公安辦案中大麻樹脂的前處理方法研究*

翟晚?xiàng)?/p>

（中國人民公安大學(xué) 刑事科學(xué)技術(shù)系，北京 100038）

對樣品進(jìn)行提取凈化是毒品分析的一個(gè)重要步驟，樣品前處理技術(shù)在現(xiàn)代分析方法中占有重要的基礎(chǔ)性地位。目前，對于大麻類毒品，常見的提取方法有溶劑提取或萃取法[1-12]、固相萃取法（主要適用于大麻油和體內(nèi)大麻檢材）[13-15]等，液相微萃取、固相微萃取等方法雖然應(yīng)用前景廣闊，很有發(fā)展?jié)摿Γ珜τ诖舐闃渲⒉粚?shí)用。當(dāng)前國內(nèi)外廣泛應(yīng)用的大麻前處理方法是溶劑提取或萃取法，較為簡便易行。為確定一個(gè)針對大麻樹脂類檢材，高效、省時(shí)、簡便、低成本的前處理方法，服務(wù)于公安辦案工作，筆者對提取過程的各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行了細(xì)致考察和優(yōu)化，最終確定了大麻樹脂樣品前處理的首選方法。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器和試劑

Prominenece UFLC液相色譜儀（日本島津公司）；十萬分之一電子分析天平（瑞典METTLER公司）；EYELA型渦旋混合器（日本EYELA公司）；KQ3200型超聲振蕩器（昆山市超聲儀器有限公司）；臺式高速冷凍離心機(jī)（德國SIGMA公司）；SynergyUV型純水制備系統(tǒng)（美國Millipore公司）。

鹽酸溶液、正己烷為分析純，北京化學(xué)試劑公司；甲醇（優(yōu)級純 國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；乙醇、氯仿、乙酸乙酯、乙醚均為分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；石油醚、苯、甲苯，分析純，北京長海化工廠；環(huán)己烷（A.R.天津市福晨化學(xué)試劑廠）；異丙醇（A.R.北京化工廠）；四氫呋喃（色譜純 美國TEDIA公司）；庚烷（色譜純 東京化成工業(yè)株式會社）；乙腈（色譜純 美國Fisher Scientific公司）；去離子水（蒸餾水再經(jīng)Millipore公司SynergyUV型純水系統(tǒng)制備）；大麻樹脂樣品（案件中收繳）。

1.2 色譜條件

色譜柱：島津Inertsil ODS-SP（4.6mm×150mm,5μm）色譜柱；流動相：乙腈-水；梯度程序：以乙腈-水比例70∶30為初始濃度，有機(jī)相濃度以2%·min-1升至 96%·min-1。柱溫：40℃；流速：1mL·min-1。

2 結(jié)果與討論

2.1 溶劑的選擇

取大麻樹脂樣品適量，剪碎，精確稱量30.00mg（±0.30mg）的樣品 14份，置于 1～14號試管中，依次分別加入10mL水、甲醇、乙醇、氯仿、石油醚、苯、甲苯、乙酸乙酯、正己烷、環(huán)己烷、異丙醇、乙醚、四氫呋喃、庚烷，1500r·min-1振蕩 30min，離心，各取3mL上清液，N2吹揮干后，各用5mL甲醇定容。用相同色譜方法進(jìn)樣分析，得到1～14號樣品中3種大麻組分的色譜峰面積與樣品稱量重量的比值，所得結(jié)果見圖1。

圖1 不同溶劑對四氫大麻酚、大麻二酚和大麻酚提取效率的影響Fig.1 Effects of different solvents on the extraction efficiency of tetrahydrocannabinol,cannabidiol and cannabinol

綜合考慮基線穩(wěn)定、雜質(zhì)含量、成本高低、毒性有無等因素，選擇甲醇作為提取溶劑。

2.2 萃取溶劑酸堿性的考察

考慮到大麻酚、大麻二酚、四氫大麻酚均為酚類物質(zhì)，設(shè)計(jì)了兩組實(shí)驗(yàn)以考察提取溶劑的酸堿度對提取效率的影響。

第一組實(shí)驗(yàn)：用不同pH值溶液直接提取法。設(shè)計(jì)如下實(shí)驗(yàn)，精確稱量30.00mg（±0.30mg）的大麻樹脂樣品7份，編號1～7號。將0.01mol·L-1的HCl溶液稀釋，配制 HCl濃度分別為 0.00001、0.0001、0.0005、0.001、0.005mol·L-1的 HCl- 甲醇溶液。1 號樣品溶于10mL甲醇溶液，2～6號樣品分別溶于10mL上述配制好的不同濃度的HCl-甲醇溶液，7號樣品溶于以9mL甲醇稀釋的1mL pH值9的NH3·H2O溶液，將1～7號試管1500r·min-1振蕩15min后，離心取上清液，用相同色譜條件進(jìn)樣分析，得到1～7號樣品中3種大麻組分的含量數(shù)據(jù)見圖2（1～6號樣品）。

