疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制中的“5+1”

廖國東

（茂名市疾病預(yù)防控制中心，廣東 茂名 525000）

疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室是疾病預(yù)防控制工作中一個(gè)十分重要的技術(shù)支持部門，主要承擔(dān)著各種突發(fā)公共衛(wèi)生事件的應(yīng)急檢驗(yàn)、傳染病監(jiān)測檢驗(yàn)、食品及環(huán)境衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)、醫(yī)療及托幼機(jī)構(gòu)消毒效果監(jiān)測檢驗(yàn)、生活飲用水監(jiān)測檢驗(yàn)等任務(wù)[1]，所出具的檢驗(yàn)結(jié)果是衛(wèi)生行政執(zhí)法、疾病預(yù)防控制工作的重要基礎(chǔ)和參考。如此重大的意義決定了疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室必須時(shí)刻注重實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制工作，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果及時(shí)準(zhǔn)確和客觀公證。本文就是通過對影響疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重要因素和關(guān)健環(huán)節(jié)進(jìn)行總結(jié)和分析，為各級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制工作提供參考。

1 材料與方法

依據(jù)ISO/IECl7025：2005《檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求》[2]、《實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)認(rèn)定評審準(zhǔn)則》（國認(rèn)實(shí)函[2006]141號）[3]、《食品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定評審準(zhǔn)則》（國認(rèn)實(shí)[2010]49號）[4]的相關(guān)要求，結(jié)合本中心微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制工作進(jìn)行回顧性總結(jié)和分析。

2 結(jié) 果

2.1 實(shí)驗(yàn)人員條件

2.1.1 客觀方面

微生物實(shí)驗(yàn)室專業(yè)技術(shù)人員過硬的檢驗(yàn)水平是保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的重要條件。因此，疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)工作需要，從專業(yè)、學(xué)歷和職稱等方面合理配置足夠的檢驗(yàn)人員，滿足實(shí)驗(yàn)的要求；檢驗(yàn)人員上崗前應(yīng)經(jīng)過專業(yè)化的檢驗(yàn)技術(shù)和操作技能培訓(xùn)，并經(jīng)考核合格后持證上崗。

2.1.2 主觀方面

疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)人員應(yīng)有高度的責(zé)任心和嚴(yán)謹(jǐn)務(wù)實(shí)的工作態(tài)度，認(rèn)真對待每一次實(shí)驗(yàn)和每一份標(biāo)本，最大限度地避免實(shí)驗(yàn)誤差，確保檢測結(jié)果客觀公證、準(zhǔn)確可靠。

2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備配置

2.2.1 合理配置所需的儀器設(shè)備

先進(jìn)優(yōu)良的實(shí)驗(yàn)設(shè)備是微生物實(shí)驗(yàn)室實(shí)現(xiàn)檢驗(yàn)工作的基本硬件要求。因此，疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)本轄區(qū)的實(shí)際情況和檢測工作的需要正確配置所需的儀器設(shè)備，包括恒溫培養(yǎng)箱、冰箱與低溫冰箱、高壓蒸汽滅菌器、生物安全柜、實(shí)時(shí)熒光PCR擴(kuò)增儀等，以滿足當(dāng)前疾病預(yù)防控制工作的需要，特別是要滿足食物中毒、傳染病疫情等突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急檢驗(yàn)的需要。

2.2.2 加強(qiáng)儀器設(shè)備的管理

為確保上述儀器設(shè)備能正常運(yùn)行和高效地為實(shí)驗(yàn)工作服務(wù)，應(yīng)加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備的管理工作，對影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的設(shè)備要進(jìn)行有效的控制，包括建立儀器設(shè)備檔案、確定儀器設(shè)備保管人、制作儀器設(shè)備操作規(guī)程（SOP文件）、加貼儀器設(shè)備狀態(tài)標(biāo)識、規(guī)范儀器設(shè)備使用和維修的登記、對儀器設(shè)備進(jìn)行檢定/校準(zhǔn)和定期維護(hù)等。

