蜂王漿口腔崩解片的制備工藝研究

陳三寶，郭孟萍

(宜春學院化學與生物工程學院，江西宜春336000)

蜂王漿是工蜂咽腺分泌出的一種乳白色或淡黃色漿狀物，味酸澀、辛辣、略甜，內含有極為豐富的營養物質及生物活性成分，能明顯的提高人體免疫力，長期服用對心血管系統疾病及糖尿病等都有很好的防治作用［1］?，F已上市的同類品種有膠囊劑、散劑及普通片劑，這些劑型對有吞咽困難或行動不便的老人來說具有一定的困難。為了方便不愿或不能吞咽或取水不便的患者服用，作者將其制成口腔崩解片。根據蜂王漿常溫下難保存的特點，為了能最大限度地保留其中的生物活性成分，本研究采用冷凍干燥法制備口腔崩解片，通過加入輔料的方法來解決其容易吸潮的問題，使制劑不需在干燥空氣中操作并易于保存和服用。

1 儀器與試藥

1.1 儀器設備WD-B藥物穩定性檢查儀(天津市天大天發科技有限公司);FD-18S冷凍干燥機(北京德天佑科技發展有限公司);BT25S電子天平(北京賽多利斯儀器系統有限公司);78X-2型片劑四用測定儀(上海黃海藥檢儀器有限公司);Aglient1100高效液相色譜配四元泵、紫外檢測器((美國安捷倫公司);SK6200HP超聲波清洗器(上?？茖С晝x器有限公司)。

1.2 試藥10-羥基-2-癸烯酸對照品(10-HAD，中國藥品生物制品檢定所，批號110812-200506);蜂王漿(江西汪氏蜜蜂園有限公司);聚乙二醇(PEG)4000(北京市海淀會友精細化工廠);阿斯巴甜(江蘇漢光甜味劑有限公司);對羥基苯甲酸甲酯、無水乙醇、鹽酸為分析純，甲醇為色譜純。

2 方法與結果

2.1 制備方法蜂王漿的生物活性成分對熱敏感，要求－18℃冰凍保存。但為了存儲、運輸的方便，常常把它制成凍干粉或常規固體劑型使用。本試驗選擇冷凍干燥法將蜂王漿直接制成口腔崩解片，不但能減少常溫下生物活性成分的損失，而且與其他劑型比較，縮短工藝流程，減少輔料用量。由于采用升華干燥，因此干燥后體積不變，疏松多孔，制得的片劑崩解快。其工藝過程:按試驗處方配制蜂王漿液適量，分裝于Φ18 mm PVC泡眼中(裝量1.8 mL)，置入冷凍干燥機的冷阱預凍4 h，然后放在電加熱擱板上，密閉，開啟真空泵，待真空壓力＜20 Pa時，加熱升溫，保持溫度在物料共熔點10℃以下，以2℃/h升溫進行升華，時間不少于20 h。再逐漸升溫至35℃，升溫時間控制在3～4 h左右。停機放氣，破壞真空，產品塑封［2］。

2.2 崩解時間測定方法取76 mm×26 mm×1.2 mm標準載玻片2片，透明膠帶黏合一端，打開載玻片，將1 cm×3 cm濾紙條置于載玻片黏合端1/3位置，長端約3 mm在載玻片外，藥片置于濾紙上，合上載玻片，上片載玻片自然壓在藥片上，開口端張開約2 cm;用滴管在濾紙露出載玻片端逐滴加37℃蒸餾水，滴水量為每分鐘1 mL，濾紙潤濕，凍干片吸水崩塌，載玻片開口端閉合至2～3 mm，視為崩解終點［3］。

