膠體金法與ELISA法在檢測血液丙型肝炎病毒抗體中的比較

袁 杰 (湖北民族學院附屬民大醫院輸血科，湖北 恩施 445000)

丙型肝炎病毒(HCV)呈世界性分布〔1〕，目前臨床中尚無特效治療慢性丙型肝炎(丙肝)的藥物，且也無有效疫苗預防HCV感染，對健康人群進行篩選及早期臨床診斷成為當前有效控制丙肝傳播的重要手段〔2〕。膠體金法為上世紀80年代誕生的一種新技術，目前已在醫學檢驗中廣泛應用〔3〕。但有學者報道，膠體金法雖具有快速、簡便及無需檢測設備等優點，但其與ELISA檢測結果存在不符合情況，不符合率約為1%〔4〕。本文以HCV膠體金法與ELISA法在檢測血液HCV抗體中應用情況為研究點進行臨床觀察。

1 材料與方法

1.1 一般資料 2010年1月至2011年12月在我院住院丙肝疑似患者541例。其中208例急診入院，333例平診入院;男314例，女227例;年齡14～68歲，平均(37.8±21.6)歲。

1.2 標本來源 患者晨起空腹時，采用含有分離膠的HCV抗體檢測專用試管抽取靜脈血5 ml，抽取后及時離心，將分離的血清放置于－80℃冰箱內保存備檢。

1.3 試劑與儀器 HCV抗體ELISA檢測試劑盒為上海英科生物技術有限公司產品，批號：201001284;HCV抗體膠體金檢測試劑盒由天津九鼎生物制藥有限公司提供，批號為200910011。全自動FAME酶聯免疫分析系統和AT2樣品處理系統全為奧斯邦公司產品。嚴格按試劑盒說明操作。

1.4 判斷標準 ①膠體金法：檢測線和對照線均出現紫紅色條帶，或在檢測線隱約出現紫紅色條帶，判斷為陽性;只是對照線處出現紫紅色條帶，判斷為陰性;如檢測線和對照線均未出現色帶，判斷為無效。②ELISA法：以標本吸光度值和臨界值之比(S/CO)≥1判斷為陽性，＜1判斷為陰性。相對特異性、相對靈敏性及相對準確性計算方法參照李文勝等〔5〕報道。

1.5 統計學方法 應用SPSS14.8統計軟件進行分析，計數采用(χ2)檢驗，計量資料以s記錄，采用t檢驗。

2 結果

2.1 HCV膠體金與ELISA法檢測結果 ELISA檢測陽性樣本272份，陰性269份;膠體金法檢測陽性291份，陰性250份，與ELISA法檢測結果對比，膠體金法相對特異性為96.0%(261/272)，相對靈敏性為88.8%(239/269)，相對準確性92.4%(500/541)。

2.2 膠體金法與ELISA法檢測結果對照情況 膠體金法與ELISA法均陽性261例，均陰性239例，僅膠體金法陽性30例，僅ELISA法陽性11例。膠體金法與ELISA法檢測結果差異顯著(P＜0.05)。

2.3 膠體金法與ELISA法檢查時間和費用比較 膠體金檢查時間〔(22.4±4.6)min〕和費用〔(6.2±1.1)元〕顯著低于ELISA 法〔(118.2±21.1)min，(13.3±3.2)元〕(P ＜0.05)。

3 討論

目前臨床中HCV抗體的常用檢測方法有HCV膠體金法和ELISA法。ELISA法是利用酶催化底物反應的放大作用，提高特異性抗原、抗體免疫學反應的一種標記免疫技術〔6〕;而膠體金法是以膠體金作為標志物，利用層析作用檢測抗原、抗體反應。但膠體金和ELISA法在HCV抗體檢測中的應用情況，不同學者所持的觀點存在差別。孫宗立等〔7〕認為，二者靈敏度、特異性對比無顯著差異，但膠體金法快速、便捷，且不需特殊設備，更適合于臨床，而蔣樹海等〔8〕認為，ELISA法檢測抗HCV檢出率高出膠體金檢測法0.8%，臨床中應將ELISA法檢測作為最終結果，而膠體金法只應作為參考，對于降低輸血后醫療糾紛具有重要意義。

本研究資料表明，ELISA法對HCV抗體檢測的準確性優于膠體金法，分析發現，膠體金假陰性或假陽性情況的出現大多為人為及環境因素所致;如判斷結果的時間不夠充分、檢測環境溫度低及加樣量不足等〔9〕，上述因素都會造成反應不足而造成假性結果出現;同時過濾膜破損及判斷不仔細等也是影響結果的重要原因〔10〕。之所以不同學者對于膠體金法與ELISA法對照研究的結論存在偏差，其原因可能是研究過程中對人為及環境等上述因素的注重程度不同。相對于膠體金法，ELISA法對HCV抗體的檢測雖有較高的準確率，但其檢出相對費時，且花費高。

筆者認為，膠體金法應用于HCV檢測，操作便捷、省時及費用低，且有相對較高的特異性和靈敏度，可作為緊急和特殊需要情況下的初篩。但因存在諸多影響檢測結果的因素，可能出現漏檢和誤診，建議條件允許時應使用ELISA方法進一步確認，以降低醫院感染或醫療糾紛的發生率。

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6 張雄民，伍曉菲，劉宇寧，等.國產化學發光免疫試劑檢測血清HB-sAg的應用評價〔J〕.臨床輸血與檢驗，2009;11(1)：32-4.

7 孫宗立，谷 雷，李武威，等.膠體金免疫層析法檢測丙型肝炎病毒抗體的臨床應用評估〔J〕.陜西醫學雜志，2008;37(6)：728-9.

8 蔣樹海，楊發青，LEE Tony，等.運用免疫膠體金技術快速檢測丙型肝炎病毒抗體〔J〕.解放軍預防醫學雜志，2009;27(1)：30-3.

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10 侯曉箐，梁 艷，陳 潔，等.化學發光法檢測梅毒螺旋體特異性抗體內實驗評價〔J〕.檢驗醫學，2010;25(5)：365-7.