2.3 實(shí)驗(yàn)方法應(yīng)用

2.3.1 盡量應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法

應(yīng)優(yōu)先選用現(xiàn)行有效的國家、行業(yè)、地方、企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的檢驗(yàn)方法，并對這類標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法進(jìn)行學(xué)習(xí)和受控，編制標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP文件），在實(shí)際工作中嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法及其標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP文件）開展實(shí)驗(yàn)工作。

2.3.2 非標(biāo)方法應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證和審批

有部分實(shí)驗(yàn)工作確實(shí)沒有現(xiàn)行有效的標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法時(shí)，可從知名的技術(shù)組織或有關(guān)科技文獻(xiàn)、權(quán)威期刊公布的方法中選擇合適的方法，或者自行研制實(shí)驗(yàn)方法。但這類方法在開始正式使用之前應(yīng)按相關(guān)程序?qū)υ摲椒ㄟM(jìn)行準(zhǔn)確性和精密度的驗(yàn)證和鑒定。

2.4 實(shí)驗(yàn)環(huán)境建設(shè)

2.4.1 建設(shè)規(guī)范的生物安全實(shí)驗(yàn)室

隨著我國各種重大傳染病監(jiān)測力度的不斷加強(qiáng)，如艾滋病監(jiān)測、流感監(jiān)測、手足口病監(jiān)測等，我國疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)面臨越來越多的高生物危險(xiǎn)性標(biāo)本，這就要求疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室必須建設(shè)規(guī)范的生物安全實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)室的總體布局和各部位的安排要充分考慮減少潛在的對樣本的污染和對人員的危害，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部設(shè)置明顯的分區(qū)（污染區(qū)、半污染區(qū)、清潔區(qū)）標(biāo)識，采取有效的隔離措施防止交叉污染，確保標(biāo)本、實(shí)驗(yàn)人員和外環(huán)境的安全。

2.4.2 規(guī)范實(shí)驗(yàn)室的管理

根據(jù)工作流程和實(shí)驗(yàn)要求對實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行規(guī)范化管理，室內(nèi)溫度控制在18～26℃，相對濕度控制在45%～65%；利用沉降法定期監(jiān)測無菌室或潔凈實(shí)驗(yàn)室的空氣潔凈度及紫外線強(qiáng)度，并要進(jìn)行消毒效果監(jiān)測，以保證符合樣品檢測所需的環(huán)境要求。

2.5 實(shí)驗(yàn)材料選擇

2.5.1 選用合格的供應(yīng)商

疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室需要用到的實(shí)驗(yàn)材料種類非常多，包括各種培養(yǎng)基、診斷血清、染色液、生化及免疫試劑、試管、一次性吸嘴等。這些實(shí)驗(yàn)材料的生產(chǎn)廠家多、材料質(zhì)量好差摻雜，稍有不慎就會造成錯(cuò)誤的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。所以實(shí)驗(yàn)材料供應(yīng)商的選擇原則是國內(nèi)外知名品牌和市場信譽(yù)度高的產(chǎn)品、有質(zhì)量保證能力和服務(wù)保證能力的企業(yè)，并且要求供應(yīng)商應(yīng)出具三證資質(zhì)證明（許可證、注冊證、經(jīng)銷證）。

2.5.2 加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)材料的驗(yàn)收

驗(yàn)收人員在驗(yàn)收實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，應(yīng)仔細(xì)核對實(shí)驗(yàn)材料名稱、規(guī)格、批號、生產(chǎn)日期、保質(zhì)期及密封狀況等。對于一些特殊的實(shí)驗(yàn)材料還應(yīng)進(jìn)行相關(guān)的驗(yàn)收試驗(yàn)，如革蘭氏染色液應(yīng)分別用革蘭氏陽性和陰性標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行染色試驗(yàn)；各種生化試劑和培養(yǎng)基應(yīng)選用已知特性的標(biāo)準(zhǔn)菌株分別進(jìn)行性能試驗(yàn)等，符合要求者才可使用。

