E-cadherin和P120ctn在子宮頸癌發生發展中的意義

熊中堂 江慶萍 彭娟 熊漢真

[摘要] 目的 探討E-cadherin和P120ctn在子宮頸癌中的表達及在其發生發展中的意義。 方法 采用免疫組化方法檢測子宮頸癌組織中E-cadherin和P120ctn的表達情況，以正常子宮頸黏膜及子宮頸上皮內瘤變（CIN）黏膜作為對照。 結果 E-cadherin和P120ctn在子宮頸癌中的表達下調率高于二者在正常子宮頸黏膜及CIN黏膜中的表達下調率；E-cadherin和P120ctn在伴有淋巴結轉移的子宮頸癌中的表達下調率高于二者在不伴有淋巴結轉移的子宮頸癌中的表達下調率；E-cadherin和P120ctn在浸及深肌層的子宮頸癌中表達下調率高于二者在未浸及深肌層的子宮頸癌中的表達下調率。 結論 E-cadherin和P120ctn表達下調和子宮頸癌發生有關；E-cadherin和P120ctn表達下調促進子宮頸癌的侵襲與轉移。

[關鍵詞] 子宮頸癌；E-cadherin；P120ctn；免疫組化

[中圖分類號] R737.33 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2012）01-092-02

The Significance of E-cadherin and P120ctn Protein in the Tumorigenesis and Development of Cervical Carcinoma

XIONG Zhongtang JIANG Qingping PENG Juan XIONG Hanzhen

Department of Pathology, the Third Affiliated Hospital of Guangzhou Medical College, Guangzhou 510150, China

[Abstract] Objective To investigate the expression ofE-cadherin and P120ctn protein in cervical carcinoma and its significance in the tumorigenesis and development of cervical carcinoma. Methods Immunohistochemistry was used to detect the expression of E-cadherin and P120ctn protein in normal cervical epithelia, CIN cervical epithelia and cervical carcinoma. Results The down-regulation expression rate of E-cadherin and P120ctn in cervical carcinoma was higher than in normal cervical epithelia and CIN cervical epithelia; The down-regulation expression rate of E-cadherin and P120ctnin cervical carcinoma with lymph node metastases was higher than those wich without lymph node metastases; The down-regulation expression rate of E-cadherin and P120ctnin cervical carcinoma that invasive outer cervix was higher than those which invasive inter cervix. Conclusion The down-regulation expression of E-cadherin and P120ctn may promote the tumorigenesis and development of cervical carcinoma; The down -regulation expression of E-cadherin and P120ctn may promote the invasion and metastasis of cervical carcinoma.

[Key words] Cervical carcinoma; E-cardherin; P120ctn; Immunohistochemistry

1 資料與方法

1.1臨床資料

收集廣州醫學院第三附屬醫院病理科2008~2011年存檔的子宮頸癌標本58例和CIN黏膜40例，并與39例正常的子宮頸黏膜做對照。子宮頸癌中，年齡27～81歲，中位年齡48歲；高-中分化鱗癌13例，低-未分化鱗癌45例；伴淋巴結轉移18例，不伴淋巴結轉移40例。所有子宮頸癌患者手術前均未接受過放化療及其它針對腫瘤的治療。

1.2 方法

鼠抗人E-cadherin單克隆抗體（即用型）購自北京中杉金橋生物技術公司；鼠抗P120ctn單克隆抗體（濃縮型）及Max Vision試劑盒均購自福州邁新公司。

所有標本均用4%的中性甲醛固定，常規脫水，石蠟包埋，切片厚4 μm，行HE和免疫組化染色。免疫組織化學標記采用Max Vision二步法，高溫高壓抗壓修復，DAB顯色。

1.3 結果

E-cadherin及P120ctn蛋白陽性為鱗狀上皮細胞膜線性棕黃色顆粒沉著，根據著色強度及顯色細胞比例將染色結果分-，+，++和+++級：① 按切片中細胞顯色有無及深淺評分：無顯色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分；② 根據顯色細胞的比例計分：<25%為0分，20%～50%為1分，50%～75%為2分，>75%為3分。每例結果的積分=（1）×（2）。按積分高低分為：0分為陰性(-)，1~3分為弱陽性（+），4~6分為中等陽性（++），7~9分為強陽性（+++）。

1.4 統計學處理

采用SPSS12.0統計軟件進行χ2檢驗和等級相關分析。

2 結果

2.1 E-cadherin和P120ctn的表達情況

在正常子宮頸黏膜組織中，E-cadherin和P120ctn均呈連續線性定位與上皮細胞膜，低表達率分別為5.23%、2.56%；CIN病理中二者的表達定位與在正常黏膜中的定位模式相同，呈線性定位于細胞膜，低表達率均為2.50%；在子宮頸癌中，E-cadherin和P120ctn低表達率分別為63.79%、60.34%。E-cadherin呈線性定位于細胞膜，但P120ctn有47.37%的病例異位表達于細胞漿。兩兩比較發現，E-cadherin和P120ctn在子宮頸癌中的低表達率高于二者在正常子宮頸黏膜及CIN中的低表達率，二者在正常和CIN中的低表達率之間無明顯差別。

