料歸檔

全部實驗結束后，應及時將采樣記錄、實驗原始記錄、留底報告等有關實驗資料整理歸檔，按相關規定條件和期限保管。

3 討 論

實驗室質量控制是一項十分艱巨的工作，特別是對于疾病預防控制機構微生物實驗室而言，由于其主要從事的是產品、公共場所等樣品的衛生指標菌檢驗以及傳染病監測和突發公共衛生事件中相關病原微生物的檢驗工作，所出具的實驗結果是衛生行政執法、突發公共衛生事件有效應對的重要技術支持和依據，具有一定的法律效力，因而疾病預防控制機構微生物實驗室必須不斷加強實驗室的質量控制工作，確保實驗結果及時準確和客觀公證，這樣才能確保有關衛生行政執法能夠順利實施和確保突發公共衛生事件的有效應對。實際上，在疾病預防控制機構微生物實驗室的工作中，影響實驗結果質量的因素是很多的，本文所討論的“人、機、法、環、料+過程控制”這六方面是任何一個微生物實驗室都必須認真抓好的質量控制工作中的最基本的也是最關鍵的要素，只要這六方面做好了，整個實驗室的質量控制工作也就上檔次了。

[1]劉曉明,潘明亮.在經濟欠發達地區建設衛生檢驗中心實驗室的設想[J].國際醫藥衛生導報,2005,11(9):124-125.

[2]《檢測和校準實驗室能力的通用要求》(ISO/IECl7025:2005)[S].2005.

[3]《實驗室資質認定評審準則》(國認實函[2006]141號)[S].2006.

[4]《食品檢驗機構資質認定評審準則》(國認實[2010]49號)[S].2010.