銀杏內(nèi)酯B滴丸制備工藝優(yōu)化研究＊

王 雷，朱光宇，陳衛(wèi)東，王 念，吳 勇，汪電雷，汪 寧，張 華(1.安徽中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究室，安徽 合肥 230031；2.安徽省中藥制劑工程技術(shù)研究中心，安徽 合肥 230022；3.安徽省中藥研究與開(kāi)發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，安徽 合肥 230022； .馬鞍山市中心醫(yī)院，安徽 馬鞍山 23000；.馬鞍山市藥品檢驗(yàn)所，安徽 馬鞍山 23000；.馬鞍山市海克康源生物科技有限公司，安徽 馬鞍山 23000)

銀杏內(nèi)酯(ginkgolide)是銀杏葉的主要活性成分之一，目前發(fā)現(xiàn)其含有6個(gè)單體化合物，分別是銀杏內(nèi)酯A，B，C，M，J以及白果內(nèi)酯。銀杏內(nèi)酯B是迄今發(fā)現(xiàn)的自然界中最強(qiáng)的血小板活化因子拮抗劑，具有清除氧自由基、抑制脂質(zhì)過(guò)氧化等作用，可用于治療老年性癡呆、阿爾茨海默癥以及提升記憶力等[1]。但銀杏內(nèi)酯B不溶于水，體內(nèi)吸收差，生物利用度不高。筆者參考相關(guān)文獻(xiàn)并結(jié)合前期申請(qǐng)的專利[2]，研制了滴丸劑型，以改善銀杏內(nèi)酯B的水溶性，提高生物利用度，增加穩(wěn)定性，減少刺激性，掩蓋不良?xì)馕?；與傳統(tǒng)劑型相比，滴丸劑表面積大、溶出速度快、劑量準(zhǔn)確、服用方便[3－4]?，F(xiàn)將銀杏內(nèi)酯B滴丸的制備工藝優(yōu)化研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

PL601－S型電子天平，AB135－S型電子分析天平(梅特勒－托利多儀器上海有限公司)；自制滴丸裝置(科大玻璃儀器廠)；CS501型超級(jí)恒溫水浴鍋(中華人民共和國(guó)重慶設(shè)備廠)；ZB－ID智能崩解儀(天津鑫洲科技有限公司)。銀杏內(nèi)酯B原料藥(成都福潤(rùn)德實(shí)業(yè)有限公司)；聚乙二醇4000(PEG 4000)，聚乙二醇6000(PEG 6000)，均為天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所產(chǎn)品；液體石蠟(江蘇強(qiáng)盛化工有限公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 滴丸制備

將基質(zhì)在水浴上加熱熔融，加入藥物，攪拌混勻，保溫下倒入滴丸機(jī)中，保溫至藥液溫度達(dá)到要求為止，以適宜的滴速滴入互不相溶的冷卻劑中，冷卻固化成丸，取出擦干，即得。

2.2 單因素考察

基質(zhì)：參考文獻(xiàn)和相關(guān)專利，根據(jù)銀杏內(nèi)酯B的理化性質(zhì)以及預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，可知聚乙二醇的成型性較好，PEG 4000和PEG 6000均具有良好的分散力和較大的凝聚力，所制得的滴丸硬度、流動(dòng)性和耐熱性均較好。

藥物與基質(zhì)配比：將銀杏內(nèi)酯B與基質(zhì)按不同的比例混合，制備滴丸。藥物與基質(zhì)比例過(guò)大時(shí)，稠度偏大，不易滴制；藥物與基質(zhì)比例過(guò)小時(shí)，患者服用量過(guò)多，依從性差，也不經(jīng)濟(jì)。通過(guò)參考文獻(xiàn)和相關(guān)專利，結(jié)合大量預(yù)試驗(yàn)，最終確定藥物與基質(zhì)比例為1∶1.5～1∶4。

冷卻液：制備滴丸時(shí)，熔融的液滴成形、凝固于不相溶的冷卻液中，因此冷卻液對(duì)滴丸的質(zhì)量影響很大。常用冷卻液有二甲基硅油、液體石蠟、植物油、水溶液、茶油和乙醇溶液等。預(yù)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，液體石蠟制備的滴丸不易粘連、成型性較好，因此選用液體石蠟。

滴距：滴距主要影響滴丸的圓整度[5]。滴距過(guò)小，滴液來(lái)不及收縮，丸型不圓整；滴距過(guò)大，液滴容易成扁形或跌散而產(chǎn)生細(xì)粒。因此兩者的滴距不宜超過(guò)5 cm。通過(guò)大量預(yù)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，滴距為2.5 cm可滿足要求。