2.3 10 -HAD測定方法10-HAD按照文獻方法進行測定［4］，取樣品0.2 g，精密稱定，置50 mL量瓶中，加0.03 mol/L鹽酸溶液1 mL和水2 mL，立即振搖使溶散，加無水乙醇30mL，邊加入邊輕輕搖動，再精密加入內標溶液10 mL，并用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，立即置超聲波浴中超聲15 min，取出，在3 000 r/min下離心10 min。取上清液用微孔濾膜過濾，吸取樣品溶液4 μL，注入色譜儀，按內標法計算含有量。

2.4 物料共熔點測定配制蜂王漿混懸液適量(含干物質30%，其中PEG4000質量分數為1%，阿斯巴甜質量分數為0.5%)，置于燒杯中，插入量程范圍為－80℃～60℃的結晶點溫度計和電極，先后置入冷凍干燥機的冷阱和電加熱板上，預凍至－54℃，再緩慢升溫。在溫度變化過程中，通過數字萬用表和溫度計測溫同步記錄電阻和溫度計的變化，繪出電阻溫度曲線圖(圖略)。結果在－24℃時電阻急劇變化，故確定該混合物的低共熔點在－24℃。為避免產品熔化而形成噴瓶，選擇－35℃以下為物料預凍溫度，升華過程應維持產品溫度不高于－30℃［5］。

2.5 輔料的選擇蜂王漿含水分62.5%～70.0%，干物質30.0%～37.5%，其中蛋白質占36%～45%，含轉化糖20%～45%，總脂類物質3.0%～6.0%，小分子物質(如維生素、礦物質、游離氨基酸)為2%～3%，此外還有一定量的未知物質［6］。經試驗，未加輔料的蜂王漿凍干片成形較好，片形完整，硬度適當，說明其中蛋白質、糖類等凍干后形成了足夠強度和彈性的骨架，因此可以不加骨架形成劑。但蜂王漿粉吸濕性強，加上凍干片具有高孔隙度，在通常情況下非常容易吸潮，吸濕后可引起物理化學性質的改變，不但給生產、存儲和使用帶來困難，還影響到制劑的有效性和安全性。因此要減少其吸濕性，就需要降低操作環境濕度或添加輔料。經試驗，加入適量PEG4000能降低蜂王漿凍干片的吸濕性［7］。同時加入質量分數0.5%阿斯巴甜為甜味劑可改善口感。

2.6 臨界相對濕度(CRH)的測定用蒸餾水溶解PEG4000，配成10%溶液，分別與蜂王漿混合，配制成固形物中PEG質量分數分別為0、0.5%、1%、3%、6%5種混合物，加阿斯巴甜0.5%，混勻，分裝于PVC泡眼中，按2.1項的方法制備成凍干片，取出，精密稱質量，分別置于WD-B藥物穩定性檢查儀中，設置溫度為25℃，相對濕度分別設置為10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%，每隔24 h稱量一次，直至凍干片吸濕平衡為止，按下式計算吸濕百分率。

式中，m1為吸濕前質量，m2為吸濕后質量。

以吸濕百分率為縱坐標，相對濕度為橫坐標作圖，得到不同比例PEG蜂王漿凍干片在不同濕度下的吸濕平衡曲線圖，結果見圖1。

由圖1中各曲線的兩端分別做切線，兩切線交點的橫坐標即為樣品的CRH，結果見表1。

圖1 蜂王漿與不同比例PEG混合物凍干片在不同濕度下的吸濕平衡曲線(25℃)

表1 蜂王漿與不同比例PEG混合物凍干片的CRH

2.7 物料含水量的優化物料中的水分經冷凍至－35℃以下結晶，然后水在高真空中升華，得到相似多孔結構的固體劑型。水分高，凍干后物料空隙大，但耗時且成本高。水分低，則凍干時間短，效率高。物料水分含有量不同對片劑質量會產生一定影響。用蒸餾水配制含不同水分的試樣，按2.1項方法制備樣品，測定崩解時間及硬度，結果見表2。

