大黃水提液防治小鼠癲癇的實驗研究

張文風，楊 焱

(1.長春中醫藥大學，吉林 長春 130117；2.吉林省腫瘤醫院，吉林 長春 130012)

大黃為蓼科植物掌葉大黃(RheumpalmatumL.)、唐古特大黃(RheumtanguticumMaxim.exBalf.)或藥用大黃(RheumofficinaleBaill.)的干燥根及根莖，前兩種習稱“北大黃”,后一種習稱“南大黃”[1]。2005版《中國藥典》一部確定其有瀉熱通腸,涼血解毒，逐瘀通經功能。借助《普濟方》數據庫管理系統[2]，以大黃為關鍵詞進行檢索，發現大黃復方用于一切癇32方，由此推測，大黃單味藥物可能對癲癇也有一定的治療作用。國內學者[3-4]研究也提示大黃可減輕腦水腫，預防腦缺血，臨床應用并對癲癇有防治作用。本研究通過MES、戊四唑、士的寧驚厥模型對大黃的抗癲癇作用進行初步研究。

1 材料與方法

1.1 藥物 大黃水提液(大黃購于吉林大藥房,由長春中醫藥大學藥學院王淑敏教授鑒定。水提液制備方法：大黃100 g，水煎煮3次，第1次10倍量，煎煮2 h；第2次和第3次8倍量,煎煮2 h，合并煎液，濾過，濃縮至每毫升含生藥1 g，備用。)

1.2 動物 昆明種小鼠，體質量20～26 g，雌雄各半(吉林大學實驗動物中心提供,合格證號：SCXK(吉)2003-0007)。

1.3 試劑 戊四唑 (北京三博遠志生物技術有限公司)；士的寧注射液(天津市人民制藥廠)；苯妥英鈉片(東北制藥總廠)。

1.4 儀器 YSD-4G藥理生理實驗多用儀(安徽淮北正華生物儀器廠)。

1.5 方法

1.5.1 MES癲癇小鼠 采用YSD-4G藥理生理實驗多用儀，將齒狀夾以生理鹽水浸濕后,夾住小鼠雙耳尖部，預實驗確定95%以上動物產生強直性驚厥發作的參數為100 V，4 Hz，以后肢強直性伸直為驚厥指標，于實驗前1天進行篩選。取符合驚厥標準的昆明種小鼠50只，隨機分為模型對照組、大黃高、中、低劑量組和苯妥英鈉組。按表1劑量灌胃給藥,模型對照組給予等溶積的蒸餾水，給藥30 min后，按上述參數，給予電刺激1次,計算各組小鼠發生驚厥的只數。結果見表1。

1.5.2 戊四唑癲癇小鼠 預實驗確定95%以上動物出現陣發性抽搐的戊四唑劑量為93 mg/kg。小鼠50只，隨機分為模型對照組，大黃高、中、低劑量組，苯妥英鈉組,按表2劑量灌胃給藥。模型對照組給予等體積的蒸餾水，給藥后30 min，腹腔注射相應致驚劑量戊四唑，觀察藥物抗戊四唑致驚療效，結果見表2。

1.5.3 士的寧癲癇小鼠 預實驗確定95%以上動物出現陣發性抽搐的士的寧劑量為0.7 mg/kg。取健康小鼠50只，隨機分為模型對照組，大黃高、中、低劑量組，苯妥英鈉組,按表3劑量灌胃給藥。模型對照組給予等體積的蒸餾水，給藥后30 min,皮下注射相應致驚劑量士的寧，觀察藥物抗士的寧致驚療效。結果見表3。

1.5.4 行為觀察 癲癇發作的分級標準參照Racine標準[5]:0級：無反應；Ⅰ級：節律性嘴或面部抽動；Ⅱ級：點頭或甩尾；Ⅲ級：單肢抽動；Ⅳ級：多肢抽動或強直；Ⅴ級：全面性強直——陣攣發作。連續觀察30 min，記錄小鼠癲癇發作潛伏期。

2 結果

2.1 大黃對MES所引起癲癇小鼠的影響 見表1。

表1 大黃對MES所引起小鼠驚厥發生率的影響

2.2 大黃對戊四唑癲癇小鼠的影響 見表2。

2.3 大黃對士的寧癲癇小鼠的影響 見表3。

表2 大黃對小鼠戊四唑驚厥模型的影響(±s)

表3 大黃對小鼠士的寧驚厥模型的影響(±s)

3 討論

癲癇是最常見的神經系統疑難病癥之一，是由于反復發作的神經元超同步放電所致的短暫發作性腦功能失調。臨床上可見到運動、感覺、意識、行為和植物神經等功能障礙。無論是用其研究癲癇發病機制，還是開發抗癲癇藥物以及探索新的治療途徑，都需要理想的癲癇動物模型，許多新的進展和突破亦多直接或間接來自動物模型的研究結果。一般認為，最大電休克發作模型是較好的癲癇大發作模型，若一藥物對該實驗具有強大對抗作用，則其臨床上對癲閑大發作常有效；戊四唑主要作用于腦干和大腦，是癲癇小發作常用模型；士的寧模型常被認為是頑固性癲癇的良好模型。

現代藥理研究[6]發現,大黃的有效成分主要集中在蒽醌類化合物，包括大黃酸、大黃素、大黃酚、蘆薈大黃素、大黃素甲醚等，具有瀉下、抗炎、抗菌、保肝利膽、降血脂、抗腫瘤、抗免疫抑制等多方面的作用。

本研究選用幾種癲癇模型從不同側面對大黃抗癇作用進行研究,發現大黃可減少MES發作次數，延長戊四唑、士的寧所致小鼠驚厥的發作潛伏期、改善癇性發作程度，并縮短持續時間，提示大黃水提液對癲癇有一定的防治作用，并存在一定的量效關系，其防治機理有待于進一步研究。

[1]中華人民共和國藥典委員會.中國藥典[M].北京:化學工業出版社,2005:17-18.

[2]梁茂新,黃會生.數據庫管理系統(計算機軟件著作權登記證書軟著登字第0002781號)[Z].北京:中華人民共和國國家版權局,1998.

[3]GU Jian-wen,HASUO H,TAKEYA M,et al.Effects of emodin on synaptic transmission in rat hippocampal CA1 pyramidal neurons in vitro[J].Neuropharmacology,2005,49(1): 103-111.

[4]GU Jian-wen,ZHENG Chong-xun,ZHANG Ai-hua,et al.Effects and wavelet spectral entropy analysis of rhubarb extracts rhein on synaptic transmission in rat hippocampal ca1 area in vitro[J].Chinese Medical Journal,2005,118(10):817-823.

[5]RACINE R.Modification of seizure activity by elecyrical stimula-tion:Ⅱ.Motor seizure[J].Electroencephalography and Clinical Neurophysiology,1972(3):281.

[6]李敏,李麗霞,劉渝,等.大黃研究進展[J].世界科學技術(中醫藥現代化),2006,8(4):34-39.