2.6 實(shí)驗(yàn)過程質(zhì)量控制

2.6.1 樣品的采集和流轉(zhuǎn)

實(shí)驗(yàn)開始前應(yīng)按實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的要求正確采集樣品，并規(guī)范保存和運(yùn)送，否則會對結(jié)果造成很大的影響，如進(jìn)行艾滋病CD4檢測的血液樣品在采集時(shí)應(yīng)使用抗凝劑且不能在冰箱保存、培養(yǎng)腦膜炎雙球菌的樣品應(yīng)在室溫下運(yùn)送和保存等等，只有熟悉各類樣品的采集方法和保存方式，才能確保下一步的實(shí)驗(yàn)?zāi)茼樌M(jìn)行下去。

2.6.2 實(shí)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)原始記錄

要嚴(yán)格按照微生物實(shí)驗(yàn)的各項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，不得隨意改動操作程序；嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，并要做好生物安全防護(hù)；通過對照（包括空白、陰性和陽性對照）對PCR等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)和血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行質(zhì)量控制。 實(shí)驗(yàn)過程應(yīng)詳細(xì)書寫實(shí)驗(yàn)原始記錄，記錄的信息包括檢驗(yàn)步驟、檢驗(yàn)結(jié)果、檢驗(yàn)人、所用儀器設(shè)備、試劑、環(huán)境溫濕度等，以保證在必要時(shí)可以再現(xiàn)檢測過程。

2.6.3 數(shù)據(jù)處理及報(bào)告核發(fā)

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)出來后應(yīng)按規(guī)范進(jìn)行科學(xué)的處理，包括引用正確的計(jì)量單位、有效數(shù)字的正確修約及平均值的計(jì)算等；實(shí)驗(yàn)報(bào)告在發(fā)出之前要經(jīng)過復(fù)核，校核無誤后，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)及時(shí)編制、出具實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

2.6.4 實(shí)驗(yàn)資料歸檔

全部實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，應(yīng)及時(shí)將采樣記錄、實(shí)驗(yàn)原始記錄、留底報(bào)告等有關(guān)實(shí)驗(yàn)資料整理歸檔，按相關(guān)規(guī)定條件和期限保管。

3 討 論

實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制是一項(xiàng)十分艱巨的工作，特別是對于疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室而言，由于其主要從事的是產(chǎn)品、公共場所等樣品的衛(wèi)生指標(biāo)菌檢驗(yàn)以及傳染病監(jiān)測和突發(fā)公共衛(wèi)生事件中相關(guān)病原微生物的檢驗(yàn)工作，所出具的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是衛(wèi)生行政執(zhí)法、突發(fā)公共衛(wèi)生事件有效應(yīng)對的重要技術(shù)支持和依據(jù)，具有一定的法律效力，因而疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室必須不斷加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制工作，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果及時(shí)準(zhǔn)確和客觀公證，這樣才能確保有關(guān)衛(wèi)生行政執(zhí)法能夠順利實(shí)施和確保突發(fā)公共衛(wèi)生事件的有效應(yīng)對。實(shí)際上，在疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室的工作中，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量的因素是很多的，本文所討論的“人、機(jī)、法、環(huán)、料+過程控制”這六方面是任何一個(gè)微生物實(shí)驗(yàn)室都必須認(rèn)真抓好的質(zhì)量控制工作中的最基本的也是最關(guān)鍵的要素，只要這六方面做好了，整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制工作也就上檔次了。

[1]劉曉明,潘明亮.在經(jīng)濟(jì)欠發(fā)達(dá)地區(qū)建設(shè)衛(wèi)生檢驗(yàn)中心實(shí)驗(yàn)室的設(shè)想[J].國際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào),2005,11(9):124-125.

[2]《檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求》(ISO/IECl7025:2005)[S].2005.

[3]《實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)認(rèn)定評審準(zhǔn)則》(國認(rèn)實(shí)函[2006]141號)[S].2006.

[4]《食品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定評審準(zhǔn)則》(國認(rèn)實(shí)[2010]49號)[S].2010.