2.3 質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)確定

滴丸的質(zhì)量考核項(xiàng)目包括客觀定量標(biāo)準(zhǔn)(如溶散時(shí)間、丸重差異等)和外觀質(zhì)量指標(biāo)(如圓整度、硬度、色澤均一等)。但上述指標(biāo)帶有一定的主觀隨意性，為減少誤差，將各具體考核指標(biāo)由差至優(yōu)，分別記為1～5分，將各“主觀指標(biāo)”加和后，作為滴丸的“外觀質(zhì)量”與“溶散時(shí)間”“丸重差異”等客觀指標(biāo)綜合評(píng)分，共同評(píng)價(jià)滴丸的質(zhì)量。其中外觀質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)包括以下幾個(gè)。硬度：由軟至硬分為1～5級(jí)(手按，由多人獨(dú)自評(píng)分，取平均值)；圓整度：從不圓到圓分為1～5級(jí)，用滴丸最短徑/最長(zhǎng)徑來(lái)表示，比值在0.95以上為5分，0.9～0.95之間為4分，0.85～0.9之間為3分，0.8～0.85之間為2分，0.8以下為1分；拖尾情況：由差到好計(jì)分為1～5分；粘連情況：由差到好計(jì)分為1～5分。

2.4 工藝優(yōu)化正交試驗(yàn)

通過(guò)預(yù)試驗(yàn)和參閱相關(guān)文獻(xiàn)[2，6]，選擇基質(zhì)的種類及配比(因素A)、料溫(因素B)、冷卻液溫度(因素C)、藥物與基質(zhì)比例(因素D)4個(gè)因素，取3個(gè)水平，采用L9(34)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，對(duì)影響滴丸的成型因素進(jìn)行考察，優(yōu)選最佳成型工藝。結(jié)果見(jiàn)表1至表3。

表1 成型工藝優(yōu)化因素水平表

可見(jiàn)，影響滴丸外觀指標(biāo)的因素由大到小為B＞C＞A＞D，優(yōu)化條件為A1B1C2D3，即基質(zhì)為PEG 4000，藥液溫度為80℃，冷卻液溫度為10℃，藥物∶基質(zhì)=1∶4；影響滴丸丸重差異(越小越好)的因素由大到小為C＞D＞B＞A，優(yōu)化條件為A3B3C3D1，即基質(zhì)為PEG 4000∶PEG 6000=1∶1，料液溫度為85℃，冷卻液溫度為15℃，藥物∶基質(zhì)=1∶2；影響滴丸崩解時(shí)限(越小越好)的因素由大到小為D＞C＞A＞B，優(yōu)化條件為A3B1C2D2，即基質(zhì)為PEG 4 000∶PEG 6000=1∶1，料液溫度80℃，冷卻液溫度10℃，藥物∶基質(zhì)=1∶3。綜合考慮，因素A對(duì)丸重差異和崩解時(shí)限的影響均較小(為第3或第4影響因子)，結(jié)合實(shí)際及試驗(yàn)選擇PEG 4 000∶PEG 6 000=1∶1作為優(yōu)化條件；因素B為外觀指標(biāo)的主要影響因素，因素B選80℃；因素C為影響丸重差異的主要因素，是外觀指標(biāo)和崩解時(shí)限的第2影響因素，故因素C選15℃；因素D是崩解時(shí)限的主要影響因素，是外觀指標(biāo)和丸重差異的次要因素，故因素D選藥物∶基質(zhì)=1∶3。優(yōu)化后的條件為A3B1C3D2，即基質(zhì)為PEG 4000∶PEG 6000=1∶1，料液溫度為80℃，冷卻液溫度為15℃，藥物∶基質(zhì)=1∶3。

表2 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果

表3 方差分析結(jié)果

2.5 質(zhì)量控制

外觀質(zhì)量：所制滴丸為白色球形固體，圓整飽滿，成型性好，色澤均勻，硬度較好，無(wú)拖尾、粘連現(xiàn)象。

重量差異：取供試品20丸，稱定總質(zhì)量，求得平均丸重，再精密稱定每粒丸重。根據(jù)2010年版《中國(guó)藥典(二部)》規(guī)定，超出重量差異限度的不得多于2丸，并不得有1丸超出限度1倍。滴丸劑重量差異限度見(jiàn)表4，本次試驗(yàn)中銀杏內(nèi)酯B滴丸的重量差異見(jiàn)表5。可見(jiàn)，每粒滴丸的丸重在0.03g與0.1g之間，重量差異限度均符合藥典規(guī)定。

表4 質(zhì)量差異限度標(biāo)準(zhǔn)

