南山藤的化學(xué)成分研究

嚴 英，張朝鳳，張 勉

中國藥科大學(xué) 教育部現(xiàn)代中藥重點實驗室；生藥學(xué)研究室，南京 211198

南山藤（Dregea volubilis）為蘿藦科南山藤屬植物，又名苦藤、嘿吻牧、苦菜藤、各山消、木通藤等，為云南傣族民間習(xí)用藥物，本品味苦、辛、性涼，具祛風(fēng)、除濕、止痛、清熱、和胃等功效。根據(jù)研究報道，南山藤中主要成分為C21甾體苷類，南山藤苷Ap1和Ao1具有抗癌活性[1]。前期研究發(fā)現(xiàn)，南山藤莖的乙酸乙酯萃取物，具有較好的免疫抑制活性[2]，在此基礎(chǔ)上本文對活性部位成分進行研究，分離鑒定了6個化合物，其中化合物1為新三聚寡糖，初步研究結(jié)果表明，南山藤的活性物質(zhì)可能為C21甾體苷。

1 儀器與材料

Kofle X-4數(shù)顯熔點測定儀 （溫度計未校正）；Bruker ACF-300 MHz型核磁共振儀 （TMS為內(nèi)標）；Agilent 1100 series LC-MSD Trap質(zhì)譜儀。

柱色譜用硅膠和高效薄層硅膠板（安徽良臣硅膠源材料有限公司）；Sephadex LH-20（Pharmacia公司）；MCI-GELCHP-20P（日本三菱化工）；所用試劑均為分析純。

實驗材料采自西雙版納，由本課題組張朝鳳鑒定原植物為蘿藦科南山藤 Dregea volubilis（L.f.）Benth.，憑證標本存放于中國藥科大學(xué)生藥教研室。

2 提取與分離

取南山藤干燥莖（8 kg）粉碎，80%乙醇熱回流提取3次，每次2 h，回收乙醇溶液，濃縮得到乙醇總浸膏，加水混懸，依次用乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取。乙酸乙酯部位經(jīng)硅膠柱色譜，二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到8個流份（Fr.A～H）。餾分Fr.C經(jīng)硅膠柱色譜，二氯甲烷-甲醇（40∶1～20∶1）梯度洗脫，再經(jīng)多次MCI-gel柱色譜，85%甲醇洗脫得化合物1（11 mg），2（10 mg），3（22 mg）。 餾分 Fr.D 經(jīng)硅膠柱色譜，二氯甲烷-甲醇（40∶1～9∶1）梯度洗脫，分別經(jīng)MCI-gel（85%甲醇）柱色譜和 sephadex LH-20（甲醇），最后經(jīng)半制備液相色譜（30%乙腈）純化得化合物 4（7 mg），5（5 mg）。 餾分 Fr.E 經(jīng)硅膠柱色譜，二氯甲烷-甲醇（15∶1）洗脫后經(jīng) MCI-gel（85%甲醇）柱色譜，最后經(jīng)半制備液相色譜（45%乙腈）純化，得到化合物 6（14 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物2、3、5、6與文獻比較，數(shù)據(jù)基本一致，分別鑒定為 β-D-黃夾吡喃糖基-（1→4）-β-D-磁麻吡喃糖苷[3]，marsectohexol[4]，dregeosides Da1[4]，dregeosides A11[1]。

化合物1 白色粉末 （甲醇），mp 146～148℃，20%硫酸乙醇顯藍綠色。HR-ESI-MS m/z：503.2461（calcd:503.2463[M+Na]+）。1H-NMR（C5D5N，500 MHz）和13C-NMR的數(shù)據(jù)見表1。參考文獻[3]，推測其結(jié)構(gòu)中含1個黃夾糖，1個磁麻糖和1個阿洛糖片段，根據(jù)HMBC譜確定糖的連接順序，磁麻糖中端基質(zhì)子信號H-1（δH5.08）與黃夾糖中C-4（δC83.2）相關(guān)，阿洛糖的端基質(zhì)子信號 H-1（δH5.12）與磁麻糖C-4（δC83.3）相關(guān)。根據(jù)端基質(zhì)子的偶合常數(shù)3JH1，H2>7 Hz，確定該糖均為β構(gòu)型。化合物1結(jié)構(gòu)為 β-D-黃夾吡喃糖基-（1→4）-β-D-磁麻吡喃糖基-（1→4）-β-D-阿洛吡喃糖苷（見圖 1）。

化合物4 白色粉末，20%硫酸乙醇顯藍灰色。HR-ESI-MS m/z：533.3085[M+Na]+。 [α]D（c 0.1 MeOH） =+9.4。1H-NMR （500 MHz，CDCl3）δ：1.13（3H，s，18-CH3)，1.18（3H，s，19-CH3），1.24（3H，d，J=6.0 Hz，21-CH3），1.28（3H，d，J=6.5 Hz，6′-CH3），3.44（3H，s，3′-OCH3），4.78 （1H，dd，J=7.5，2.0 Hz，1′-H），5.46（1H，d，J=5.5 Hz，6-H），13C-NMR(125 MHz，CDCl3）δ：39.1 （C-1），29.6 （C-2），77.6 （C-3），39.2（C-40，140.2 （C-5），121.2 （C-6），27.5 （C-7），38.6（C-8），49.1 （C-9），38.7 （C-10），71.3 （C-11），81.1（C-12），52.1（C-13），85.0（C-14），34.1（C-15），26.7（C-16），55.6（C-17），9.8（C-18），18.3（C-19），69.8（C-20），22.9（C-21），95.4（C-1′），33.4（C-2′），77.6（C-3′），72.5（C-4′），70.8（C-5′），18.7（C-6′），57.2（C-3′-OCH3）。 與文獻[5]比較，數(shù)據(jù)基本一致，鑒定化合物4為 drevogenin D 3-O-methyl-6-deoxy-β-D-cymaropyranosid（見圖 2）。

表1 化合物1的1H-，13C-NMR數(shù)據(jù)（500 MHz，pyridine-d5）

圖1 化合物1的結(jié)構(gòu)式

圖2 化合物4的結(jié)構(gòu)式

[1] Yoshimura S,Narita H,Hayashi K,et al.Studis on the constituents of Asclepiadaceae plants.LVI.Isolation of new antitumor active glycosides from Dregea volubislis (L.)Benth [J].Chem Pharm Bull,1983,31(11):3971-83.

[2] Gong FY,Shen Y,Zhang CF,et al.Dregea volubilis ameliorates concanavalin a-induced liver injury by facilitating apoptosis of activated T cells[J].Exp Biol Med,2008,233(9):1124-32.

[3] 沈小玲，木全章.苦繩的寡糖成分 [J].化學(xué)學(xué)報，1990，48（7）：709-13.

[4] Yoshimura S,Narita H,Hayashi K,et al.Studis on the constituents of Asclepiadaceae plants.LIX.The structures of five new glycosides from Dregea volubislis(L.)Benth[J].Chem Pharm Bull,1985,33(6):2287-93.

[5] Sangeeta S,Naveen K,Anakshi K.Three pregnane glycosides from Pergularia pallida[J].Nat Prod Communications,2007,2(1):27-33.