骨疼丸的質量控制

于曉濤 王佳

骨疼丸的質量控制

于曉濤 王佳

目的建立骨疼丸的質量控制方法。方法采用薄層鑒別法對延胡索、當歸、川芎進行定性鑒別，用HPLC測定樣品中天麻素的含量。結果薄層鑒別檢出延胡索和當歸;天麻素在0.204～1.020μg范圍內呈良好的線性關系，加樣回收率99.21%，RSD為1.62%。結論本法可用于骨疼丸的質量控制。

骨疼丸;質量控制;天麻素;HPLC

骨疼丸由天麻、當歸、川芎、延胡索、地黃、牛膝等數味中藥加工而成，具有益骨填髓，通絡止痛的功效，臨床上主要用于治療腰椎間盤突出癥，頸椎病，椎管狹窄，風濕及類風濕性關節炎，骨質增生等癥。該藥品為醫院制劑，在臨床上應用多年，療效確切。為了更好的控制該制劑的內在質量，本實驗對該藥品中的當歸、川芎、延胡索3味中藥進行了薄層鑒別研究，以天麻中的天麻素為指標進行了含量測定研究。

1 儀器與試藥

Agilent HP1100高效液相色譜儀，Agilent 110MWD紫外檢測器(美國)，SBC-100超聲波處理器。當歸對照藥材、延胡索對照藥材、延胡索乙素、川芎對照藥材均由中國藥品生物制品檢定所提供;甲醇為色譜純，水為重蒸水，其他試劑均為分析純。骨疼丸樣品由本院制劑室提供(批號:20110526、20110530、20110604)。

2 方法與結果

2.1 薄層鑒別

2.1.1 延胡索的薄層鑒別 取本品大蜜丸27g，切碎，加硅藻土9g，加甲醇60ml，超聲處理30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水2m l使溶解，加濃氨試液調制堿性，用乙醚提取3次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，殘渣加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為供試品溶液。另取延胡索對照藥材，同上法處理，制得對照藥材溶液。取缺延胡索藥材的處方，同法制成缺延胡索藥材陰性對照溶液。再取延胡索乙素對照品加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。參照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄ⅥB)試驗，吸取上述四種溶液各5μl，分別點于同一用1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以正丁烷-氯仿-甲醇(7.5∶4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，以碘蒸氣熏至斑點顏色清晰，在空氣中揮盡板上吸附的碘后，置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的熒光斑點。陰性對照無熒光斑點。

2.1.2 當歸的薄層鑒別［1］取本品9g，剪碎，加硅藻土3g，研勻，加石油醚(60℃ ～ 90℃)20ml，加熱回流 20min，放冷，濾過，濾液揮干，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液。取當歸對照藥材0.2g，加乙醚10ml，超聲處理10min，濾過，濾液揮干，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為對照藥材溶液。取缺當歸藥材的處方，按制備方法制成缺當歸藥材的陰性對照溶液。照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄ⅥB)試驗，吸取供試品溶液和對照藥材溶液及缺當歸陰性對照品溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(9∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的熒光主斑點。陰性對照無熒光斑點。

2.1.3 川芎的薄層鑒別［2］取川芎對照藥材1g，加乙醚20ml，加熱回流1h，濾過，濾液揮干，殘渣加乙醇2m l使溶解，作為對照藥材溶液。取缺川芎藥材的處方，按照骨疼丸的制備方法制成缺川芎藥材陰性對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄ⅥB)試驗，分別吸取鑒別［2］項下供試品溶液和對照藥材溶液及缺川芎陰性對照品溶液各10μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(3∶1)為為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的熒光主斑點。陰性對照無熒光斑點。

2.4 含量測定

2.4.1 色譜條件 色譜柱Krom asil C18，(5μm，200mm×4.6mm;固定相:十八烷基硅烷鍵合硅膠;流動相:水-甲醇(95∶5);流速:0.8ml/min;柱溫25℃，檢測波長:220nm，進樣量10μl。