圖2 HCl濃度對四氫大麻酚、大麻二酚和大麻酚提取效率的影響Fig.2 Effects of HCl concent on the extraction efficiency of tetrahydrocannabinol,cannabidiol and cannabinol

結(jié)果表明，酸性條件對3種大麻組分的提取效率和保留時(shí)間均無顯著影響，堿性環(huán)境（7號樣品）使保留時(shí)間稍有減小，但對提取效率仍無顯著影響。由于本實(shí)驗(yàn)使用的色譜柱pH值耐受范圍為2～7.5，故未嘗試在其它更加極端的溶劑環(huán)境下提取。

第二組實(shí)驗(yàn)：反提法。考慮到酚羥基具有弱酸性，可能與強(qiáng)堿結(jié)合成鹽，實(shí)驗(yàn)中對反提法進(jìn)行了考察。但結(jié)果表明反提法效果不佳，對于大麻樹脂，反提法不能達(dá)到提高對目標(biāo)組分的提取效率，對雜質(zhì)的凈化作用也很有限，相反，由于反提法增加了操作步驟，目標(biāo)組分更易在操作過程中損失，增大了誤差和不穩(wěn)定性，故放棄反提法。

2.3 振蕩、超聲輔助方式的比較

為比較振蕩輔助萃取、超聲輔助萃取的效果并獲得最佳條件參數(shù)，實(shí)驗(yàn)中考察了超聲時(shí)間、振蕩轉(zhuǎn)速和振蕩時(shí)間對3種大麻組分提取效率的影響，所得結(jié)果見圖3～5。

圖3 超聲時(shí)間對四氫大麻酚、大麻二酚和大麻酚提取效率的影響Fig.3 Effects of time of ultrasound-assisted oscillation on the extraction efficiency of tetrahydrocannabinol,cannabidiol and cannabinol

圖4 振蕩轉(zhuǎn)速對四氫大麻酚、大麻二酚和大麻酚提取效率的影響Fig.4 Effects of speed of oscillation on the extraction efficiency of tetrahydrocannabinol,cannabidiol and cannabinol（t:15min）

圖5 振蕩時(shí)間對四氫大麻酚、大麻二酚和大麻酚提取效率的影響Fig.5 Effects of time of oscillation on the extraction efficiency of tetrahydrocannabinol,cannabidiol and cannabinol（speed:1500r·min-1）

結(jié)果表明，振蕩、超聲兩種方式相比，均無特別顯著優(yōu)點(diǎn)，差別僅在于超聲更省時(shí)一些。而如果沒有超聲儀，振蕩也能獲得相同的效果。經(jīng)過比較，保守選擇1500r·min-1振蕩10min或超聲5min作為輔助萃取方式。

此外，為考察浸泡過夜是否會提高有效組分回收率的問題，設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)，精確稱量30.00mg（±0.30mg）的大麻樹脂樣品 6份，編號 1～6號，1～3號分別溶于10mL甲醇，手動振蕩數(shù)次，靜置過夜（12小時(shí)）后，將4～6號分別溶于10mL甲醇，將1～6號同時(shí)以1500r·min-1振蕩10min，用相同色譜條件分離分析，結(jié)果表明兩種方法等效，所以無需浸泡過夜，可以直接使用溶劑提取-超聲波或渦旋振蕩輔助法作為大麻樹脂的前處理方法。

2.4 膜過濾實(shí)驗(yàn)

液相色譜由于使用的是填料柱，如果樣品溶液中含有大量的不溶解物質(zhì)，在進(jìn)行色譜柱分離時(shí)會產(chǎn)生沉淀現(xiàn)象，堵塞色譜柱，致使柱壓增高，影響色譜柱的使用壽命，為了防止此類情況，在進(jìn)樣之前均會進(jìn)行過濾操作，一般使用的是商品化的濾膜。為了考察常用過濾膜對研究毒品是否存在吸附、反應(yīng)等現(xiàn)象，試驗(yàn)中比較了不同尺寸過濾膜的過濾效果，見表1，結(jié)果表明，過濾操作以及濾膜的尺寸對大麻的3種主要組分無影響，因此，在定量過程中，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液可不隨樣品進(jìn)行過濾操作，并且可采用直徑較小的過濾膜以增加對固體顆粒的過濾效果。

表1 過濾對大麻3種組分提取效率的影響Tab.1 Effects of filtration on extraction efficiency of the three constituents of cannabis

3 結(jié)論

最終確定的大麻樹脂前處理方法是：以甲醇作為提取溶劑、1500r·min-1振蕩10min或超聲5min，離心取上清液或?yàn)V膜過濾。該方法快速省時(shí)、簡便高效，適用于大麻類毒品的提取和檢測，尤其適用于辦案過程中批量快速檢測大麻樹脂檢材的情況。

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