崩解時(shí)限：參照2010年版《中國(guó)藥典(二部)》，崩解時(shí)限檢查方法為，將吊籃通過(guò)上端的不銹鋼軸懸掛于金屬支架上，不銹鋼絲網(wǎng)的篩孔內(nèi)徑應(yīng)為0.425mm；浸入1 000mL燒杯中，并調(diào)節(jié)吊籃位置使其下降時(shí)篩網(wǎng)距燒杯底部25mm，燒杯內(nèi)盛有溫度為(37±1)℃的水，調(diào)節(jié)水位高度使吊籃上升時(shí)篩網(wǎng)在水面下15mm處；升降的金屬支架上下移動(dòng)距離為(55±2)mm，往返頻率為30～32次/min。除另有規(guī)定外，取供試品6粒，依法檢查，應(yīng)在30 min內(nèi)全部溶散，包衣滴丸應(yīng)在1 h內(nèi)全部溶散。如有1粒不能全部溶散，應(yīng)另取6粒復(fù)試，均應(yīng)符合規(guī)定。6批銀杏內(nèi)酯B滴丸的崩解時(shí)限分別為5.2，8.9，7.4，10.8，13.0，6.6min，均在規(guī)定的范圍內(nèi)(＜30min)，所制滴丸符合要求。

2.6 最佳工藝驗(yàn)證試驗(yàn)

取適量銀杏內(nèi)酯B的原料藥，按照優(yōu)化后的條件，即基質(zhì)為PEG 4 000∶PEG 6 000=1∶1，料液溫度為80℃，冷卻液溫度為15℃，藥物∶基質(zhì)=1∶3，制備滴丸。隨機(jī)抽取樣本進(jìn)行考核，結(jié)果丸重差異變異系數(shù)為1.87%，平均崩解時(shí)限為4.5min，所制滴丸外觀質(zhì)量好、丸形圓整、色澤均一、硬度較好，證明該工藝條件穩(wěn)定可行。

表5 銀杏內(nèi)酯B滴丸的質(zhì)量限度表

3 討論

本試驗(yàn)確立了滴丸成型的最佳工藝，并從影響滴丸的外觀指標(biāo)、丸重和崩解時(shí)限3個(gè)方面考察了各因素的影響，確立了銀杏內(nèi)酯B滴丸的最佳條件，按該工藝條件制成的滴丸符合2010年版《中國(guó)藥典》的規(guī)定。

試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，藥物在加入基質(zhì)前應(yīng)使基質(zhì)充分融化，然后再加入藥物，攪拌混勻，可保證成品顏色均勻、光滑，藥物與基質(zhì)均一。此外，冷卻液的溫度對(duì)滴丸的成型性有很大的影響，溫度太低會(huì)導(dǎo)致成型的丸粒不圓整，溫度高了會(huì)使丸粒凝固不完全，最終擠壓在一起，出現(xiàn)扁平的現(xiàn)象；冷凝管的長(zhǎng)度同樣會(huì)影響滴丸的外觀，冷凝管太短，丸粒冷凝不完全便會(huì)凝結(jié)在一起，或者出現(xiàn)扁平的現(xiàn)象。

與膠囊劑相比，滴丸制備工藝簡(jiǎn)單，生產(chǎn)周期較短，能夠提高藥物生物利用度。銀杏內(nèi)酯B屬于難溶性藥物，而滴丸的制備方法是固體分散制備中的熔融法，藥物在基質(zhì)中以微細(xì)狀態(tài)存在，有利于藥物的溶出和吸收，提高其生物利用度。

[1]Giovanni D’Andrea，Gennaro Bussone，Gianni Allais，at al.Efficacy ofginkgolide B in the prophylaxis of migraine with aura [J].Neurol Sci，2009，30：121－124.

[2]陳衛(wèi)東，劉曉東，謝 林，等.銀杏內(nèi)酯B滴丸及其制備方法：中國(guó)，ZL 200510134353.1[P].2009－05－27.

[3]胡向青，杜 青.滴丸劑的研究進(jìn)展[J].藥學(xué)進(jìn)展，2004，28(12)：537.

[4]鄭 鑫，邱曉莉，秦少容，等.中藥滴丸劑的研究進(jìn)展[J].中國(guó)中藥雜志，2003，28(4)：292.

[5]王秋玲，楊信定.中藥滴丸劑的研究進(jìn)展[J].微量元素與健康研究，2006，23(5)：56－58.

[6]紹勝榮，孫 俊，吳 明.正交試驗(yàn)法優(yōu)選銀杏內(nèi)酯滴丸成型工藝研究[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2007，14(7)：54－55.