茴拉西坦及其制劑含量測定方法的改進

郭志淵 徐燕 傅萍

（四川省食品藥品檢驗所，四川 成都 610097）

茴拉西坦為腦功能改善藥，曾用名阿尼西坦，通過血腦屏障選擇性作用于中樞神經系統。現行標準茴拉西坦及其制劑的含量測定均采用以甲醇－水為流動相的HPLC法或紫外分光光度法進行測定［1－4］；文獻報道茴拉西坦及其制劑的檢測方法也以甲醇－水為流動相［5－7］。在檢測中發現茴拉西坦樣品在甲醇及流動相中的穩定性相當差影響到最后的檢測結果。本文采用以乙腈－水（35：65）為流動相的HPLC法對茴拉西坦的含量進行測定，大大提高了樣品溶液的穩定性，使測定結果更準確、可靠。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

Waters2695－2487高效液相色譜儀，Agilent1200高效液相色譜儀；茴拉西坦原料（晉城海斯制藥有限公司提供）；乙腈為色譜純。

1.2 方法

1.2.1 色譜條件

色譜柱：Altima C18柱 250×4.6mm 5μm，Agilent EclipssXDB－C18柱250×4.6mm 5μm，流動相：乙腈－水（35：65）；檢測波長采用283nm，理論板數以茴拉西坦計算應不低于1500。

1.2.2 測定方法

取本品適量，精密稱定，加流動相使溶解并稀釋制成每1ml中含茴拉西坦0.08mg的溶液，作為供試品溶液。精密量取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取茴拉西坦對照品，同法處理作為對照品溶液。

1.2.3 專屬性試驗

吸取對照品溶液、供試品溶液、及按供試品溶液制備方法制成的空白輔料溶液各10μl注入液相色譜儀。照1.2.1方法測定。

1.2.4 線性關系

精密稱取對茴拉西坦對照品19.48mg置25ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1、2、5、10、20、40、80ml分別置100ml量瓶中用流動相稀釋至刻度。精密量取10 μl，注入液相色譜儀，照1.2.1方法測定。

1.2.5 精密度試驗

精密量取對照品溶液10μl，連續進樣6次，照1.2.1方法測定。

1.2.6 重現性試驗

取同一批6份，制備供試品溶液，照1.2.1方法測定。

1.2.7 穩定性試驗

取本品供試品溶液分別在0、1、2、4、8h進樣，照1.2.1方法測定。

同時照1.2.1方法，以甲醇－水（60：40）為流動相測定供試品溶液在0、1、2、4、8h的穩定性。

1.2.8 回收率試驗

按處方比例精密稱取一定量的空白輔料（對應于茴拉西坦10mg）9份，分別置10ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取2ml置25ml量瓶中，各精密加入茴拉西坦對照品溶液（濃度0.9212mg·ml－1）1.6ml、2.0ml、2.4ml，加流動相稀釋至刻度，照1.2.1方法測定。

1.2.9 樣品含量測定

取各劑型的樣品照1.2.2測定方法測定。

2 結果

2.1 專屬性試驗結果

結果空白輔料溶液在與對照品色譜相應的位置上無吸收，證明空白輔料溶液無干擾，對照品、供試品及空白溶液色譜圖見圖1～3。

圖1 空白輔料溶液色譜圖

圖2 供試品溶液色譜圖

2.2 線性關系測定結果

以進樣量（μg）為橫坐標，峰面積為縱坐標進行線性回歸，直線回歸方程為 Y＝2.7004×106X－4.6914×104，R＝1.0000。由回歸方程和直角坐標圖可見，茴拉西坦進樣量在0.07792～6.2336μg范圍內，進樣量與峰面積呈良好的線性關系。

圖3 對照品溶液色譜圖

2.3 精密度試驗測定結果

以測得峰面積，計算RSD0.14%，精密度良好。

2.4 重復性試驗測定結果

計算得茴拉西坦的平均含量為100.6%，RSD為0.97%。

2.5 穩定性試驗測定結果

8小時內茴拉西坦峰面積的RSD為0.46%，表明供試品溶液在8小時內穩定，能滿足測定需要。而當流動相為甲醇－水（60：40）時8小時內茴拉西坦峰面積的RSD為1.76%。

表1 乙腈－水（35∶65）為流動相的穩定性

表2 甲醇－水（60∶40）為流動相的穩定性

回收率測定結果 通過峰面積，計算回收率，茴拉西坦的平均回收率為100.2%，RSD1.6%。

表3 回收率試驗

2.7 樣品測定結果

結果見表4。

表4 樣品測定

3 討論

3.1 流動相的選擇

本實驗考察了不同的流動相及相應的溶劑：甲醇－水（60：40）、乙腈－水（35：65）。發現當以甲醇－水（60：40）為流動相及溶劑時，茴拉西坦8小時內峰面積RSD為1.76%，樣品穩定性差，不能滿足測定需求；而用乙腈－水（35：65）為流動相及溶劑時，樣品穩定性較好，8小時內峰面積RSD為0.46%，測定精密度大大提高。所以本文最終選擇以乙腈－水（35：65）為流動相。

3.2 檢測波長的選擇

茴拉西坦及其制劑的原標準［1－4］及文獻報道的茴拉西坦含量測定方法［5，7］的檢測波長均不一致，并且考慮到改換溶劑后樣品的最大吸收也會發生位移，所以本實驗也對以乙腈－水（35：65）為溶劑的供試品溶液進行了紫外掃描，發現茴拉西坦在283nm處有最大吸收。故選283nm為檢測波長。

綜上所述，本文建立的茴拉西坦及茴拉西坦系列制劑的含量測定方法改變了現有標準［1－3］的流動相及檢測波長，結果重現性更好，更準確可靠。

1 國家藥典委員會.新藥轉正標準［S］.第25冊.北京：人民衛生出版社，2002，965－968.

2 國家藥典委員會.新藥轉正標準［S］.第46冊.北京：人民衛生出版社，2002，21－21.

3 國家藥典委員會.新藥轉正標準［S］.第51冊.北京：人民衛生出版社，2005，183－183.

4 國家藥典委員會.新藥轉正標準［S］.第65冊.北京：人民衛生出版社，2009，134－134.

5 婁志紅，苑淑俐.HPLC法測定茴拉西坦膠囊含量［J］.黑龍江醫藥，2006，19（5）：333－334.

6 許晉星.HPLC法測定茴拉西坦分散片的有關物質［J］.廣東藥學院學報，2009，25（4）：373－375.

7 劉東權，王曉文，陳鑫，等.HPLC法測定茴拉西坦咀嚼片中的含量［J］.中國醫藥指南，2012，10（02）：19－21.