c-myc和Skp2在口腔鱗狀細胞癌中的表達及關系

趙靜 南欣榮

[摘要] 目的 探討c-myc、Skp2在口腔鱗狀細胞癌（OSCC）中的表達及其相互關系。 方法 采用免疫組化SP法檢測c-myc、Skp2在OSCC患者癌組織中的表達。 結果 在OSCC組織中，c-myc與Skp2陽性表達明顯高于正常口腔組織，差異有統計學意義（P ＜ 0.05）。OSCC的陽性表達與OSCC的病理分級及臨床分期有關；與患者性別、年齡及腫瘤發生部位無關。c-myc與Skp2呈正相關。 結論 c-myc與Skp2蛋白的表達參與了OSCC的發生與發展，為OSCC的診斷及預后提供重要依據。

[關鍵詞] OSCC；c-myc；Skp2；免疫組化技術；蛋白表達

[中圖分類號] R739.85[文獻標識碼] B[文章編號] 1673-9701（2012）16-0067-02

The expression and relationship between c-myc and Skp2 in oral squamous cell carcinom

ZHAO Jing NAN Xinrong

Department of Stomatology, the First Hospital of Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, China

[Abstract] Objective To detect the expression of c-myc and Skp2 in oral squamous cell carcinoma (OSCC), and there may be relationship between the different installments. Methods The expression of c-myc and Skp2 was detected in OSCC and normal oral tissues by immunohistochemistry method. Results In OSCC the positive of c-myc and Skp2 was significantly higher than that in normal oral tissues, the result had statistical significance (P ＜ 0.05). The expression of positive in OSCC was closely related to cell differentiation, pathological grade and clinical stage. There was no relationship between gender, age and position. The expression levels of c-myc and Skp2 protein were positively correlated in OSCC. Conclusion C-myc and Skp2 might play an important role in the progression and development of OSCC. Take an important evidence for the diagnosis and prognosis of OSCC.

[Key words] Oral squamous cell carcinoma; c-Myc; Skp2; Immunohistochemistry method; Protein expression

在我國，口腔頜面部的惡性腫瘤中口腔鱗狀細胞癌（OSCC）最多，多發生在40～60歲。研究發現OSCC的發生與致癌因子作用密切相關。c-myc可促進細胞惡變并導致腫瘤的發生。Skp2作為細胞周期中重要的調節因子與c-myc相互作用可以活化靶基因[1]。 目前有關c-myc與Skp2在OSCC的表達及相關性研究較少，本實驗采用sp法，對2006年1月～2010年12月間手術治療的患者進行探討。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1．1 試劑c-myc小鼠抗人多克隆抗體，Skp2兔抗人多克隆抗體（均為武漢博士德公司）。

1.1.2 標本來源選取山西醫科大學第一醫院口腔頜面外科2006年1月～2010年12月間手術治療的患者。其中76例為OSCC標本切片，10例為正常口腔黏膜。所有患者入院前均未接受過任何治療，術后均有明確病理診斷。年齡33～78歲，男42例，女 34例。參考臨床分期（UICC,2002）標準，病變在舌部35例，牙齦16例，頰黏膜13例，唇7例，腭5例。高-中分化61例，低分化15例；Ⅰ、Ⅱ期57例，Ⅲ、Ⅳ期19例。

1.2 方法

1.2.1 實驗方法標本經石蠟包埋、切片、SP染色。Skp2一抗濃度1∶100，熱修復2 min；c-myc一抗濃度1∶100，熱修復90 s，均4℃過夜，DAB顯色，復染，樹脂封片。

1.2.2 圖像及統計學方法生物顯微鏡觀察，在腫物區內高倍鏡下（×400）選至少10個視野，100個細胞，請經驗豐富的醫師，在各病理標本中找出細胞核或胞漿為棕黃色的細胞作為標準，染色程度大于等于標準細胞即為陽性細胞，取平均值作為陽性細胞率；c-myc＞10% ，Skp2＞20%為陽性[2]。用SPSS 17.0軟件進行統計分析，P ＜ 0.05有統計學意義。兩蛋白各臨床參數間用χ2檢驗；兩指標間用Spearman相關分析。