2.2 E-cadherin和P120ctn蛋白表達與子宮頸癌臨床病理特征的關系

分析E-cadherin和P120ctn表達與臨床病理特征發現，E-cadherin在年齡大于50歲的患者中的低表達率高于在年齡小于或等于50歲中的低表達率，P120ctn的表達情況與年齡無關。E-cadherin和P120ctn在伴有淋巴結轉移的子宮頸癌中的低表達率高于在不伴有淋巴結轉移的子宮頸癌中的低表達率。本研究還發現E-cadherin和P120ctn表達和腫瘤侵襲深度有關，侵襲深度越深低表達率越高。E-cadherin和P120ctn表達與腫瘤的分化無關。

2.3 E-cadherin和P120ctn在子宮頸癌中表達的相關性

在子宮頸癌中，E-cadherin低表達與P120ctn低表達呈顯著正相關（P<0.05）。

3 討論

P120ctn是鏈蛋白家族中重要成員，定位于上皮細胞膜連接處，它與E-cadherin胞內肽段胞膜端（the juxtamen brane domain，JMP）結合構成黏蛋白-鏈蛋白復合體（cadherin catenin complex,CCC），其在上皮細胞間粘附、結構完整性、極性及信號轉導中起重要作用[1]。諸多研究發現CCC 成員之一表達異常將引起功能改變而促進腫瘤的發生及發展。

研究發現E-cadherin及P120ctn在腫瘤中表達異常，如胃癌、乳腺癌、前列腺癌、結腸癌[2]。歐海玲[3]等也發現E-cadherin和P120ctn在鼻咽癌中異常表達明顯高于正常鼻腔黏膜上皮。這些結果提示E-cadherin和P120ctn的異常表達可能破壞上皮細胞的正常結構及細胞間粘附而促進癌的發生。本研究通過免疫組織化學方法研究E-cadherin、P120ctn在正常子宮頸黏膜、CIN黏膜及子宮頸癌中的表達，結果顯示在子宮頸癌中，二者表達較正常子宮頸及CIN黏膜中的表達下調；二者在正常子宮頸及CIN黏膜中的表達沒有差別。說明P120ctn、E-cadherin表達下調并非子宮頸腫瘤發生的早期事件；二者表達下調促進子宮頸CIN發展為子宮頸癌。其原因可能是P120ctn, E-cadherin表達異常影響CCC的正常結構，破壞了子宮頸瘤變細胞間的粘附而突破基底膜發展為癌。Bellovin等發現P120ctn在早期結腸癌細胞中表達和定位發生改變，并且與E-cadherin表達及定位異常相關[4]。本研究也發現同樣現象，在47.37%的子宮頸癌中P120ctn出現了胞漿表達。有的學者認為其原因可能是E-cadherin首先表達缺失，P120ctn無法與E-cadherin結合，導致P120ctn異位表達于胞漿[5]。據此推測P120ctn表達異位可能影響CCC的正常結構及功能而引起子宮頸癌的發生。

宮頸癌的侵襲與轉移是患者致死的首要原因，而上皮細胞間質轉化（EMT）是上皮細胞獲得運動和轉移的重要原因[6]。子宮頸癌細胞侵襲與轉移首先必須脫離癌細胞之間的粘附膜，而E-cadherin及P120ctn形成CCC對維持細胞間粘附及抑制EMT起重要作用。Pavis等認為P120ctn的表達改變會導致細胞黏附與增殖失調，從而誘發腫瘤侵襲與轉移 [7]。研究發現在肺癌中P120ctn異常表達與腫瘤分化程度、TNM分期、淋巴結轉移相關[8]。本研究發現P120ctn、E-cadherin表達下調與宮頸癌的侵襲與淋巴結轉移相關。二者在伴淋巴結轉移及侵及深肌層病例中的低表達率分別顯著高于在不伴淋巴結轉移及侵及淺肌層的子宮頸癌。提示E-cadherin、P120ctn表達下調的子宮頸癌細胞間黏附失去穩定性，可能導致癌細胞間粘附力下降或發生EMT，進而促進癌細胞侵入子宮頸壁及轉移至淋巴結。有研究發現E-cadherin表達缺失導致P120ctn在胞漿中異位表達，通過調節Rho-GTPases的活性而促進腫瘤的轉移[9]?？梢奅-cadherin與P120ctn表達異常可能促進了宮頸癌的侵襲與轉移。

本研究結果顯示P120ctn異位表達與E-cadherin異位