表2 不同水分原料對片劑產品質量的影響

2.8 工藝驗證表1和表2的結果顯示，試驗號2為最優配方。按此處方，稱取蜂王漿180 g，5%聚乙二醇4000溶液13 g、5%阿斯巴甜溶液7 g，混勻，按2.1項的方法制備成凍干片，物料預凍溫度為－35℃～－54℃。連續試制3批，按要求進行檢驗，結果顯示，崩解時間平均為7.5 s，硬度平均為79.3 N(n=6)。外觀平整光滑，說明該制備工藝穩定。

2.9 加速試驗穩定性考察取驗證實驗制備的樣品用鋁塑泡罩包裝，外包鋁塑袋，塑封，置于WD-B藥物穩定性檢查儀中，設置溫度30℃，RH 60%，放置6個月，于0、1、2、3、6月取樣，分別按穩定性考察項目及試驗方法進行檢驗，對10-HAD含有量、水分、崩解時限和硬度等考察項目進行測定，結果見表3。

表3 加速試驗考察結果

表3結果表明，經加速試驗考察6個月，各項考察指標與0月比較均無明顯變化，樣品基本穩定，因此本品處方及工藝條件穩定可行。

3 討論

3.1 由圖1和表1可看出，當蜂王漿凍干片在RH＞23%時，其吸濕率大幅度增加，通過作圖法得出其CRH為28%。實際制備時，環境濕度太低不但較難控制，且干燥的空氣不利于人員的操作，產品吸潮性強，為此考慮加入輔料來改善CRH，通過比較，以加1%PEG的較適當，其CRH為52%，較易控制，制備過程中控制環境相對濕度小于45%時，能使產品水分含有量小于3%。

3.2 由表2可看出，物料的水分含有量對蜂王漿凍干片的崩解時限和硬度有一定的影響，未經稀釋制備的凍干片崩解時限和硬度均符合要求，用水稀釋后制備的凍干片雖然崩解時間更短，但硬度更小，密度低，單位體積承載的活性成分少，且更耗時、耗能。綜合考慮，制備蜂王漿凍干片以不稀釋為佳，加入輔料后含水率以小于70%為宜。

3.3 PEG作為一種藥用合成高分子材料，易溶于水，化學穩定好，具有一定的表面活性，本實驗結果顯示，蜂王漿中加入適量PEG4000，能達到抗吸濕的作用，當質量分數小于1%時其CRH還不夠理想，當質量分數大于1%時其CRH變化不大，且高濕度下高比例PEG吸濕更嚴重。至于其機理是否是通過PEG與蜂王漿中主要成分分子上的基團以氫鍵的形式結合達到抗吸濕的作用，有待進一步研究。

采用凍干法制備的蜂王漿口腔崩解片，易吸潮，若用常規的泡罩包裝，會吸收空氣中的水分而收縮變形，使表面黏，質軟。因此，將泡罩封口后應考慮再用一層防潮密封材料(如鋁塑袋)并真空包裝，以確保存儲期間的穩定性。

［1］林玉慶.蜂王漿凍干粉直接壓片填充劑的選擇［J］.中成藥，2007，29(10):1531-1532.

［2］闞家忠，張德忠.蜂王漿冷凍干燥工藝［J］.食品機械，1990(3):26-28.

［3］董玲，吉春.凍干法制備口腔崩解片崩解檢查方法研究［J］.北京中醫藥大學學報，2006，29(7):494-501.

［4］GB9697—2008:蜂王漿［S］.

［5］崔清亮，郭玉明，程正偉.冷凍干燥物料共晶點和共熔點的電阻法測量［J］.農業機械學報，2008，39(5):65-68.

［6］蔡柳.蜂王漿主要功效成分的貯藏穩定性研究［D］.長沙:湖南農業大學，2008.

［7］王振華，田軍，孔秋玲，等.聚乙二醇影響葡萄糖吸濕性的初步研究［J］.中藥新藥與臨床藥理，2010，21(2):205-206.