2 結果

2.1 Skp2與c-myc在OSCC與正常口腔組織中的表達

Skp2細胞核陽性，少數表達在胞漿（圖1）；c-myc胞核或包漿為陽性（圖2）。c-myc與Skp2陽性表達明顯高于正常口腔黏膜組織，差異具有統計學意義（P ＜ 0.05）。見表1。

2.2 Skp2、c-my與OSCC臨床病理關系

通過檢測，可見低分化陽性表達高于中-高分化；Ⅲ、Ⅳ期陽性表達高于Ⅰ、Ⅱ期。OSCC的陽性表達與患者性別、年齡及腫瘤發生部位無關。見表2。

3 討論

研究表明，Skp2能特異性識別磷酸化底物并介導其泛素化降解。Skp2表達水平在G0/G1期非常低,而在S期表達增加。Skp2的表達受轉錄及轉錄后水平雙重調節,作為細胞周期中重要的調節因子,能特異性識別磷酸化底物并介導其泛素化降解。myc作為一種癌蛋白轉錄因子,與細胞的生長、分化、增殖相關。

本研究結果顯示，Skp2在OSCC中的陽性表達明顯高于正常口腔黏膜組織，差異具有統計學意義（P ＜ 0.05）。表明Skp2的過表達可能對OSCC的發生發展起重要作用。

Kaplan-Meier研究發現，Skp2高表達生存率顯著降低。GSTAIGER[3]發現，上皮分化程度越低，Skp2表達越高。本實驗在對OSCC中Skp2病理表達的研究時發現，Ⅲ、Ⅳ期陽性表達高于Ⅰ、Ⅱ期，表明Skp2會影響OSCC的分化與轉移。研究發現c-myc基因在BL細胞中出現c-myc與Ig位點之間易位，組成一個高轉活性的重排基因，啟動c-myc轉錄，使 c-myc表達增強，細胞惡變，導致腫瘤發生。Skp2作為細胞周期中重要調節因子,能特異性識別磷酸化底物并介導其泛素化降解。Skp2與c-myc相互作用，可提高c-myc所引起的S期酶轉化，從而活化靶基因。c-myc可促進SCF Skp2 對p27的泛素化降解[4]。本研究顯示，c-myc在OSCC中陽顯高于正常組織。病理分級表明，陽顯與OSCC分化程度及臨床分期呈正相關。有人發現[5]Skp2既參與了myc的蛋白降解,同時也是myc的轉錄協同因子，Skp2以myc依賴的方式增強c-myc誘導的S期轉變,活化靶基因，myc誘導的轉錄也依賴Skp2，兩者共同參與腫瘤的形成。研究顯示，Skp2與c-myc在OSCC中呈正相關表達，可推斷Skp2、c-myc與OSCC有相關性。

[參考文獻]

[1]vonder Lehr N，Johansson S，Wu S，et al. The F-box protein Skp2 participates in c-myc-regulated[J]. Mol Cell，2003，11（5）：189-200.

[2]Hershko D，Bornstein G. Inverse relation between levels of p27（kipl） and of its ubiquitin ligase subunit Skp2 in colorectal oscc[J]. Cancer，2001，91（9）：45-51.

[3]Rangarajan A，Hong SJ，Weinberg RA． Species-and cell type-specific requirements for cellulartransformation[J]． Cancer Cell，2004，6（2）：171-183．

[4]Guo Y，Niu C，Breslin P，et al. c-Myc-mediated control of cell fate in megakaryocyte-erythrocyte progenitors[J]. Blood，2009，114（10）：2097-2106.

[5]鄒叔彪，劉庭波，陳志哲. C-myc小干擾RNA對急性粒細胞白血病HL-60細胞增殖凋亡的影響[J]. 中國實用內科雜志，2007，27（Suppl 1）：94.

（收稿日期：2012-03-13）