紅霉素顆粒和干混懸劑溶出度HPLC測定法的建立研究

劉彩霞

（許昌市疾病預防控制中心，河南 許昌 461000）

紅霉素顆粒和干混懸劑溶出度HPLC測定法的建立研究

劉彩霞

（許昌市疾病預防控制中心，河南 許昌 461000）

目的 研究建立紅霉素顆粒和干混懸劑溶出度HPLC測定法。方法 取出樣本，按溶解度測定法，用乙酸緩沖液900mL作為溶出介質，轉速是50r/min，操作45分鐘，取出溶液進行過濾，用續濾液作供試品；再取適量紅霉素對照品，必須精密測量，將溶出介質進行溶解并稀釋成0.08mg/mL溶液，將其作為對照溶液。按下述色譜條件，經精密測量取20μL兩中溶液，并注入色譜儀，記錄下色譜圖，計算每袋溶出量。結果 取藥廠提供的顆粒和干混懸劑，按溶出液檢測方法測定。結果表明，溶出度限度為80%。結論 采用專一性很強的HPLC測定法可以檢測干混懸劑和紅霉素顆粒，確定檢查干混懸劑以及紅霉素溶出度條件為：pH為5.5乙酸鹽緩沖液，槳法，濃度為0.038mmol/L緩沖液濃度，轉速為50r/min。

紅霉素顆粒；干混懸劑；溶出度；HPLC測定法

紅霉素是大環內酯類抗生素[1]，紅霉素顆粒和干混懸劑雖收藏在中國藥典中，但是并未記載如何檢查溶出度。紅霉素顆粒是混懸顆粒，國家藥典要求均要求對紅霉素顆粒以及干混懸劑制定出溶解度檢查法。紅霉素片等口服制劑用硫酸顯色法檢查，缺乏專一性。若用荷比色法代替硫酸顯色法則實驗結果不太理想。采用專一性很強的HPLC測定法檢測干混懸劑和紅霉素顆粒[2]，經HPLC測定紅霉素在鹽酸（0.01mol/L）中不穩定，故實驗采用了新方法以溶出介質。現報道如下。

1 試藥與儀器

采用智能藥物溶出儀，液相色譜儀（自動四元泵進樣系統和真空脫氣機）。蒸餾水、色譜純、磷酸二氫銨、乙酸鈉、分析純。中國藥品制品鑒定所提供紅霉素對照品，全國多家醫藥公司提供紅霉素顆粒，干混懸劑也由全國多家制藥公司特約贊助[3]。

2 方法和結果

2.1 測定溶解度方法

取出樣本，按溶解度測定法，用乙酸緩沖液900mL作為溶出介質，轉速是50r/min，操作45分鐘，取出溶液進行過濾，用續濾液作供試品；再取適量紅霉素對照品，必須精密測量，將溶出介質進行溶解并稀釋成0.08mg/mL溶液，將其作為對照溶液。按下述色譜條件，經精密測量取20μL兩中溶液，并注入色譜儀，記錄下色譜圖，計算每袋溶出量。

2.2 色譜條件

色譜柱：VP-ODS柱；流動相：磷酸二氫鈉溶液（0.067mmol/L）；流速為10mL/min；以210nm定為檢測波長；20微升是進樣量。

2.3 檢測溶出度方法

2.3.1 輔助干擾實驗

按紅霉素顆粒和干混懸劑比，制作空白樣本（不含主藥），取適量加乙酸鹽緩沖液，振蕩，稀釋到規定濃度后搖勻。過濾，按色譜條件進行測定，結果顯示輔料不干擾。

2.3.2 線性關系

經精密測量后取適量紅霉素對照品，用乙酸鹽緩沖液溶解后稀釋成濃度溶液，按色譜條件。結果顯示，對照品的溶液濃度范圍為20～200ug/mL，有良好線性關系。

2.3.3 溶液穩定性

取適量紅霉素對照品溶液，按上述測定方法，在0、3、6h內測定，結果為0.20%，且溶液6h內保持穩定。

2.4 樣品溶出度的測定方法

取藥廠提供的顆粒和干混懸劑，按溶出液檢測方法測定。結果表明，溶出度限度為80%。

3 討 論

3.1 如何選擇溶出介質

紅霉素等口服制劑檢查溶出度所用介質是鹽酸溶液（0.01mol/L）[4]，經實驗表明，紅霉素在鹽酸中不穩定，故需用其他的新溶出介質。紅霉素不溶于水，在鹽酸中溶解但是不穩定。參照同類克拉霉素檢查溶解度時用溶出介質，將緩沖液作溶出介質。試驗了磷酸緩沖液以及乙酸緩沖液，結果乙酸緩沖液比較理想。因此，選用乙酸鹽緩沖液作為試驗用的緩沖液。

3.2 緩沖液pH選擇

試驗緩沖液pH為6.5、6.0、5.5 、5.0 、4.0，結果顯示，pH值越大，制劑越容易崩解，紅霉素溶解度降低。但當pH為5.5時，干混懸劑以及紅霉素溶出度最大，所以將5.5作為緩沖液pH。

3.3 選擇緩沖液濃度

試驗緩沖液濃度為0.2、0.1、0.075、0.05、0.038、0.025mol/L，結果顯示緩沖液濃度越大，制劑越不易崩解。但當濃度為0.038mol/L時，干混懸劑以及紅霉素溶出度最大，故選0.038mol/L作為緩沖液濃度 考慮顆粒以及干混懸劑特點，采取槳法，轉速是50r/min。通過以上研究，確定檢查干混懸劑以及紅霉素溶出度條件為：pH為5.5乙酸鹽緩沖液，槳法，濃度為0.038mmol/L緩沖液濃度，轉速為50r/min。

[1] 王建,孟錚.羅紅霉素顆粒和干混懸劑溶出度HPLC測定法的建立[J].中國抗生素雜志,2009,34(8):489-492.

[2] 張煊,張春英,段宇,等.LC-MS-MS法研究琥乙紅霉素顆粒的生物等效性[J].中國新藥雜志,2008,17(13):1164-1167.

[3] Wang ZP,Yang Z,Ye J,et al.Capillary Electrophoresis-electrochemiluminescence Method for Simultaneous Detection of Azithrom ycin,Roxithromycin and Erythromycin Ethylsuccinate[J].Chemia Analityczna,2009,54(5):883-894.

[4] Sadeghi S,Jahani M.New Copper(II) Ion-Selective Membrane-Electrode Based on Erythromycin EthylSuccinate as a Neutral Ionophore[J].Analytical Lett,2009,42(13/15):2026-2040.

R978.1

B

1671-8194（2012）16-0083-02

10.15912/j.cnki.gocm.2012.16.319