2.4.2 對照品溶液的制備 取天麻素對照品適量，精密稱定，加50%甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加乙腈-0.05%磷酸溶液(2∶98)至刻度，搖勻，即得(每1ml含天麻素20μg)。

2.4.3 供試品溶液的制備 取本品(批號20110526)適量，切碎，研勻，加硅藻土9g，加水飽和的正丁醇60ml，超生處理30min，濾過，濾液蒸干，殘渣用水2ml溶解，加在D101型大孔吸附樹脂(內徑為1cm，柱高為16cm)上，先用水15ml以每分鐘0.5ml的流速洗脫，再用10%的乙醇40ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇2m l使溶解，作為供試品溶液。

2.4.4 線性關系考察 精密吸取天麻素對照品溶液2、4、6、8、10μl分別注入液相色譜儀，測定天麻素色譜峰面積。以天麻素的進樣量為橫坐標，峰面積為縱坐標，進行線性回歸，得回歸方程:Y=1757.4X-7.3(r=0.9999)。天麻素在0.204～1.020μg的范圍內具有良好的線性關系。

2.4.5 精密度試驗 精密吸取同一供試品溶液10μl，重復進樣5次，分別計算天麻素的質量分數，結果其 RSD為1.06%。

2.4.6 穩定性試驗 取同一待測骨疼丸樣品(批號20110526)溶液，每隔一定時間(0、1、2，4、8、12、24、36h)進樣，測定天麻素峰面積值，其RSD為1.85%。

2.4.7 重復性試驗 取同一批供試品(批號20110526)5份分別進樣測定計算天麻素的質量分數，其RSD=1.58%，平均含量為1.10mg/g。

2.4.8 回收率試驗 精密稱取已知含量的骨疼丸1g，分別精密加入天麻素對照品溶液(0.102mg/ml)3ml，按供試品溶液制備方法制備供試品溶液，分別進樣10μl，計算回收率，結果見表1。

表1 回收率試驗結果(n=5)

2.4.9 樣品含量測定 按含量測定方法，對3批樣品進行測定，用外標峰面積法計算含量，結果見表2。

表2 樣品含量測定結果(n=3)

3 討論

天麻作為本方劑中的主藥，具有息風止痙，平抑肝陽，祛風通絡之功，主要含有天麻素、天麻苷元、香草醇、香草醛、天麻多糖等多種成分［3］，而天麻素既是主要有效成分也是處方中的活性成分之一，所以生產中選擇以天麻素含量控制骨疼丸的質量。本文天麻素含量測定方法準確、靈敏、重現性好，能客觀地反映該制劑的內在質量。

［1］ 中華人民共和國國家藥典委員會編．中華人民共和國藥典．第一部．北京:中國醫藥科技出版社，2010.P124.

［2］ 中華人民共和國國家藥典委員會編．中華人民共和國藥典．第一部．北京:中國醫藥科技出版社，2010.P38.

［3］ 侯家玉，方泰惠．中藥藥理學．北京:中國中醫藥出版社，2009:189-191.

Guteng pill quality control

YU Xiao-tao，WANG Jia．Luohe Central Hospital of Henan Province Department of Pharmacy．The First Affiliated Hospital of LuoheMedical College，Luohe462000，China

ObjectiveTo establish a quality controlmethod for Guteng pills．Methodsusing TLC identification of Rhizoma Corydalis，angelica，Chuanxiongwere identified，using HPLCmethod for determination of the content of gastrodin．ResultsThe TLC detection of Corydalis yanhusuo and Angelica;gastrodin in 0.204～1.020μg range of linearity，recovery rate was 99.21%，RSD was1.62%．Conclusionthismethod can be used for guteng pill quality control．

Guteng pills;Quality control;Gastrodin;HPLC

462000河南省漯河市中心醫院(漯河醫專一附院)