利可君合成工藝改進

儲 剛，林 輝，劉彩連，王正澤

南京長澳醫藥科技有限公司，南京 210038

利可君（Leucogen），化學名：2-（α-苯基-α-乙氧羰基-甲基）噻唑烷-4-羧酸，為半胱氨酸衍生物，服用后在十二指腸堿性條件下與蛋白結合形成可溶物質，迅速被腸所吸收，增強骨髓造血系統的功能。主要用于預防和治療各種原因引起的白細胞減少、再生障礙性貧血及血小板減少癥等。

該藥物目前尚無更優的替代藥物，臨床應用廣，市場需求量大。截止2012年4月，國內上市的利可君原料藥只有江蘇吉貝爾藥業有限公司一家生產，具有良好的產業化前景。

利可君的合成文獻比較少，國內方面主要為：①CN200410054101.3，本發明是由苯乙酸乙酯、甲酸乙酯、乙醚、金屬鈉經過縮合、酸化、環合而成的利血生原料，合成工藝路線見圖1。

圖1 利可君合成工藝路線

②CN200610037819.0，該發明涉及的合成工藝與CN200410054101.3相似，主要區別在于縮合反應過程中溶劑不同，為乙醚、乙醇、甲醇；縮合反應過程中縮合劑不同，為氫化鈉、氨基鈉、乙醇鈉、甲醇鈉、金屬鈉、氫化鉀、氨基鉀、乙醇鉀、甲醇鉀、金屬鉀。傅霖等[1]對利可君的工藝也做了局部的改進，使用乙醇鈉-石油醚體系，替代鈉-乙醚體系。以上報道的合成工藝，選用金屬鈉、乙醚和石油醚等，GMP車間應盡可能避免使用；另外，國內現有工藝中中間體α-甲酰基苯乙酸乙酯的合成涉及減壓蒸餾操作，對設備依賴性高（沸點在200℃以上），獲得的中間體為油狀物，其中起始原料苯乙酸乙酯的殘留量比較大，很難對其進行監控，不利于工業化生產。

國外對該工藝的研究文獻也非常少，V.G. Foshkin等[2]為解決中間體α-甲酰基苯乙酸乙酯的固化問題提供了方向，但選用的鈉-苯系統難以實現工業化生產，尚須進一步研究優化。

重現上述工藝,發現獲得的利可君成品中甲酯雜質容易超標（大于0.1%），不符合藥用要求，結構式見圖2。

圖2 甲酯雜質結構式

在上述參考文獻的基礎上，重點對中間體α-甲酰基苯乙酸乙酯的合成進行了優化。將中間體先生成鈉鹽，通過萃取，洗滌，除去殘余的苯乙酸乙酯和脂溶性雜質，然后游離獲得固態的α-甲酰基苯乙酸乙酯，改進后的工藝很好地解決了中間體固化的問題，且純度非常高，無苯乙酸乙酯殘留，繼而通過和L-半胱氨酸鹽酸鹽反應獲得的利可君成品，有關物質在0.1%以內，甲酯雜質也得到很好的控制（低于0.1%）。

1 儀器與試劑

Bruker AV-500型核磁共振儀；Vario MICRO型元素分析儀；YRT-3熔點儀；Agilent 1100 LC/MS質譜儀。

苯乙酸乙酯（工業級，純度≥99%，上海晶純試劑有限公司）；甲酸乙酯（CP，純度≥97%，南京化學試劑有限公司）；L-半胱氨酸鹽酸鹽 （工業級，純度≥99%，上?；菖d生化試劑有限公司）。

2 實驗操作

2.1 α-甲?；揭宜嵋阴サ暮铣?/h3>

在50 L反應釜中，加入異丙醚35 L和叔丁醇鈉（586 g，6.1 mol），開啟攪拌，混合均勻。水浴冷卻，控制內溫10℃以下，稱取苯乙酸乙酯1500 g（9.15 mol）和甲酸乙酯725 g（9.80 mol）混合均勻。滴加混合液，控制內溫低于10℃。滴加完畢，升溫，控制內溫15℃，保溫反應5小時，反應液最終為乳白色混懸液，加20 L純化水，溶解，用異丙醚20 L萃取2次，取水相，用稀鹽酸調pH值為1.0，降溫至0～5℃析晶，獲得1350 g，收率76.8%（文獻收率[2]：60%）。熔點：58.6～60.7℃。1H-NMR（300 MHz，DMSO-d6）：δ：10.95 （1H，s，CHO），7.86 （1H，s，Ar-CH），7.26（5H，m，Ar-H），4.10（2H，m，CH2），1.20（3H，t，CH3）。

2.2 利可君的合成

稱取L-半胱氨酸鹽酸鹽1200 g（7.61 mol），加至純化水15 L中，攪拌溶解，用碳酸氫鈉調節pH至2.2，過濾，將濾液吸至30 L反應釜中，開啟攪拌。將丙酮7.5L加至反應釜中，室溫攪拌下，將α-甲酰基苯乙酸乙酯1462 g（7.61 mol）的丙酮溶液滴加到反應釜中。滴加完畢，升溫回流，外溫控制在75～ 80℃，保溫反應1 h。冷卻，抽濾，用水和丙酮反復洗滌，真空干燥，即得利可君成品1050 g，收率：46.7%。熔點：157.4～158.9℃（文獻值[3]：155～160℃）。1H-NMR （300 MHz，DMSO-d6）：δ：12.91（1H，s，COOH），7.30（5H，m，Ar-H），5.26（1H，d，Ar-CH），4.08（2H，m，CH2），3.98（1H，m，S-CH-N），3.72（1H，d，α-CH），3.13（1H，m，NH），2.72（1H，m，β-CH2），1.13（3H，t，CH3）。元素分析：C：56.83%、H：5.82%、N：4.85%、S：10.89%（理論值：C：56.93%、H：5.80%、N：4.74%、S：10.86%）。ESI-MS：[M+H]+296.1，[M+ Na]+318.1（分子量：295.35）。

3 討 論

利可君工藝改進之后，避免減壓蒸餾工序，操作簡便，安全性高，便于工業化生產。中間體α-甲?；揭宜嵋阴サ氖章瘦^文獻收率[2]有明顯提高，中間體中幾乎不含苯乙酸乙酯，HPLC純度達到95%以上（面積歸一化法）。

獲得的產品質量較之前的有明顯的提升，有關物質能控制在0.1%以內，干燥失重低于3.0%，熾灼殘渣低于0.1%，甲酯雜質也得到了很好的控制（低于0.1%），含量不低于99.0%（按干燥品計算），很好地滿足了藥用要求。

[1] 傅 霖，鄭 虎.利血生合成工藝的改進[J].華西藥學雜志，2006，21（2）：176-7.

[2] Foshkin VG,Kovaleva NS,Naidis FB,et al.Improvement of the technological method for the synthesis of Leucogen [J].Khimiko-Farmatsev-ticheskiiZhurnal, 1976,10(8):106-7.

[3] 俞 鋒，孫國建，濮毅華.一種利血生原料和利血生片的制備方法：中國，200410054101.3[P].2005-06-22.